金属抗菌肽SIF_(4)对大肠杆菌拓扑异构酶活性及胞内核酸合成的影响

为系统阐明金属抗菌肽SIF_(4)基于DNA拓扑异构酶靶点的非细胞质膜抑菌机理,以大肠杆菌为模式菌株,研究了金属抗菌肽SIF_(4)与基因组DNA的结合方式、对DNA拓扑异构酶I/II活性以及胞内核酸生物合成的影响机理。研究发现,金属抗菌肽SIF_(4)可能以类似溴化乙锭嵌插方式与基因组DNA结合,对拓扑异构酶I有较强抑制活性,但对拓扑异构酶II影响较小,可通过影响DNA负超螺旋解链和RNA聚合酶结合催化RNA转录过程发挥抑菌活性。研究还发现,经金属抗菌肽SIF_(4)处理12 h后,大肠杆菌胞内总DNA和总RNA生物合成量均受到不同程度的抑制,且呈现良好的量-效关系,1/2最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)组与对照组(0 MIC)相比,胞内DNA和RNA生物量差异不显著(P>0.05),MIC和2 MIC组与对照组相比,胞内DNA和RNA生物量差异显著(P<0.05)。实验结果可为金抗肽SIF_(4)在食源性大肠杆菌生物防控中的应用提供理论支持。

2种喜树碱类拓扑异构酶1抑制剂ADE信号的挖掘与分析

目的对2种喜树碱类拓扑异构酶1抑制剂伊立替康和托泊替康的药物不良事件(ADE)信号进行挖掘与分析,为临床安全用药提供参考。方法基于美国FDA不良事件报告系统(FAERS)数据库,提取2004年1月1日至2023年3月31日上述2种药物的ADE报告数据。对数据进行处理后,采用报告比值比法联合贝叶斯置信传播神经网络法进行信号挖掘,并进行分析。结果共筛选出相关ADE报告14738份,其中伊立替康11483份,托泊替康3255份。伊立替康的ADE报告性别以男性为主,托泊替康以女性为主;两药的使用患者年龄均主要集中于45~<75岁。共检测出847个信号,累及24个系统器官分类(SOC)。其中,伊立替康检测出565个信号,累及24个SOC,主要集中于胃肠系统疾病、全身性疾病及给药部位各种反应、血液及淋巴系统疾病等;报告频数最多的ADE为腹泻,信号强度最大的ADE为胆碱能综合征。托泊替康检测出282个信号,累及22个SOC,主要集中于全身性疾病及给药部位各种反应、各类检查、血液及淋巴系统疾病、胃肠系统疾病等;报告频数较多的ADE为死亡和贫血,信号强度最大的ADE为发热性骨髓再生障碍。伊立替康的转移性结肠直肠癌、外周感觉神经病、脂肪性肝炎等ADE和托泊替康的虹膜萎缩、视网膜变性、玻璃体积血等ADE均未在各自说明书中提及。结论伊立替康和托泊替康的ADE主要累及消化系统和血液系统,临床上应重点监测;伊立替康所引起的胆碱能综合征应引起关注。除此之外,使用伊立替康的患者还应关注转移性结肠直肠癌、外周感觉神经病、脂肪性肝炎、蛋白尿等ADE,使用托泊替康的患者应加强眼器官疾病的监测,以确保用药安全。

乳腺癌组织中金属硫蛋白(MT)和拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌中拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)和金属硫蛋白(MT)的表达与乳腺癌预后的关系,并分析两者的相关性。方法:采用SABC免疫组化方法检测72例乳腺癌标本中MT和TopoⅡα的表达。结果:MT和TopoⅡα的阳性率分别为33.33%和48.61%。MT阳性表达率与乳腺癌病理类型及有否巴结转移有关(P<0.05)。TopoⅡα阳性表达率与是否有淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:检测MT和TopoⅡα对提示预后和临床选择化疗方案有指导意义。

