实时监测衰老报告小鼠模型的研究进展

衰老是老年慢性疾病的独立危险因素,理解衰老机制是实现这些疾病早期预防与有效干预的关键之一。系统衰老是动态演进的过程,其机制研究面临挑战。随着对细胞衰老与系统衰老相关生物标志物研究的进展以及小动物活体光学成像的发展,国内外同行构建了越来越多的实时监测衰老报告小鼠模型,助力衰老机制与干预策略研究。本文基于几种经典的、广泛应用的衰老生物标志物(p16^(Ink4a)、p21^(Waf1/Cip1)、p53和Glb1),归纳了近些年来与其相关的实时监测衰老报告小鼠模型,综合分析了它们在系统衰老研究中的应用价值。

Vav1-Cre介导的YFP报告小鼠有效标记多组织器官中的巨噬细胞

目的利用Vav1-Cre介导的ROSA26R^YFP小鼠产生黄色荧光蛋白(YFP)的特性,检测其在不同器官中巨噬细胞的标记效率。方法通过基因型鉴定方法筛选出Vav1^Cre小鼠与ROSA26R^YFP小鼠杂交产生的双阳性子代小鼠,流式细胞术检测小鼠肝、脾、肾和肺中巨噬细胞的标记效率。结果Vav1^Cre与ROSA26R^YFP小鼠的杂交后代共19只,其中双阳性基因型小鼠(Vav1^CreROSA26R^YFP)9只;流式细胞术分析肝、脾、肾和肺中巨噬细胞YFP阳性细胞百分比(%)分别为91.49±1.332,98.02±0.3023,94.01±0.8127,91.39±1.47。结论Vav1^CreROSA26R^YFP小鼠能高效标记各组织器官中的巨噬细胞。

增强子驱动的Cre转基因小鼠的构建及Cre基因的表达鉴定

目的:探索将增强子应用于构建Cre转基因小鼠品系,为以条件基因敲除为基础的基因功能研究提供更多的工具。方法:通过PCR方法从小鼠的细菌人工染色体扩增UH增强子片段,构建含有Hsp68基础启动子、增强子UH、Cre重组酶基因和SV40 polyA的转基因载体pLW400,将3.3 kb的转基因片段通过显微注射导入小鼠受精卵;为了检测Cre在转基因小鼠中的表达,将转基因一代小鼠与纯合子ROSA26报告小鼠(R/R)交配,收集第14 d胚胎期(E14)的舌组织进行LacZ染色检测鉴定。结果:经鉴定,31只子代小鼠中有6只携带外源基因,整合率为19.4%;与R/+对照相比,E14期的双基因型Cre,R/+舌组织为阳性结果(蓝色)。这表明Cre基因在转基因小鼠舌组织内得到表达,并在体内介导ROSA26基因座loxP位点间的重组,且有效删除了2个loxP之间的片段,从而启动了LacZ基因的表达。结论:构建了UH增强子-Hsp68Cre的转基因小鼠,在舌肌中特异表达Cre基因,提示增强子可以被选择应用于Cre转基因小鼠的构建;为舌肌的发育和再生研究奠定了基础。