青蒿素对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠R97-116抗体及细胞因子的影响

目的探讨青蒿素(artemisinin)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠R97-116抗体及干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)表达水平的影响。方法采用鼠源AChRα亚基97-116肽段免疫方法建立EAMG大鼠模型,将造模成功的大鼠20只随机分为青蒿素小、中、大剂量组和EAMG对照组。青蒿素小、中、大剂量组分别给予15、30、45mg/(kg·d)青蒿素溶液灌胃治疗,1次/d,模型对照组给予等浓度二甲基亚砜水溶液灌胃。评测各组大鼠体质量和临床症状,采用流式细胞术检测淋巴结单个核细胞悬液细胞因子IFN-γ、IL-17水平,ELISA法检测血清抗R97-116IgG/IgG1/IgG2b水平。结果青蒿素中、高剂量组大鼠体质量高于对照组(P<0.05);青蒿素各剂量组大鼠临床评分低于对照组(P<0.05)。青蒿素各治疗组IFN-γ、IL-17水平均低于对照组(P<0.01)。青蒿素15mg/(kg·d)剂量组血清IgG、IgG1、IgG2b水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);30mg/(kg·d)剂量组血清IgG(P<0.05)、IgG1(P<0.01)、IgG2b(P<0.01)水平低于对照组;45mg/(kg·d)剂量组血清IgG(P<0.05)、IgG1(P<0.01)水平低于对照组。结论青蒿素能改善EAMG大鼠临床症状,对EAMG大鼠具有免疫调节作用,其机制可能与其通过直接或间接降低血清抗R97-116抗体水平、抑制淋巴结单个核细胞分泌IFN-γ和IL-17促炎性因子有关。

抗毒蕈碱受体3(M3R)抗体、抗α-胞衬蛋白抗体和抗SSA抗体、抗SSB抗体在原发性干燥综合征诊断中的价值

目的:了解抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体检测在原发性干燥综合征(PSS)诊断中的价值。方法:检测88例PSS患者,34例其他风湿病患者及30名健康对照血清中抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗体SSA抗体、抗SSB抗体,比较四种抗体单独或联合检测对诊断PSS的敏感性和特异性。结果:PSS组抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性率及平均浓度显著高于其他风湿病组及健康对照组(P<0.05)。M3R对PSS敏感性最高(81.8%);SSB抗体特异性最高(74.8%)。结论:联合检测抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体比其中单独检测一种抗体的敏感性高,有助于提高PSS诊断的敏感性和特异性。

免疫抑制剂对糖尿病小鼠胰岛细胞移植长期存活效果的研究

目的观察胰岛细胞移植后应用免疫抑制剂对胰岛组织长期存活的影响。方法对Wistar大鼠胰腺进行灌注,分离和纯化胰腺的胰岛细胞;将纯化的胰岛移植入C57BL/6糖尿病小鼠肾包膜下,分组对移植后的小鼠进行不同免疫抑制剂(他克莫司、雷帕霉素、抗白介素-2R抗体)不同方案联合治疗,比较各个方案组与对照组(不同任何免疫抑制剂)的差异性。并对术后移植物存活时间、糖耐量试验以及外周血CD4+、CD8+T细胞亚群和IL-2含量进行分析和比较。对移植部位进行组织学切片,分析胰岛周围单核细胞现象。结果单纯移植组在无任何免疫抑制剂的情况下,异种胰岛一般在术后10天左右丧失功能,外周血中CD4+T细胞亚群明显高于使用免疫抑制剂组(P<0.05),而CD8+T细胞亚群没有明显变化(P>0.05),IL-2含量各组无明显差异(P>0.05)。各实验组1周后血糖浓度变化与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。应用T+R+A组,移植受体存活时间最长平均为161.4±40.4天。结论他克莫司、雷帕霉素及抗白介素-2R抗体联合用药,能够不同程度的提高胰岛细胞移植后糖尿病小鼠的存活时间。

AG490对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用

目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠的治疗作用。方法用人工合成的大鼠乙酰胆碱受体α亚基的97-116肽段免疫Lewis大鼠,建立EAMG模型,将12只大鼠随机、平均分为AG490治疗组及对照组,双盲法隔日评估大鼠临床症状并评分。流式细胞术检测淋巴结单个核细胞中细胞因子IL-6及IL-21的分泌;CCK-8及羟基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)检测淋巴结单个核细胞的增殖;ELISA检测大鼠血清中抗R97-116抗体水平。结果自免疫后第13天开始,AG490治疗组临床症状较对照组明显缓解,并且第27、29、31、33、37、39、41天时,两组肌力评分的差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,AG490治疗组中的细胞因子IL-6、IL-21的分泌减少(P<0.01);AG490治疗组中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b的分泌减少(P<0.01);与对照组相比,AG490治疗组的淋巴细胞的增殖受到抑制。结论 AG490通过抑制细胞因子IL-6及IL-21的分泌,降低大鼠血清中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b水平,缓解EAM G大鼠病情。

1,25(OH)_2D_3诱导实验性自身免疫性重症肌无力大鼠免疫耐受的机制

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠产生免疫耐受以及免疫耐受的机制。方法采用人工合成的大鼠来源乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段(R97-116)免疫Lewis大鼠制备EAMG模型,随机分为1,25(OH)2D3治疗组(实验组)和对照组。进行临床症状评分、测量体质量,采用流式细胞术检测淋巴结MNC表型(CD80、CD86、MHC-II)和调节性T细胞的比例,采用CCK-8法测定特异性淋巴细胞增殖程度,采用流式细胞术测定细胞周期的分布,采用ELISA法检测淋巴结单核细胞(MNC)培养液中IL-4、IFN-γ、IL-17含量和血清中抗R97-116 IgG水平。结果从首次免疫后28 d开始,实验组临床症状评分显著低于对照组(P<0.01)。从首次免疫后35 d开始,实验组体质量显著高于对照组(P<0.01)。实验组淋巴结MNC表面CD80、CD86的表达较对照组显著降低(P<0.05)。实验组淋巴结MNC中CD4+CD25+T细胞和CD4+FoxP3+T细胞的表达显著高于对照组(P<0.01,P<0.05)。实验组淋巴结MNC的淋巴细胞增殖反应较对照组显著降低(P<0.01)。实验组淋巴结S期细胞的百分比显著低于对照组(P<0.05),S期和G2/M期细胞的百分比也显著低于对照组(P<0.05)。实验组R97-116肽激活的淋巴细胞MNC上清液中IL-4水平较对照组显著增高(P<0.05),IFN-γ和IL-17水平较对照组显著降低(P<0.05)。实验组血清中抗R97-116 IgG水平显著低于对照组(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3通过诱导免疫耐受显著地改善EAMG大鼠的临床症状,其免疫耐受机制与降低MNC表面CD80和CD86的表达、上调调节性T细胞数量和Foxp3的表达、抑制淋巴细胞增殖、改变淋巴细胞周期、Th1/Th17型细胞反应向Th2型细胞反应的转化及降低抗R97-116 IgG抗体水平有关。