线粒体拓扑异构酶Ⅰ在头颈鳞癌中的表达及意义

目的:分析线粒体拓扑异构酶Ⅰ(mitochondrial topoisomerase Ⅰ,TOP1MT)与头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)临床病理特征的相关性,探讨其对HNSCC顺铂耐药的影响。方法:分析83例HNSCC患者的临床病理信息,综合免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果,分析TOP1MT是否与化疗耐药等临床病理特征相关。通过体外实验,分析在顺铂作用下,TOP1MT对HNSCC细胞药物敏感性、增殖和迁移能力的影响。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析。结果:高表达TOP1MT与HNSCC患者的肿瘤大小、临床分期、生存期、TPF方案敏感度和不良预后相关,TOP1MT高表达的患者,生存期显著低于中表达和低表达患者。体外实验表明,TOP1MT促进HNSCC细胞的顺铂耐药,在20μmol/L顺铂作用下,过表达TOP1MT显著促进了HNSCC细胞的迁移和增殖能力。结论:TOP1MT高表达促进HNSCC恶性进展及顺铂治疗抵抗,为HNSCC的临床治疗提供了新的潜在靶点。

肾透明细胞癌中拓扑异构酶Ⅱα与免疫浸润的关系及相关基因分析

目的探讨拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)与肾透明细胞癌(KIRC)免疫浸润的关系及相关基因分析。方法采用GEPIA和HPA数据库研究TOP2A基因在KIRC的表达和预后;通过单细胞测序数据和TIMER2.0数据库分析TOP2A基因与免疫浸润的关系;利用STRING、GEPIA2和Sangerbox等数据库分析TOP2A的相关基因;通过Aclibi对TOP2A及其相关基因进行预后风险模型构建与验证。结果TOP2A mRNA和蛋白质在KIRC中表达上调,并与患者的临床分期及不良预后有关,且其在CD8+T细胞、调节T细胞和巨噬细胞等免疫细胞中均表达并与多种免疫细胞的浸润水平呈正相关;此外,TOP2A及其相关基因主要富集在细胞周期、不匹配修复和微管结合等途径;预后风险模型显示,TOP2A高风险组患者的生存率显著降低且与其不良预后密切相关。结论TOP2A与KIRC的发生密切相关,不利于患者生存预后,且与多种免疫细胞浸润有关,可作为KIRC诊断与预后的生物标志物。

DNA拓扑异构酶IIα(topo IIα)与乳腺癌蒽环类药物化疗敏感性的研究进展

DNA拓扑异构酶IIα(topoisomerase IIα,topo IIα)不仅是肿瘤细胞的一个增殖指标,也是蒽环类化疗药物的治疗靶点。体外实验已经表明topo IIα表达水平与蒽环类药物敏感性有关,但topo IIα能否作为乳腺癌蒽环类化疗敏感性的预测因子还存在争论。本文就近年来topo IIα及其他相关的分子指标与乳腺癌蒽环类药物敏感性的研究进展作一综述。

脱氧核糖核酸拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1与肿瘤的研究进展

脱氧核糖核酸(DNA)损伤应答(DDR)是维持内稳态及肿瘤发展重要机制之一。DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)在维持基因组稳定性及调控DDR相关信号通路中扮演着关键角色。最新研究发现,TopBP1通过多种分子机制促进肿瘤细胞的生长、转移及耐药,并且与肿瘤发病风险及预后显著相关。本文对TopBP1在乳腺及妇科、呼吸及消化系统肿瘤中的最新研究进展进行综述,以期深入了解TopBP1在不同肿瘤中的作用机制,推动其转化为临床标志物或药物干预靶点,并为基于DDR的抗癌策略提供新思路。

拓扑异构酶抑制剂伊立替康的研究进展

抗肿瘤药伊立替康(Irinotecan,CPT-11)是一种喜树碱类衍生物,主要通过抑制拓扑异构酶I来实现细胞毒作用,目前已用于治疗各种恶性肿瘤多年。尽管如此,关于这种药物的知识正仍在扩大。在这里,本文对伊立替康的作用机制、代谢和毒副作用、与其他抗癌药物的联合应用以及药物的新剂型进行了全面的概述,以期为该药在临床的安全合理应用提供参考。

Topotecan对癌细胞系SUD4和DOHH2的拓扑异构酶(Ⅰ,Ⅱ)的毒性作用(英文)

Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ（ＴＰＴ）是类似天然抗癌药物喜树碱的半合成新药．为了阐明ＴＰＴ对拓扑异构酶的毒性作用，将癌细胞系ＳＵＤ４及ＤＯＨＨ２培养在不同浓度ＴＰＴ的培养基中，分别在培养８ｈ、１８ｈ后取样进行测试．结果表明：ＴＰＴ不仅作用于拓扑酶Ⅰ，也作用于拓扑酶Ⅱ，尽管对酶Ⅱ的影响非常小．应用新的流体细胞测量仪（ＦＡＣＳ－Ｖａｎｔａｇｅ）及免疫分析法对细胞培养时间、ＴＰＴ的浓度与拓扑酶中毒程度的动力学关系进行了研究．上述研究显示ＴＰＴ能影响拓扑异构酶Ⅱ（新观点），同时强调在抗癌化学治疗中应结合使用酶Ⅰ及酶Ⅱ抑制剂．

P-gp、GSTπ联合TOPOⅡα检测对三阴性乳腺癌新辅助化疗病理完全缓解的预测价值

目的分析P⁃糖蛋白(P⁃gp)、谷胱甘肽转移酶(GSTπ)联合拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)检测对三阴性乳腺癌(TNBC)患者新辅助化疗(NAC)病理完全缓解(pCR)的预测价值。方法本研究为一项回顾性、单中心、双盲法的试验,选取郑州大学第一附属医院自2020年3月至2022年10月,经纳入、排除标准共筛查135名TNBC患者作为研究对象,均为女性。采用SP免疫组化法检测P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα,分析TNBC患者NAC疗效,行单因素、多因素分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与NAC pCR的关系,绘制ROC曲线分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα单一及联合检测对TNBC患者NAC pCR的预测价值。结果NAC后,cCR者47例(34.81%),cPR者72例(53.33%),SD者12例(8.90%),PD者4例(2.96%),总有效率88.14%;pCR者21例(15.55%)。经单因素分析,P⁃gp、GSTπ阳性表达pCR率低于P⁃gp、GSTπ阴性表达pCR率,TOPOⅡα阳性表达pCR率则高于阴性性表达pCR率,差异均有统计学意义(P<0.05)。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与pCR具有显著相关性[OR(95%CI)分别为1.446(1.127~1.858)、1.640(1.304~2.063)、1.548(1.227~1.984),P<0.05]。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα联合检测对NAC pCR灵敏度、特异度分别为90.73%、86.73%,AUC(95%CI)为0.813(0.743~0.908),均高于上述指标单一检测(P<0.05)。结论P⁃gp、GSTπ和TOPOⅡα表达与TNBC患者NAC pCR有一定关联,且通过联合上述指标检测NAC pCR有着较高预测价值,有利于帮助临床医生为TNBC患者进一步制定更合适的治疗策略。

拓扑异构酶Ⅱ在神经胶质瘤中的研究进展

目前癌症基因检测作用于帮助患者判断预后和指导靶向治疗,逐渐成为国内外肿瘤诊疗的发展趋势和关注焦点。胶质瘤是源自神经上皮最常见的脑恶性肿瘤,近年来发现DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPⅡ)作为人脑胶质瘤的标志物,与该肿瘤密切相关,为此本文阐述了TOPⅡ在胶质瘤中的表达及与肿瘤细胞增殖率和预后的研究进展,对其深入探究,有望为预测胶质瘤患者预后、指导化疗用药和延缓患者生存期限提供理论支持和有效指导。

