氯吡格雷抵抗基因多态性与PCI术后氯吡格雷抵抗的临床观察

目的观察氯吡格雷抵抗基因多态性与经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)术后氯吡格雷抵抗。方法接收PCI术后服用氯吡格雷的患者100例,并检测氯吡格雷快代谢、中代谢、慢代谢基因,对慢代谢型基因患者调整为替格瑞洛口服,随访1年并记录。结果100例患者中CYP2C19快代谢型、中间代谢型和慢代谢型之间血小板抑制率差异有显著性(P<0.05),ABCB1和PON1各基因型之间血小板抑制率的差异无显著性(P>0.05)。随访1年,中间代谢型氯吡格雷加倍口服,慢代谢型改为替格瑞洛口服,CYP2C19快代谢型、中间代谢型和慢代谢型,ABCB1携带TT、TC、CC等位基因、PON1携带AA、AG、GG等位基因患者临床终点事件差异无显著性(P>0.05)。结论冠心病患者PCI术后用药可依据氯吡格雷抵抗基因检测结果指导临床,具有可靠性。

脑梗死患者采取阿司匹林抵抗基因检测的临床意义

目的探讨脑梗死患者采取阿司匹林抵抗基因检测的临床意义。方法选择2019年1—6月医院收治的60例脑梗死患者作为研究对象,根据患者是否接受基因检测分为试验组和对照组,各30例。对照组常规给予阿司匹林或阿司匹林联合硫酸氢氯吡格雷治疗,试验组在常规治疗的同时抽血完成阿司匹林抵抗基因检测,并根据测定结果调整阿司匹林或阿司匹林联合硫酸氢氯吡格雷用药方案进行治疗,两组治疗后均完成6个月随访,比较两组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、病死率及药物不良反应发生率。结果治疗前,两组NIHSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2、6个月,两组NIHSS评分均低于治疗前,且试验组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后1、3个月病死率及治疗过程中肝肾损害、胃肠道症状、心脏毒性发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);试验组治疗后6个月病死率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论治疗前给予脑梗死患者阿司匹林抵抗基因检测并根据测定结果调整抗血小板药物治疗有助于改善患者神经缺损状况,降低临床病死率,且未增加药物不良反应发生率。

粘病毒抵抗基因-1启动子88位点G／T多态性影响乙型肝炎病毒感染的自然转归

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)自限感染和慢性感染与粘病毒抵抗基因-1(MxA)启动子的-88位点 G／T单核苷酸多态性的关系。方法收集100例抗-HBs和抗-HBc阳性的HBV自限感染者和340例慢性感染者的外周全血,提出基因组DNA;采用竞争分化聚合酶链反应技术为基础的方法进行MxA-88 G／T基因分型;采用单因素Odds ratio和x2检验等方法进行统计学分析。结果MxA-88 G／G基因型(低表达型)检出率为50．2％(221／440), T／T基因型(高表达型)检出率为5．5％(24／440),G／T杂合型检出率为44．3％(195／440)。与慢性感染患者相比, 自限感染患者携带较低的G／G基因型(41．0％与52．9％,P<0．05)、G等位基因(62．5％与75．3％,P<0．01)和较高的T／T基因型(16．O％与2．4％,P<0．01)、T等位基因(37．5％与24．7％,P<0．01),而两者之间的G／T 杂合型差异无统计学意义。结论MxA-88 G／T基因型能在一定程度上影响HBV感染的自然转归,有望成为临床上 HBV感染转归的预测指标。

人抵抗素基因cDNA的克隆

目的 克隆人抵抗素基因 (hRETN)cDNA ,为进一步研究RETN的结构和功能提供实验基础。方法 应用RT PCR方法从中国人网膜脂肪垫总RNA中扩增出RETN基因cDNA ,克隆入载体 pMD18 T中 ,形成重组载体 pMD18 T/hRETN。通过蓝白斑筛选出阳性克隆 ,限制性内切酶酶切鉴定后对其进行测序。结果 从脂肪组织总RNA中扩增得到 36 3bp片段hRETN基因 ,其cDNA序列与GenbankhRETN基因序列基本相同。结论 成功地克隆中国人hRETNcDNA。

姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠代谢及抵抗素基因表达的影响

目的:探讨姬松茸多糖对2型糖尿病(2-diabetesmellitus,2-DM)大鼠糖脂代谢和抵抗素(resistin)基因表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:8%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:2%姬松茸多糖组。8周后,测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂和胰岛素抵抗指数(IR);半定量RT-PCR检测resistin基因mRNA的表达水平。结果:姬松茸多糖治疗组FPG、FINS、TG、LDL、VLDL、CH、IR及resistin基因mRNA的表达均低于模型组(P<0.05),而HDL的含量则高于模型组。结论:姬松茸多糖可抑制resistin基因表达,降低胰岛素抵抗;降低2-DM大鼠血糖和改善其脂代谢紊乱。

抵抗素基因rs34861192多态性与东北汉族人群2型糖尿病相关性研究

糖尿病是危害老年人健康的重要疾病之一.近几年的研究发现糖尿病的发病不仅与生活方式有关,也与遗传因素密切相关.一些与糖尿病发生易感基因以及位点先后被发现,这些易感基因的发现有利于进一步阐明生活方式与基因共同作用的糖尿病发生机制,为糖尿病防治提供理论依据.

抵抗素基因420G/G基因型与高血压发病年龄相关

目的研究在中国北方汉族人群中抵抗素基因5’末端启动子区g-420 C>G多态性与高血压发病年龄的相关性。方法选取高血压病组121例,其中年龄<40岁的43例,年龄≥40岁的78例,对照组92例,其中年龄<40岁的42例,年龄≥40岁的50例,采用聚合酶链反应-限制性片长多态性方法分析抵抗素420 C/G多态性基因型。结果高血压病患者中,年轻患者的抵抗素基因420 G/G基因型频率高于年长组(P=0.006),其与发病年龄相关;年龄<40岁的年轻人群中,高血压病患者的抵抗素基因420 G/G基因型频率也显著高于对照组(P=0.001),其与高血压病发病相关。结论高血压病青年发病与抵抗素基因420 G/G基因型相关。

紫外线抵抗相关基因的结构及功能研究进展

紫外线抵抗相关基因(UVRAG)最初是在着色性干皮病紫外线照射敏感性基因筛查中发现的,哺乳动物中的UVRAG与酵母菌Vps38具有同源性。作为肿瘤抑制基因,UVRAG频繁参与人类各种恶性肿瘤的发生发展,同时,UVRAG在细胞的自噬、凋亡和膜运输中发挥着关键性的作用。新的研究发现UVRAG在哺乳动物胚胎发育过程中器官反转阶段也起着非常重要的作用。本文主要对UVRAG的结构和功能的研究进展进行综述。

抵抗素基因启动子-420C/G、细胞色素P4501A1-MspI多态性与吸烟的交互作用对非酒精性脂肪性肝病的影响

目的:探讨抵抗素基因启动子-420C/G、细胞色素P4501A1-Msp I(CYP1A1-Msp I)基因多态性与吸烟的交互作用与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系。方法:采用病例-对照研究的方法,以1 200例NAFLD患者及1 200例健康对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术分析了抵抗素基因启动子-420C/G和CYP1A1-Msp I基因多态性。结果:-420C/G(GG)基因型和CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型频率分布分别为49.75%、50.08%(病例组)和24.00%、24.25%(对照组),两者经χ2检验差异显著(P<0.01)。-420C/G(GG)基因型者患NAFLD的风险显著增加。CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者患NAFLD的风险也显著增加。基因突变的协同分析发现-420C/G(GG)/CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为39.83%和12.83%,两者经χ2检验有显著差异(P<0.01)。-420C/G(GG)/CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者患NAFLD的风险显著增加。病例组的吸烟率显著高于对照组的吸烟率(P<0.01),吸烟与-420C/G(GG)和CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型均有交互作用。结论:-420C/G(GG)、CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,基因多态性与吸烟的交互作用增加了NAFLD的发病风险。

