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立体分子伴侣-脂肪酶特异折叠酶
1
作者 郑小梅 初晓宇 +1 位作者 伍宁丰 范云六 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2011年第6期66-71,共6页
细菌脂肪酶是一类重要的工业用酶,尤其以来源于假单孢杆菌Pseudomonas与伯克霍尔德菌Burk-holderia的脂肪酶应用最为广泛。然而,这类脂肪酶折叠过程中存在一个巨大的能障而无法自发正确折叠。研究发现,这类脂肪酶的编码基因所在操纵子... 细菌脂肪酶是一类重要的工业用酶,尤其以来源于假单孢杆菌Pseudomonas与伯克霍尔德菌Burk-holderia的脂肪酶应用最为广泛。然而,这类脂肪酶折叠过程中存在一个巨大的能障而无法自发正确折叠。研究发现,这类脂肪酶的编码基因所在操纵子中往往存在一个与其折叠相关的基因,编码一种脂肪酶特异折叠酶。该类蛋白为脂肪酶的立体分子伴侣,可与脂肪酶的折叠中间体相互作用,帮助脂肪酶越过折叠过程中的能量障碍,为其获得正确构象提供必要的空间信息。详细阐述了脂肪酶特异折叠酶的发现、分类、作用机制与应用前景。 展开更多
关键词 细菌脂肪 脂肪特异折叠酶 立体分子伴侣 蛋白折叠
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脂肪酶的特异性折叠酶
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作者 程蓝骍 舒正玉 +4 位作者 吴继光 陈的 蒋咏梅 李欣 黄建忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期35-39,共5页
以Pseudomonas aeruginosa为代表的I.1亚家族脂肪酶和以Burkholderia cepacia为代表的I.2亚家族脂肪酶具有优良的手性化合物拆分性能,在绿色化工领域具有良好的开发潜力及其应用前景。I.1亚家族脂肪酶和I.2亚家族脂肪酶均采用II型分泌... 以Pseudomonas aeruginosa为代表的I.1亚家族脂肪酶和以Burkholderia cepacia为代表的I.2亚家族脂肪酶具有优良的手性化合物拆分性能,在绿色化工领域具有良好的开发潜力及其应用前景。I.1亚家族脂肪酶和I.2亚家族脂肪酶均采用II型分泌机制进行分泌,其分泌依赖于一种分子伴侣——脂肪酶的特异性折叠酶(lipase specific foldase,Lif)的协助。从Lif蛋白的分类、结构特点、介导对应脂肪酶折叠的特异性及机制、lif基因表达调控机制及尚待探讨的问题等方面系统介绍Lif蛋白的研究进展。 展开更多
关键词 脂肪 脂肪特异性折叠酶 伴侣蛋白
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人蛋白质二硫键异构酶cDNA基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:10
3
作者 高音 杨志伟 +3 位作者 华振玲 高虹 万平 黎红晔 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期349-354,共6页
从人胚胎肝组织中分离纯化出总RNA,在总RNA中提取mRNA,经逆转录得到cDNA第一条链,并以之为模板和相应寡聚脱氧核苷酸为引物,进行PCR合成人蛋白质二硫键异构酶(Proteindisulfideisomeras... 从人胚胎肝组织中分离纯化出总RNA,在总RNA中提取mRNA,经逆转录得到cDNA第一条链,并以之为模板和相应寡聚脱氧核苷酸为引物,进行PCR合成人蛋白质二硫键异构酶(Proteindisulfideisomerase,PDI)cDNA基因,将所得cDNA克隆到质粒pUC18上,转化大肠杆菌DH5α细胞,进行诱导表达筛选和活性筛选。将筛选的基因克隆到载体pBV220上,在大肠杆菌细胞中表达,产物以溶解形式在胞浆中表达。表达产物经硫酸铵分级沉淀和DEAESepharoseFastFlow柱层析分离,产物的纯度与活性分别为90%、1100u/g。 展开更多
关键词 蛋白质折叠酶 二硫键异构 基因克隆 表达
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微生物脂肪酶活性构像的形成及激活过程中的影响因子 被引量:2