东方蜜蜂微孢子虫DNA拓扑异构酶Ⅲ的分子特性与系统进化分析

利用相关生物信息学软件对东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)的DNA拓扑异构酶3(DTⅢ)进行了理化性质、分子特性、保守基序、结构域和系统进化的分析。结果表明:DTⅢ包含805个氨基酸,分子式为C4267 H6719 N1117 O1240 S34,分子质量约为94.60 ku,脂溶系数为81.84,等电点为9.08,平均亲水系数为-0.595,亲水氨基酸多于疏水氨基酸,不含典型信号肽;含有41个丝氨酸磷酸化位点,23个酪氨酸磷酸化位点及14个苏氨酸磷酸化位点;包含310个α⁃螺旋,117个β⁃折叠,37个β⁃转角及341个无规则卷曲;可同时定位于细胞核、细胞质和线粒体;东方蜜蜂微孢子虫与其他10种微孢子虫的DTⅢ均含有5个相同的保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 5)和2个相同的结构域(Toprim和Topoisom_bac);通过Mega 11.0软件构建东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的DTⅢ的系统进化树,结果显示东方蜜蜂微孢子虫与绒鳌蟹肝孢虫(Hepato⁃spora eriocheir)的DTⅢ聚为一支,进化距离最近。研究结果明确了东方蜜蜂微孢子虫DTⅢ的理化性质和分子特性,并揭示东方蜜蜂微孢子虫与绒鳌蟹肠孢虫的DTⅢ亲缘关系最近,DTⅢ在东方蜜蜂微孢子虫和其他微孢子虫中具有较高的保守性。

DNA拓扑异构酶（DNA topoisomerase）

能够将线状、环状、单链或双链DNA分子进行拓扑变换（引入正超螺旋或负超螺旋）的酶，为DNA复制所必需。该酶的作用大致相当于核酸内切酶和连接酶作用的总和。DNA拓扑异构酶有两型：Ⅰ型能将DNA超螺旋的一条链暂时性切断，使链的末端沿着螺旋轴转动从而使超螺旋得到松弛，然后再把单链切口连接起来，作用过程中不需ATP供能。Ⅱ型能将DNA双链暂时性切断，将负超螺旋引入，

拓扑异构酶1及其喜树碱类抑制剂的临床研究进展

DNA拓扑异构酶1(Top 1)是一种重要的核酶,在DNA复制、转录、重组、修复、染色质组装和染色体分离等细胞代谢过程中,控制和修饰DNA拓扑结构。而且,Top1在多种肿瘤细胞中均过度表达。Top 1作为抗肿瘤药物靶点的确认,促进了新型抗肿瘤药物的发展。目前,研究最多的Top 1抑制剂主要是喜树碱类,已有3个喜树碱类药物上市(拓扑替康、伊立替康和贝洛替康)。本文对Top 1结构和功能的最新研究结果及其喜树碱类抑制剂的近期临床研究进展进行综述。

鸦胆子油乳具有多药耐药逆转和拓扑异构酶Ⅱ抑制作用

目的 研究鸦胆子油乳体外对多药耐药细胞株的作用和对拓扑异构酶 (topoisomerase ,TOPO)活性的影响。 方法 MTT法测定鸦胆子油乳体外对敏感和耐药细胞株的杀伤作用 ;TOPOⅠ介导的负超螺旋 pBR3 2 2解旋反应和TOPOⅡ介导的kDNA去连环反应检测鸦胆子油乳对TOPOⅠ和TOPOⅡ催化活性的影响。结果 鸦胆子油乳浓度为 0 0 2 5g·L-1时能在一定程度上逆转K5 62 /A0 2、MCF 7/ADM和KB/VCR等细胞的耐药性。鸦胆子油乳能抑制TOPOⅡ介导的kDNA去连环作用 ,浓度为 0 3 1g·L-1时鸦胆子油乳可部分抑制TOPOⅡ酶活力 ,浓度为 2 5g·L-1则完全抑制TOPOⅡ酶活力 ;对TOPOⅠ介导的pBR3 2 2解旋作用无影响 ,对DNA也无直接作用。结论 鸦胆子油乳对多药耐药有一定的逆转作用 ,并能明显抑制TOPOⅡ的活性。

DNA拓扑异构酶Ⅰ结构、功能及喜树碱类抗癌药物研究进展

目的 DNA拓扑异构酶I是生物体内极其重要的细胞核内酶 ,参与DNA复制、转录、重组和修复等所有关键的核内过程。该酶已成为重要的抗癌药物研究新靶点。讨论了该酶迄今最特异性抑制剂喜树碱类化合物研究近况。方法 以近年来国外发表的论文为基础 ,介绍拓扑异构酶Ⅰ结构、功能研究的最新成果 ,特别是药物作用模式研究方面的研究成果。结果与结论 这将为新型抑制剂的合理药物设计打下坚实基础。

