结球甘蓝抗TuMV相关基因的克隆

以结球甘蓝高抗TuMV自交不亲和系 84 0 75为材料 ,构建了cDNA文库。根据抗病基因保守序列 (NBS LRR)设计一对简并引物 ,以 84 0 75的基因组DNA和cDNA为模板 ,进行PCR扩增 ,分别扩增出一条 5 13bp片段 ,对扩增片段进行了克隆测序。选取两个与抗病基因同源性较高的克隆片段作探针 (命名Bor1,Bor2 ) ,对构建的cDNA文库进行筛选 ,得到一个阳性克隆 (命名TuR2 )。测序及序列分析表明 ,该基因总长为 76 2bp ,编码 2 2 6个氨基酸 ,包含 6 81bp的开放阅读框 ,与已克隆的抗病基因有不同程度的同源性。利用TuR2作探针 ,进行了Southern杂交、Northern杂交以及抗病性的共分离检测分析。结果表明 ,TuR2可能以单拷贝形式存在 ,其表达是组成型的 ,且无组织特异性 ;

不结球白菜种质资源对TuMV的抗性鉴定与评价

分别利用苗期人工接种鉴定及ELISA检测方法,对127份不结球白菜种质资源进行芜菁花叶病毒（TuMV）的抗性鉴定。结果显示,苗期人工接种鉴定的病情指数（DI）分布在3.55~95.68之间,不同种质间表现出较大的抗性差异。不同抗性级别的次数分布图基本符合正态分布,略向感病区域偏离。基于病情指数的聚类分析结果与抗病性分级基本一致。通过苗期鉴定共筛选获得高抗TuMV的不结球白菜种质6份,抗病种质13份,其主要农艺性状表现出一定的多样性。其中叶面皱缩和具有刺毛的抗病材料所占比例较高,可能与TuMV抗性存在一定的相关性。ELISA检测结果显示,117份供试种质的P/N值分布在3.10~25.37之间,不同种质间表现出病毒含量的差异,但与DI值未呈现明显相关性,可作为抗病材料筛选的辅助指标。

大白菜芜菁花叶病毒病抗性遗传及分子标记筛选

为了对大白菜芜菁花叶病毒病的抗性遗传规律进行研究,并筛选相关的分子标记,分别以高抗TuMV的高代自交系材料73和感TuMV的自交系材料06-247为亲本,构建其BC1群体,运用摩擦接种法以TuMV的C4株系对上述群体进行接种,同时采用生物学观察法进行抗病性鉴定,采用BSA法筛选相关基因的分子标记。研究结果表明,在该试验组合中,TuMV抗性是由一对隐性基因控制的,筛选出与该基因连锁的3个分子标记BrID90143(4.2 cM)、BrSSR4068(4.2 cM)和BrID10645(10.1 cM),为大白菜抗TuMV分子标记辅助选择及相关基因的精细定位奠定了基础。

Identification of Molecular Markers Linked to TuMV Resistant Gene in Cabbage

A total of 144 F2 individuals were obtained from the crossing between 1047 (susceptible) and A21 (resistant). Two RAPD markers were screened out in 200 random primers using BSA(Bulked Segregant Analysis). Two RAPD markers, designated as AG13/2000 and U16/660, were 7.7 cM and 8.38 cM apart from the TuMV resistant gene, respectively. The two RAPD fragments were converted to SCAR markers. SCAR markers were confined in germplasm.