翻白草对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠抵抗素基因表达的调节作用

目的观察翻白草水提液(HPD)对高脂膳食加链尿佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(2-DM)胰岛素抵抗大鼠血清胰岛素水平及白色脂肪组织抵抗素基因mRNA表达的影响,探讨HPD提高胰岛素敏感性的可能机制。方法选用高脂饲料诱导的Wistar大鼠建立胰岛素抵抗模型后,继续用小剂量STZ建立2-DM胰岛素抵抗模型。将造模大鼠随机分为模型对照组(水)和3个HPD组(3g/kg,6g/kg,12g/kg),另选10只大鼠为正常对照组。各组灌胃8周后,空腹取材,放射免疫法测定空腹血清胰岛素,RT-PCR法检测肾周脂肪组织抵抗素(resistin)基因mRNA水平。结果与模型对照组比较,HPD高、中剂量组能显著降低空腹血清胰岛素水平;HPD各组均能显著降低大鼠肾周脂肪组织抵抗素基因mR-NA表达。结论HPD水提液具有改善2-DM胰岛素抵抗大鼠的胰岛素抵抗作用。

锰超氧化物歧化酶基因C1183T、抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性与吸烟的交互作用和食管鳞状细胞癌的关系

目的 探讨锰超氧化物歧化酶（MnSOD）基因C1183T、抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性与吸烟的交互作用,以及与食管鳞状细胞癌（ESCC）的关系。方法 采用病例-对照研究的方法,选择经病理学检查确诊为原发性ESCC的患者720例（ESCC组）,对照组为进行健康体格检查者720名,并根据吸烟状况将研究对象分为不吸烟者和吸烟者（每天至少吸1支烟,持续半年以上）。以研究对象的外周血白细胞为样本,利用PCR分析MnSOD基因C1183T和抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性。结果 ESCC组的吸烟者构成比显著高于对照组（OR=3.326 4,95%CI为1.907 5~5.740 6,P〈0.01）。ESCC组与对照组间C1183T的CC＋CT、TT基因型频率和C、T等位基因频率,以及-420C/G的CC＋CG、GG基因型频率和C、G等位基因频率的差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。ESCC组C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型频率分布分别为50.1%和49.9%,对照组分别为24.2%和23.9%。携带C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型者罹患ESCC的风险显著增加（OR=3.155 3和3.168 3,95%CI分别为1.806 2~5.145 1和1.925 4-5.206 2）。基因突变的协同分析发现,ESCC组C1183T的TT纯合子基因型联合-420C/G的GG纯合子基因型者占39.7%,显著高于对照组的12.8%（P〈0.01）,携带两种纯合子基因型者罹患ESCC的风险显著增加（OR=5.065 1,95%CI为3.187 9~7.848 1）。吸烟与C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型在ESCC的发生中均有交互作用（γ=3.926 6、3.938 3）。结论MnSOD基因C1183T的TT纯合子基因型、抵抗素基因启动子-420C/G的GG纯合子基因型和吸烟是ESCC的易患因素,基因多态性与吸烟的交互作用增加了ESCC的发病风险。

抵抗素基因多态性与2型糖尿病及肥胖相关性研究

目的探讨蚌埠地区汉族人群抵抗素基因-420(C>G)多态性与2型糖尿病及肥胖之间的关系。方法选取2型糖尿病患者101例(肥胖患者50例,非肥胖患者51例),对照组52例(肥胖者25例,非肥胖者27例),抽取外周静脉血提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性片断多态性(PCR-RFLP)分析基因型。结果2组间等位基因频率比较差异无统计学意义(P=0.754)。2组间基因频率型比较差异有统计学意义(P=0.026)。logistic回归分析提示-420 G/G基因型与2型糖尿病及肥胖均无相关性。结论蚌埠地区汉族人群抵抗素基因5’,调控区-420 C>G多态性与2型糖尿病及肥胖均无显著相关性。

激素抵抗性肾病相关基因变异在早年发病的难治性肾小球微小病变中的表达

采用高通量二代测序方法检测7例30岁之前发病、病理类型表现为肾小球微小病变的难治性肾病患者是否存在激素抵抗性肾病(SRNS)相关基因变异,结果发现,30岁之前发病的难治性肾小球微小病变患者存在SRNS相关基因变异,遗传因素可能参与难治性肾小球微小病变的发病。