螺旋藻提取物对DNA拓扑异构酶活性的抑制及对DNA的直接影响

探讨螺旋藻提取物对DNA拓扑异构酶活性的影响以及对DNA的直接作用。方法 :TOPOI介导的负超螺旋 pBR322解旋反应检测对TOPOI酶活力的影响 ;TOPOII介导的kDNA去连环作用检测对TOPOII活力的影响 ;采用负超螺旋pBR322和kDNA检测对DNA的直接作用。结果 :螺旋藻提取物的水溶性成分和DMSO可溶性成分在浓度分别为3 2μg/ml和80μg/ml时,能完全抑制TOPOI介导的负超螺旋 pBR322解旋反应;两者对TOPOII介导的kDNA去连环作用完全抑制的浓度分别为16μg/ml和2000μg/ml。此外 ,螺旋藻提取物水溶性成分在高浓度时可直接引起DNA的双链断裂。结论 :TOPO酶 ,主要是TOPOI 。

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对K562细胞的杀伤与诱导凋亡作用

背景与目的:近年发现,拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对加速期或急变期的慢性髓细胞白血病有较好疗效。为了深入理解拓扑异构酶Ⅰ抑制剂这一新的药理作用,本研究采用具有慢性髓细胞白血病特征性异常染色体犤t(9;22)犦的K562细胞株为实验对象,进一步探讨拓扑异构酶Ⅰ抑制剂拓扑替康(topotecan)对靶细胞的杀伤与诱导凋亡活性。方法:采用MTT法测定拓扑替康对K562细胞的杀伤作用;通过形态学与AnnexinVFITC染色,研究拓扑替康对靶细胞的促凋亡活性;采用caspase-8特异性抑制剂IETD-fmk,分析拓扑替康介导的细胞杀伤或凋亡和caspase活化的关系。结果:经0.15μmol/L拓扑替康处理至12、24、48及72h时,K562细胞的存活率与对照相比,逐渐降至(92±36)%犤P>0.05vs(94±27)%犦、(68±21)%犤P<0.05vs(119±13)%犦、(54±15)%犤P<0.05vs(132±31)%犦及(21±10)%犤P<0.01vs(114±19)%犦;同时,靶细胞出现磷脂酰丝氨酸外翻、细胞固缩、染色质边集、核碎裂,最终解离为大量凋亡小体;经caspase-8抑制剂与拓扑替康联合处理至24、48h时,K562细胞的存活率依然维持在(95±29)%与(87±11)%,后者显著高于单用拓扑替康者犤P<0.05vs(54±15)%犦,且无明确的凋亡小体形成。

Santamarin的抗肿瘤活性及对DNA拓扑异构酶的影响

目的研究Santamarin的体内外抗肿瘤活性及对DNA拓扑异构酶（TOPO）活性的影响。方法以7株人肿瘤细胞株为模型，采用改良MTT法检测Santamarin对肿瘤细胞增殖的影响；以小鼠移植性肉瘤S180和小鼠移植性肝癌H22为模型，检测Santamarin对在体肿瘤生长的影响；以pBR322DNA为底物，采用琼脂糖凝胶电泳检测Santamarin对TOPO介导的pBR322DNA解旋反应的影响，以及对pBR322DNA是否具有直接断裂作用。结果Santamarin对7株人肿瘤细胞株的半数抑制浓度（IC50）在0．99～3．61mg·L^-1之间；Santamarin30、90和270mg·kg^-1剂量对S180生长的抑制率分别为51．44％、63．60％和56．37％；对H22生长的抑制率分别为40．77％、39．47％和46．73％。Santamarin在2g·L^-1时完全抑制TOPOⅠ、Ⅱ的活性，但对DNA无直接断裂作用。结论Santamarin具有较为明显的体内外抗肿瘤活性，对DNATOPO活性的抑制可能是其作用机制之一。