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作者 舒正玉 杨江科 +1 位作者 徐莉 闫云君 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期61-62,66,共3页
微生物脂肪酶是一类具有重要应用价值的生物催化剂。作为一种胞外酶,其活性构像的形成及激活是一个高度复杂而特异性的生理过程。综述了作为微生物脂肪酶的结构成分,参与脂肪酶折叠和激活过程中的各种因子及其作用机制,这些因子包括脂... 微生物脂肪酶是一类具有重要应用价值的生物催化剂。作为一种胞外酶,其活性构像的形成及激活是一个高度复杂而特异性的生理过程。综述了作为微生物脂肪酶的结构成分,参与脂肪酶折叠和激活过程中的各种因子及其作用机制,这些因子包括脂肪酶特异性的折叠酶、脂肪酶激活因子、前序列、钙离子和二硫键等。 展开更多
关键词 脂肪 折叠酶 激活因子 前序列 钙离子 二硫键
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大肠杆菌二硫键形成蛋白A(DsbA)研究进展 被引量:5
5
作者 罗曼 关怡新 姚善泾 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期7-15,共9页
二硫键形成蛋白A(DisulfidebondformationproteinA,DsbA)是存在于大肠杆菌周质胞腔内的一种参与新生蛋白质折叠过程中催化二硫键形成的折叠酶。综述了DsbA三维结构、进化过程、协助蛋白质体内外复性方面的研究进展。DsbA比硫氧还原蛋白... 二硫键形成蛋白A(DisulfidebondformationproteinA,DsbA)是存在于大肠杆菌周质胞腔内的一种参与新生蛋白质折叠过程中催化二硫键形成的折叠酶。综述了DsbA三维结构、进化过程、协助蛋白质体内外复性方面的研究进展。DsbA比硫氧还原蛋白具有更强的氧化性,其强氧化性来自于Cys30残基异常低的pKa值和不稳定的氧化型结构,通过定点突变的研究表明了Cys30残基是DsbA活性中心最关键的氨基酸残基之一。DsbA不论在体内与目标蛋白融合表达还是在体外以折叠酶形式添加,都能有效地催化蛋白质的折叠复性,同时DsbA还具有部分分子伴侣的活性。 展开更多
关键词 DSBA Dsb家族 折叠酶 蛋白质折叠
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Hsp70蛋白自身磷酸化对其分子伴侣功能的影响 被引量:1
6
作者 吕元明 陶蕾 张利能 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期553-558,共6页
近年对分子伴侣蛋白Hsp70作用机制的研究发现,其ATP功能区域X光晶体结构有一个新的钙离子结合区域,这个新的功能区域与Hsp70分子的ADP结合、ATP水解及合成有关.有报道认为,Hsp70蛋白的NDP激酶样作用,通过形成酸不稳定性自身磷酸化中间... 近年对分子伴侣蛋白Hsp70作用机制的研究发现,其ATP功能区域X光晶体结构有一个新的钙离子结合区域,这个新的功能区域与Hsp70分子的ADP结合、ATP水解及合成有关.有报道认为,Hsp70蛋白的NDP激酶样作用,通过形成酸不稳定性自身磷酸化中间体催化γ-磷酸基团在ATP和ADP间传递,组氨酸H89与这个新的区域有密切关系,有可能与Hsp70蛋白形成自身磷酸化中间体有关.本研究运用基因定位诱导突变技术,将89位组氨酸以丝氨酸替代(H89S),通过比较Hsp70野生型及突变型蛋白的自身磷酸化过程的改变,及其对Hsp70蛋白体外荧光素酶活性影响的不同,初步探讨Hsp70作用机制.结果发现,突变的H89S蛋白自身磷酸化过程及体外变性荧光素酶重折叠受到抑制.野生型蛋白未受到影响,野生型Hsp70可以形成酸不稳定的自身磷酸化中间体,产生CDP依赖性解磷酸反应,而H89S突变型蛋白不能形成这种反应.89位组氨酸点突变能显著降低ATP酶交换反应及体外变性荧光素酶重折叠水平,但它的自身磷酸化可能并非唯一必需的介导位点或只是一个选择性的功能侧链. 展开更多
关键词 HSP70 自身磷酸化 ATP合成及分解 荧光素折叠
