大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型发病机制探讨

目的 探讨大鼠抗 Thy1系膜增生性肾炎模型发病机制。方法 制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清 (ATS) ,再将 ATS经尾静脉注射给模型组 Wistar大鼠 ,诱导其发生系膜增生性肾炎 (Ms PGN) ;另设正常对照组 ,静脉注射生理盐水。隔天测定 2 4 h尿蛋白定量 ,放免法测定血清细胞因子含量 ,显微镜观察肾脏系膜组织增殖程度 ,BI2 0 0 0图像分析系统对肾小球系膜区进行分析。分别于注射 ATS后 1、3、5及 7d各时间点处死模型组大鼠 6只。结果 模型组与对照组比较 ,尿量、饮水量变化无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;模型组 1、3、5及 7d尿蛋白定量与对照组相应时间点比较均明显升高 (P<0 .0 0 1～ 0 .0 0 5 ) ;各时间点大鼠血清 IL - 1、IL - 6及 TNF含量均高于对照组 (P<0 .0 0 1～ 0 .0 0 5 ) ;模型组肾小球系膜细胞及基质明显增生。结论 细胞因子可能在鼠抗

商陆皂苷甲对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎的治疗作用

目的:探讨商陆皂苷甲(EsA)对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎的治疗作用。方法:制备大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型,随机分为EsA治疗组、地塞米松治疗组、未治疗组(模型组)。另设正常对照组。隔日测定24h尿蛋白定量。所有大鼠第8天处死,取肾脏组织,显微镜观察肾组织系膜增生程度,利用图像分析系统对系膜区占据肾小球面积进行分析。结果:EsA治疗组及地塞米松治疗组3、5、7天24h尿蛋白与模型组相应时间点比较均明显下降(P<0.01～0.001);EsA治疗组及地塞米松治疗组肾小球系膜细胞及基质增生程度较模型组明显减轻(P<0.05)。结论:EsA对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎具有降低尿蛋白、抑制肾小球系膜细胞及系膜基质的增生的作用。

ANAE染色和抗Thy1-SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究

目的建立 ANAE染色联合抗 Thy1SPA菌体花环双标记法 ,并试图利用此法证明抗θ抗体对 ANAE阳性淋巴细胞的特异作用。方法利用双标记法对正常小鼠胸腺及脾细胞进行检测 ,观察抗 Thy1SPA抗体对 ANAE阳性细胞结合的专一性。结果双标记法中 ,抗 Thy1SPA菌体花环阳性同 ANAE阳性一样 ,能很好反映 6 15小鼠胸腺或脾脏 T细胞数 (P>0 .0 5 ) ;胸腺和脾脏细胞 Thy1+ - ANAE+ 率 ,即双标记阳性率略低于总的 ANAE+ 或总抗θ菌体花环 + 数 ,但 3者之间有明显的相关性。结论成功建立了 ANAE-抗 Thy1SPA菌体花环法 ,并首次用此法证明抗θ血清对

单克隆抗体OX7的制备及大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型的建立

目的:制备单克隆抗体OX7(monoclonal antibody OX7,mAb OX7)及建立大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型。方法:弗氏不完全佐剂预免疫Balb/c小鼠,腹腔注射OX7细胞,Protein A亲和层析法纯化腹水,用SDS-PAGE鉴定纯化后抗体的纯度。将所得抗体尾静脉注射Wistar大鼠,PAS染色观察正常对照组注射前及注射后第3天、第7天大鼠肾脏病理组织学改变。结果:SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体有IgG的轻链和重链两条带,无其他杂带,抗体浓度为2.06 mg/ml。PAS染色显示正常对照组肾小球结构正常,毛细血管袢开放良好;模型组第3天开始出现大量系膜细胞破坏,系膜基质溶解,肾小球毛细血管扩张;第7天系膜细胞重度增生。结论:通过将OX7细胞注入小鼠腹腔并用Protein A亲和层析法纯化腹水,可成功制备高效价、高纯度及特异性强的mAb OX7,该抗体可成功建立抗Thy1系膜增生性肾炎动物模型。

来氟米特联合苯那普利对慢性抗thy1肾炎大鼠蛋白尿及肾功能的影响

目的探讨来氟米特联合苯那普利对慢性抗thy1肾炎大鼠蛋白尿及肾功能的影响。方法雄性Wistar大鼠行单侧肾切除后随机分为单纯肾切组、模型对照组、来氟米特治疗组、苯那普利治疗组及来氟米特联合苯那普利治疗组,每组12只,除单纯肾切组外,其余各组在单侧肾切除后3 d尾静脉注射OX7抗体(100 mg/kg),1周后尾静脉连续注射OX7抗体(每次100 mg/kg,1次/周,共3次),单纯肾切除组在同一时间尾静脉注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS),注射抗体后第2天分组给予来氟米特、苯那普利及来氟米特联合苯那普利治疗,单纯肾切组、模型对照组给予相应量的蒸馏水。分别于第4、8、12周观察各组大鼠的一般情况、血压、尿蛋白、肾功能及肾脏病理改变。结果与模型对照组比较,来氟米特、苯那普利及来氟米特联合苯那普利治疗可以显著改善大鼠的一般情况,减低24 h尿蛋白排泄量和血肌酐水平(P<0.05),减轻肾小球硬化和肾小管间质病变。来氟米特联合苯那普利治疗降尿蛋白、血肌酐、减轻肾脏病理损害作用比单独用药效果好。结论来氟米特联合苯那普利治疗可以减轻肾小球硬化和肾小管间质病变,减少蛋白尿,延缓肾功能进展。

