高效液相色谱法测定披针叶黄花中黄酮含量

目的 以芦丁为标准品,用高效液相色谱法测定披针叶黄花中黄酮的含量。方法 通过单因素实验分别比较用三种常用的提取方法和6个不同溶剂浓度所得提取液的黄酮浓度,选出最佳提取方法为热回流法,最佳溶剂浓度为60%;进一步通过正交实验确定最佳提取工艺条件为浸泡0 h,回流时间3 h,溶剂体积130 mL,乙醇浓度50%。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈∶0.4%磷酸水溶液=20∶80进行等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,紫外检测器检测波长360 nm,测定披针叶黄花中黄酮的含量。结果 芦丁标准溶液在浓度为0.0015~0.0900 g/L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=3002 x,R^(2)=0.9996。最优条件下测得2.0000 g披针叶黄花中含有5.4210 mg的黄酮。结论 测定结果具有较好的稳定性和精密度,回收率为99.20%。该方法具有样品处理简单、测定结果准确度高、提取效果好的特点。