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The roles of the proteasome pathway in signal transduction and neurodegenerative diseases 被引量:2
7
作者 陈皎皎 林芳 秦正红 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2008年第3期183-194,共12页
There are two degradation systems in mammalian cells, autophagy/lysosomal pathway and ubiquitin-proteasome pathway. Proteasome is consist of multiple protein subunits and plays important roles in degradation of short-... There are two degradation systems in mammalian cells, autophagy/lysosomal pathway and ubiquitin-proteasome pathway. Proteasome is consist of multiple protein subunits and plays important roles in degradation of short-lived cellular proteins. Recent studies reveal that proteasomal degradation system is also involved in signal transduction and regulation of various cellular functions. Dysfunction or dysregulation of proteasomal function may thus be an important pathogenic mechanism in certain neurological disorders. This paper reviews the biological functions of proteasome in signal transduction and its potential roles in neurodegenerative diseases. 展开更多
关键词 PROTEASOME signal transduction protein misfolding neurodegenerative disease
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PAQosome各亚基的基本功能研究概况
8
作者 石榴 韩铭 +3 位作者 袁晓雪 叶峰 成军 蔺淑梅 《医学综述》 CAS 2023年第18期3549-3554,共6页
PAQosome可协助热激蛋白90组装大量的大型多亚基蛋白复合物,并参与蛋白质合成、核糖体生物发生、转录、剪接等基本细胞功能。目前,PAQosome各亚基作用的相关研究主要集中在肿瘤方面,其在多数肿瘤中上调,且与肿瘤的发生、发展、预后密切... PAQosome可协助热激蛋白90组装大量的大型多亚基蛋白复合物,并参与蛋白质合成、核糖体生物发生、转录、剪接等基本细胞功能。目前,PAQosome各亚基作用的相关研究主要集中在肿瘤方面,其在多数肿瘤中上调,且与肿瘤的发生、发展、预后密切相关。此外,其还与阿尔茨海默病的发生、淋巴细胞和生殖细胞的发育、纤维化的形成有关,而上述功能的实现依赖于PAQosome各亚基的功能差异。因此,深入认识PAQosome各亚基的基本功能有助于进一步指导后续PAQosome在非肿瘤疾病中功能的研究。 展开更多
关键词 PAQosome 折叠亚单位 p53和DNA损伤调控分子1 非常规预折叠RNA聚合Ⅱ亚基5相互作用体 伴侣样普遍表达的预折叠蛋白 天冬酰胺合成结构域1上游开放读码框
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蛋白质二硫键异构酶既是酶又是分子伴侣 被引量:12
9
作者 王志珍 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第13期1345-1352,共8页
