HPLC测定拉洛他赛中醋酸残留量检测方法的建立与验证

建立用外标法采用HPLC测定拉洛他赛原料中醋酸残留量的方法,并对其进行方法学验证。用Agilent TC-C_(18)色谱柱,以流动相A为0.07%磷酸溶液-甲醇(950∶50),流动相B为甲醇,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为210 nm。醋酸在4.0240~100.6000μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),醋酸平均回收率(n=9)为99.5%,RSD为1.13%。经方法学验证证明所建方法简便、灵敏、准确性高、重复性好且可靠,可以有效控制拉洛他赛原料中醋酸残留量。

气相色谱-质谱联用法测定拉洛他赛原料中三氟甲磺酸乙酯基因毒杂质

目的建立气相色谱-质谱联用法,测定拉洛他赛原料中基因毒杂质三氟甲磺酸乙酯。方法采用6%氰丙基苯基和94%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱(DB-624,30 m×0.25 mm×1.4μm),EI源,以起始温度为50℃,维持6 min,以30℃/min的速率升温至230℃,250℃下运行3 min;流速为1.0 mL·min^(-1)。结果三氟甲磺酸乙酯检测限为1.81ppb,定量限为6.15ppb,三氟甲磺酸乙酯在3.65~584.62 ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9998),方法回收率(n=9)均在95.4%~111.4%范围内,RSD<5.6%。结论方法简便、准确,灵敏度高,专属性强,可用于拉洛他赛原料中三氟甲磺酸乙酯基因毒杂质的测定。

抗癌新药拉洛他赛原料药中锂元素残留量测定

建立电感耦合等离子体质谱法测定拉洛他赛中锂元素残留量的方法。采用微波消解法进行样品前处理,以钪作为内标元素,采用在线引入内标测定锂元素残留量。锂元素质量浓度在0~500 ng·mL^(-1)范围内,线性相关系数为0.9999,检测限为2.766 ng·mL^(-1),定量限为9.221 ng·mL^(-1),加标重复性试验的RSD为2.5%,加标回收率在95.6%~104.2%范围内,相对标准偏差为2.8%(n=9)。本方法操作简单、准确、重复性好,可用于拉洛他赛中锂元素残留量的测定。

拉洛他赛自乳化释药系统的制备及大鼠体内药动学研究

目的研制拉洛他赛自乳化释药系统并对其在大鼠体内的药代动力学进行考察。方法考察拉洛他赛在不同油相、乳化剂中的溶解度,同时加入一种肠道黏膜黏附剂单油酸甘油酯用于增加口服的吸收量,再通过绘制伪三元相图,并通过均匀设计表设计处方,进一步筛选确定最优的处方,制备拉洛他赛自乳化释药系统;考察自乳化制剂的外观、粒径、电位、自乳化时间、含药量和稳定性,并比较拉洛他赛口服溶液剂与自乳化制剂的大鼠体内生物利用度。结果以三辛酸甘油酯-单油酸甘油酯-吐温80(m∶m∶m=15∶55∶30)形成均一稳定的拉洛他赛自乳化制剂。偏光显微镜下无药物析出,拉洛他赛自乳化制剂经pH值1.2的模拟胃液、蒸馏水及pH值6.8的模拟肠液的不同倍数稀释后,稳定性无明显变化;外观呈现淡蓝色略带乳光溶液,粒径为(169.7±15.36)nm(n=3),多分散性指数PDI为0.169,zeta电位为(-24.2±1.23)mV(n=3),含药量质量分数为(0.987±0.0183)%(n=3);相比于溶液剂,自乳化制剂生物利用度显著提高,约是溶液剂的4.7倍。结论拉洛他赛自乳化释药系统易于制备、质量稳定,可显著增加拉洛他赛的口服生物利用度,为口服拉洛他赛新型制剂的研发提供了思路。

拉洛他赛的波谱解析及高效液相色谱法对其脂质体含量的测定

目的:拉洛他赛是国内外均未上市的新结构药物,未见质量研究相关报道。对拉洛他赛进行波谱解析以验证其分子式、相对分子质量和化学结构式,同时建立一种定量方法用于拉洛他赛脂质体制剂的含量测定。方法:利用质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱测定方法,对拉洛他赛进行药物结构和光谱学解析;利用紫外-可见分光光度法对拉洛他赛进行全波长扫描,确定其吸收波长;利用高效液相色谱法,建立拉洛他赛定量方法并用于脂质体拉洛他赛包封率的测定。结果:揭示了拉洛他赛的四大光谱学特征并制订相应的标准图谱。确认了拉洛他赛的结构为三环二萜,分子式为C45H53NO14 ,相对分子质量为831.900 1。建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,其色谱柱为C18硅胶反相色谱柱(5 μm, 250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈-水(体积比75 ∶ 25),检测波长为230 nm,该方法可用于测定脂质体制剂中拉洛他赛的包封率,稳定性、回收率和精密度高。此外,新制备了拉洛他赛脂质体,该脂质体粒径大约105 nm,均一性良好,药物包封率大于80%。结论:制订了拉洛他赛的质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱和紫外-可见光谱图谱,验证了拉洛他赛的分子式、相对分子质量和结构式,建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,该方法可用于拉洛他赛脂质体的质量控制。

拉洛他赛共聚物脂质杂合纳米粒的制备及其性能评价

目的以聚乙二醇-聚己内酯(polyethylene glycol-b-poly caprolactone,m PEG-b-PCL)为聚合物,硬脂酸单双甘油酯(geleol mono and diglycerides Nf,GMD)为固体脂质,制备拉洛他赛共聚物脂质杂合纳米粒(larotaxel-solid lipid core-contained polymeric nanoparticles,LTX-cSLNs)并评价其性能。方法采用透析法制备LTX-cSLNs,以粒径、多分散系数(polydispersity index,PDI)、载药量(drug loading content,wDL)和包封率(entrapment efficiency,wEE)为评价指标,采用单一因素法筛选最优处方工艺。采用高效液相色谱法测定LTX-cSLNs的wDL和wEE,激光散射粒度测定仪测定粒径和电位,采用透射电镜观察形态,采用差示扫描量热法测定GMD在纳米粒内核的存在形式。同时以不含GMD的纳米粒(larotaxel-solid lipid core-uncontained polymeric nanoparticles,LTX-u SLNs)作为对照,比较两种制剂在临界聚集质量浓度(critical aggregation concentration,ρCAC)以及体内外性能的差异。结果 LTXcSLNs帯有脂质内核,平均粒径为56.8 nm,zeta电位为-13.56 m V,wDL为12.9%,wEE为81.46%,ρCAC为0.126 mg·L^(-1)。LTX-cSLNs能够延缓累积释放量达12%,药时曲线下面积(AUC0-t)提高近16.7%。结论 LTX-cSLNs具有高载药量、高稳定性以及良好的体内外性能。