2型糖尿病抵抗素基因单核苷酸多态性(SNPs)及胰岛素抵抗相关因素研究

目的:研究内蒙古地区汉族2型糖尿病人抵抗素基因5端调节区单核苷酸多态性(SNPs)及胰岛素抵抗、血脂关系。方法:对81名2型糖尿病患者(分肥胖、非肥胖2组)及40名非糖尿病患者抵抗素基因测序分析,比较3组间SNPs及胰岛素敏感指数(ISI)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)。结果:3组抵抗素基因5′端调节区等位基因频率比较显示组间无统计学差异。糖尿病肥胖组和非肥胖组胰岛素敏感指数(ISI)与对照组比较,差异有显著性(均为P<0.01),糖尿病肥胖组和非肥胖组胰岛素敏感指数(ISI)比较差异也有显著性(P<0.05),糖尿病肥胖组和非肥胖组甘油三酯均高于对照组(均为P<0.01),糖尿病肥胖组和非肥胖组之间比较,差异也有显著性(P<0.05)。糖尿病肥胖组血HDL-C低于糖尿病非肥胖组和对照组,差异有显著性(分别为P<0.05,P<0.01),而糖尿病非肥胖组和对照组之间比较无统计学差异(P>0.05),糖尿病非肥胖组和对照组之间比较无统计学差异(P>0.05)。结论:内蒙古地区汉族2型糖尿病人与抵抗素基因5端调节区单核苷酸多态性(SNPs)没有显著相关性。胰岛素抵抗与肥胖密切相关。2型糖尿病脂代谢紊乱是甘油三酯紊乱合并HDL—C紊乱,与肥胖密切相关。

聚乳酸粒子异基因抵抗抑制作用的研究

目的研究策乳酸籽子（PLAM）对异基因抵抗作用的抑制作用。方法于异基因骨髓移植前不同时间静脉络以不同剂量PLAM，测定移植受体的存活时间以及移植受体day9和day14CFU－S的形成．结果移植前胸静脉注射PLAM：0.75g·kg-1体全可明显促进移植受体day9和day14CFU-S的形成，同时明显延长移植受体的存活时间，而低于该剂量或在移植前2或24h静脉注射PLAM则无效，当静脉注射PLAM1g·kg－1体重以上时，则可同时促进内源性CFU－S的形成。结论吞噬细胞与异基因骨髓移植时存在的异基因抵抗效应密切相关；一定剂量的PLAM于移植前一定时间静脉注射给移植受体可明显减轻异基因抵抗效应，延长移植受体的存活时间；大剂量PLAM静脉注射可提高机体的辐射抵抗能力。

紫外线抵抗相关基因在二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞自噬中的作用

目的观察紫外线抵抗相关基因(UVRAG)在二烯丙基二硫(DADS)诱导白血病K562细胞自噬中的作用。方法以K562细胞为细胞模型,利用透射电镜观察细胞的超微结构自噬体的形成;采用吖啶橙染色和荧光显微镜观察酸性囊泡的形成以检测DADS诱导K562细胞自噬;RT-PCR检测自噬相关基因UVRAG mRNA的表达水平。结果透射电镜显示:与空白组和溶媒组比较,DADS(40 mg·L-1)处理组可观察到胞质内出现大量自噬体。吖啶橙染色荧光显微镜下可见到各DADS处理组K562细胞胞浆中的酸性囊泡较空白组和溶媒组明显增多。RT-PCR结果显示,DADS作用K562细胞12 h后,各DADS处理组UVRAG mRNA表达水平均高于空白组和溶媒组。结论 DADS能诱导K562细胞自噬,其机制可能与上调UVRAG mRNA表达有关。