蛋白质和新生肽折叠的概念近十年来发生了重大的转变 .新生肽成熟为功能蛋白需要分子伴侣和折叠酶的帮助才能完成 .蛋白质二硫键异构酶是一种折叠酶 ,同时也有分子伴侣活性 ,该假说得到越来越多体内外实验的支持 .分子伴侣活力可能是酶... 蛋白质和新生肽折叠的概念近十年来发生了重大的转变 .新生肽成熟为功能蛋白需要分子伴侣和折叠酶的帮助才能完成 .蛋白质二硫键异构酶是一种折叠酶 ,同时也有分子伴侣活性 ,该假说得到越来越多体内外实验的支持 .分子伴侣活力可能是酶分子在进化过程中获得的新的性质 ,以提高酶的催化效率 。 展开更多
关键词 蛋白质 二硫键 异构 分子伴侣 折叠酶 PDI
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蛋白质折叠和分子伴侣 被引量:14
10
作者 王志珍 《生物学通报》 北大核心 2004年第5期1-6,共6页
关键词 分子伴侣 折叠酶 蛋白质 聚集 氨基酸序列 折叠
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基于生物信息学分析乳腺癌中UFC1表达及临床意义
11
作者 张彦收 韩磊 +3 位作者 刘学良 杨超 张庚 王新乐 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第13期3093-3097,共5页
目的通过生物信息学方法分析泛素折叠修饰因子(UFM)结合酶(UFC)1在乳腺癌中表达及临床意义。方法应用人类蛋白质表达图谱分析UFC1蛋白在乳腺癌组织中表达,利用TIMER2.0、UALCAN分析UFC1基因在乳腺癌中表达,应用Kaplan-Meier Plotter、UA... 目的通过生物信息学方法分析泛素折叠修饰因子(UFM)结合酶(UFC)1在乳腺癌中表达及临床意义。方法应用人类蛋白质表达图谱分析UFC1蛋白在乳腺癌组织中表达,利用TIMER2.0、UALCAN分析UFC1基因在乳腺癌中表达,应用Kaplan-Meier Plotter、UALCAN分析UFC1与乳腺癌预后的关系,使用String-DB数据库分析与UFC1相关蛋白共表达网络。结果UFC1在乳腺浸润癌中蛋白和mRNA表达均明显高于正常组织(P<0.05)。UFC1在正常组织中启动子甲基化水平明显高于癌组织(P<0.05)。生存分析显示,UFC1蛋白和mRNA低表达组总生存期(OS)明显优于高表达组(P<0.05)。与UFC1相互作用的蛋白质包括泛素样修饰激活酶(UBA)5、UFM1、胚胎致死性异常视觉样蛋白(ELAVL)1、DDRGK1、UFM连接酶(UFL)1、泛素蛋白连接酶(UBE2)M、UFM1特异性肽酶(UFSP)2、泛素结合酶(UB)E2F、UFSP1、周期素依赖性激酶5关联蛋白(CDK5RAP)3,参与蛋白质酰化和去酰化、细胞内雌激素受体信号通路的调控、内质网应激反应、泛素样蛋白结合酶活性等相关生物学过程。结论基于现有的肿瘤数据库进行生物信息学分析发现,UFC1在乳腺癌组织中表达升高,并能预测乳腺癌预后,UFC1可能作为潜在致癌基因为乳腺癌提供新的生物标志物。 展开更多
关键词 泛素折叠修饰因子(UFM)结合(UFC)1 乳腺癌 预后
原文传递
促进原核表达蛋白可溶性的研究进展 被引量:26
12
作者 张磊 唐永凯 +4 位作者 李红霞 李建林 徐逾鑫 李迎宾 俞菊华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期138-149,共12页
以大肠杆菌为代表的原核表达蛋白系统具有操作简单、周期短、成本低、表达量高等优点而成为获得外源表达蛋白的首选方案。但外源蛋白在原核宿主中往往以无生物活性的包涵体形式存在,这限制了原核表达系统的广泛应用。随着对蛋白折叠动... 以大肠杆菌为代表的原核表达蛋白系统具有操作简单、周期短、成本低、表达量高等优点而成为获得外源表达蛋白的首选方案。但外源蛋白在原核宿主中往往以无生物活性的包涵体形式存在,这限制了原核表达系统的广泛应用。随着对蛋白折叠动力学、参与蛋白折叠的酶和分子伴侣等认识的不断深入,科学家们通过诱导条件优化、宿主细胞改造以及使用融合标签等手段,在促进原核表达蛋白可溶性方面取得了较大的进展。就这些研究进展进行综述,旨在为设计和获得原核可溶表达蛋白的实验方案提供参考。 展开更多
关键词 原核表达 可溶性 蛋白折叠酶 分子伴侣 融合标签
原文传递
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