慢性抗Thy1抗体肾炎模型的研究进展

慢性抗thy1抗体肾炎模型由于其疾病过程与人类IgA肾病及其他的系膜增生性肾炎的疾病进程相似,可以用作研究慢性肾脏病的发病机制以及新的治疗策略,本文就慢性抗thy1抗体肾炎模型的建立方法、病理演变过程、发病机制及治疗进展做一综述。

抗Thy1系膜增生性肾炎大鼠模型的制备

目的:建立抗Thy1系膜增生性肾炎动物模型。方法:利用Ox-7杂交瘤细胞株产生抗Thy1抗体,纯化后尾静脉注射SD大鼠建立抗Thy1系膜增生性肾炎动物模型,不同时间点(0、3、5、7、10、14天)检测肾功能和尿蛋白定量,留取肾组织做病理,提取总蛋白。结果:抗Thy1肾炎模型组大鼠与对照组大鼠相比,第5天和第7天24小时尿蛋白定量显著升高(p<0.05,n=6),第10天后24小时尿蛋白定量开始下降,与系膜增殖变化程度一致。结论:本研究成功制备了抗Thy1肾炎大鼠模型,为研究系膜增生性肾炎提供了新的方法。

苯那普利联合来氟米特影响慢性抗Thy1肾炎大鼠蛋白尿及肾功能的研究

目的研究苯那普利与来氟米特两药联用对慢性抗Thy1肾炎大鼠模型的蛋白尿和肾功能有何治疗作用。方法借助雄性Wistar大鼠,尾静脉4次注射抗大鼠胸腺细胞血清(anti-thymocyte serum,ATS)造模,注射抗体后即开始予药物干预治疗,分别于第0、4、8、12周观察各组大鼠的24h尿蛋白排泄量,第12周末处死时采血测定各组大鼠的肾功能。结果①造模后各组大鼠的尿蛋白、肾功能均较假手术组升高,成功复制慢性系膜增生性肾炎模型。②苯那普利、来氟米特、联合用药干预后,各组大鼠的24h尿蛋白排泄量、肾功能均较模型组显著改善。③联合用药组减少尿蛋白、改善肾功能的疗效早于、优于单用苯那普利、来氟米特组。结论苯那普利联合来氟米特能显著减少慢性抗Thy-1肾炎大鼠模型的蛋白尿,保护肾功能,能够在病变早期延缓慢性肾脏病的病变进程,其效果早于、优于两药单独应用。

缬沙坦联合氨氯地平对抗Thy1肾小球肾炎大鼠系膜增生的拮抗作用研究

目的探究缬沙联合坦氨氯地平对抗Thy1肾小球肾炎大鼠系膜增生拮抗作用。方法大鼠经尾静脉一次性注射兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清建立抗Thy1肾小球肾炎模型,并将建模成功的大鼠随机分为模型组、对照组、实验组和联合组,每组12只;另取12只大鼠注射等量0.9%NaCl作为正常组。对照组给予16 mg·kg^(-1)缬沙坦,实验组给予10 mg·kg^(-1)氨氯地平,联合组给予16 mg·kg^(-1)缬沙坦+10 mg·kg^(-1)氨氯地平,正常组和模型组均给予等量0.9%NaCl。5组大鼠每天灌胃给药1次,连续给药14 d。用全自动生化分析仪检测尿液中的24 h尿蛋白(24 h UP)、血尿素氮(BUN)和血清肌酸酐(SCr)含量,用蛋白质印迹法检测肾组织中p38丝裂原激活蛋白激酶/核转录因子κB(p38MAPK/NF-κB)通路蛋白的表达水平。结果联合组、实验组、对照组、模型组和正常组的24 h UP分别为(2.03±0.31)、(3.75±0.94)、(3.68±0.92)、(4.95±1.23)和(0.27±0.07)mg·d^(-1),BUN分别为(13.16±3.29)、(17.65±4.41)、(17.94±4.49)、(22.75±5.69)和(8.96±2.24)μmol·L^(-1),SCr分别为(50.15±12.53)、(62.05±15.51)、(63.13±15.78)、(83.27±20.82)和(40.15±10.03)μmol·L^(-1),p-p38MAPK/p38MAPK分别为0.51±0.13、0.70±0.17、0.72±0.18、0.99±0.25和0.21±0.05,NF-κB p65蛋白相对表达水平分别为0.55±0.14、0.79±0.20、0.81±0.21、1.12±0.28和0.18±0.05。实验组、对照组、联合组的上述指标均较模型组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);联合组的上述指标均较实验组和对照组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论缬沙坦联合氨氯地平对抗Thy1肾小球肾炎大鼠系膜增生有拮抗作用,其可能是通过抑制p38MAPK/NF-κB通路活化,抑制肾组织炎症反应而实现的。