紫外线抵抗相关基因UVRAG影响狂犬病病毒感染机制的研究

为研究宿主因子紫外线抵抗相关基因(UVRAG)影响狂犬病病毒(RABV)感染的机制,本研究在HEK293细胞中干扰或过表达UVRAG后感染表达mCherry蛋白的重组RABV(rERA-mCherry),于感染后不同时间(24 h、48 h、72 h、96 h)检测上清中病毒的滴度并绘制病毒的生长曲线。结果显示,与转染对照siControl的细胞相比,干扰UVRAG的表达再感染RABV后不同时间细胞上清中的病毒滴度均显著降低(p<0.01),表明干扰UVRAG的表达后抑制RABV的复制能力;而过表达UVRAG后则不影响RABV的增殖能力。干扰293细胞中UVRAG的表达后分别感染表达RABV G蛋白的重组VSV(rERA-G-VSV)及VSV,6 h后利用q PCR方法检测各细胞中的病毒拷贝数。结果显示,与未干扰的细胞相比,干扰UVRAG表达后细胞中rERA-G-VSV基因拷贝数极显著下降(p<0.001);但干扰或者未干扰细胞中VSV基因拷贝数则无显著差别。表明RABV G蛋白是rERA-G-VSV在干扰UVRAG表达细胞中增殖下降的原因且UVRAG影响RABV感染的早期侵入阶段。干扰293细胞中UVRAG表达后感染rERAmCherry,利用酸绕过试验进一步分析RABV感染的阶段;上述干扰细胞感染rERA-mCherry后不同时间点(0、1.5 h、6 h)利用qPCR方法检测病毒基因拷贝数,分析UVRAG影响RABV侵入的具体阶段。酸绕过试验结果显示,经pH7.5的PBS处理后,干扰组的细胞相对于未干扰组细胞中RABV基因拷贝数极显著下降(p<0.001);但pH5.5的酸性PBS处理后两组转染细胞中的病毒拷贝数无显著差异。进一步证明UVRAG在RABV感染早期的侵入阶段发挥重要作用。不同时间点病毒基因拷贝数的qPCR检测结果显示,病毒感染后0、1.5 h两种转染细胞中的病毒拷贝数均无显著差异,但在感染病毒6 h时干扰组的细胞相比于未干扰组的细胞中病毒的拷贝数显著降低(p<0.01)。表明UVRAG影响病毒的胞内运输阶段。利用免疫共沉淀试验(Co-IP)检测UVRAG及其不同结构域蛋白与RABV受体一代谢型谷氨酸受体2(mGluR2)的相互作用关系,结果显示UVRAG的N端aa1~aa147与mGluR2存在特异性的相互作用。以上结果表明,UVRAG影响RABV的胞内运输可能与其和mGluR2的互作相关。本研究初步揭示了UVRAG在RABV感染中的作用,为RABV侵入机制的揭示奠定了基础。

多囊卵巢综合征与胰岛素抵抗及胰岛素受体基因多态性的关系

多囊卵巢综合征（polycysticovariansyn—drome，PCOS）是育龄期妇女最常见的内分泌紊乱疾病，有研究表明，绝经前妇女的PCOS患病率达6％～10％。PCOS的特点是慢性不排卵和睾酮的升高，而慢性不排卵、

骨髓间充质干细胞外泌体miR-10a-5p下调紫外线抵抗相关基因(UVRAG)的表达调控系统性红斑狼疮

目的:探讨BMMSCs移植对SLE外周血单个核细胞增殖和凋亡的调控机制,为SLE的靶向治疗提供理论支持。方法:超速离心分离BMMSCs来源外泌体。CCK-8检测SLE外周血单个核细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况。qRT-PCR检测外周血单个核细胞和外泌体中miRNA水平。双荧光素酶报告基因验证miR-10a-5p与紫外线抵抗相关基因(UVRAG)靶向关系。Western blot检测外泌体表面标记物和外周血单个核细胞中UVRAG的表达水平。结果:成功分离BMMSCs来源外泌体,并发现其抑制SLE外周血单个核细胞增殖,促进其凋亡。qRT-PCR检测结果表明BMMSCs来源外泌体可显著上调SLE外周血单个核细胞中miR-10a-5p表达水平。双荧光素酶报告基因检测以及Western blot检测结果表明miR-10a-5p靶向下调UVRAG表达水平。结论:BMMSCs来源外泌体miR-10a-5p通过靶向下调UVRAG水平,抑制SLE外周血单个核细胞增殖并促进细胞凋亡。

抵抗素基因rs1862513多态性与儿童肥胖的关系

目的研究抵抗素基因rs1862513多态性与儿童肥胖的关系。方法收集住院和门诊的肥胖儿童60例为肥胖组,选择同期健康体检儿童60例为对照组,对两组的抵抗素基因rs1862513位点的基因型进行检测。结果 (1)在肥胖组与对照组间,抵抗素基因rs1862513基因型的分布差异无统计学意义(2=2.631,P>0.05)。(2)肥胖组的抵抗素、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇在GG组与CG+CC组间比较差异无统计学意义(P>0.05),但三酰甘油水平差异有统计学意义(P<0.05)。(3)GG基因型的肥胖儿童患病率是CC基因型的1.389倍,GG基因型的肥胖儿童患病率是CG基因型的2.045倍,基因型间危险度差异无统计学意义(P>0.05)。结论抵抗素基因rs1862513位点多态性与儿童肥胖无相关性,但可能对脂代谢有一定影响。