2种喜树碱类拓扑异构酶1抑制剂ADE信号的挖掘与分析

目的对2种喜树碱类拓扑异构酶1抑制剂伊立替康和托泊替康的药物不良事件(ADE)信号进行挖掘与分析,为临床安全用药提供参考。方法基于美国FDA不良事件报告系统(FAERS)数据库,提取2004年1月1日至2023年3月31日上述2种药物的ADE报告数据。对数据进行处理后,采用报告比值比法联合贝叶斯置信传播神经网络法进行信号挖掘,并进行分析。结果共筛选出相关ADE报告14738份,其中伊立替康11483份,托泊替康3255份。伊立替康的ADE报告性别以男性为主,托泊替康以女性为主;两药的使用患者年龄均主要集中于45~<75岁。共检测出847个信号,累及24个系统器官分类(SOC)。其中,伊立替康检测出565个信号,累及24个SOC,主要集中于胃肠系统疾病、全身性疾病及给药部位各种反应、血液及淋巴系统疾病等;报告频数最多的ADE为腹泻,信号强度最大的ADE为胆碱能综合征。托泊替康检测出282个信号,累及22个SOC,主要集中于全身性疾病及给药部位各种反应、各类检查、血液及淋巴系统疾病、胃肠系统疾病等;报告频数较多的ADE为死亡和贫血,信号强度最大的ADE为发热性骨髓再生障碍。伊立替康的转移性结肠直肠癌、外周感觉神经病、脂肪性肝炎等ADE和托泊替康的虹膜萎缩、视网膜变性、玻璃体积血等ADE均未在各自说明书中提及。结论伊立替康和托泊替康的ADE主要累及消化系统和血液系统,临床上应重点监测;伊立替康所引起的胆碱能综合征应引起关注。除此之外,使用伊立替康的患者还应关注转移性结肠直肠癌、外周感觉神经病、脂肪性肝炎、蛋白尿等ADE,使用托泊替康的患者应加强眼器官疾病的监测,以确保用药安全。

拓扑异构酶1及其喜树碱类抑制剂的临床研究进展

DNA拓扑异构酶1(Top 1)是一种重要的核酶,在DNA复制、转录、重组、修复、染色质组装和染色体分离等细胞代谢过程中,控制和修饰DNA拓扑结构。而且,Top1在多种肿瘤细胞中均过度表达。Top 1作为抗肿瘤药物靶点的确认,促进了新型抗肿瘤药物的发展。目前,研究最多的Top 1抑制剂主要是喜树碱类,已有3个喜树碱类药物上市(拓扑替康、伊立替康和贝洛替康)。本文对Top 1结构和功能的最新研究结果及其喜树碱类抑制剂的近期临床研究进展进行综述。

羧酸酯酶-2和拓扑异构酶1的表达对伊立替康联合铂类治疗小细胞肺癌的预测意义初探

目的:探讨小细胞肺癌组织中羧酸酯酶-2(CES-2)和拓扑异构酶1(topo1)的表达对伊立替康(CPT-11)联合铂类化疗预后的临床意义。方法:分别应用免疫组化方法和酶联免疫吸附方法检测接受CPT-11联合铂类治疗的48例小细胞肺癌患者组织CES-2表达和topo1活性,并与患者化疗的临床预后如无疾病进展期(PFS)和总生存期(OS)进行比较。结果:48例小细胞肺癌标本中,CES-2阳性比为72.9%,topo1活性为(22 459±5 422)U·mg-1protein,CES-2表达及topo1活性在不同分期小细胞肺癌患者中差异均无统计学意义(P>0.05)。不同分期小细胞肺癌患者CES-2是否表达与其中位PFS及OS差异亦均无统计学意义(P>0.05)。31例局限期小细胞肺癌患者中,CES-2表达阳性的中位PFS及OS分别是12.3,18个月;CES-2表达阴性的中位PFS及OS分别是10.9,17.6个月。17例广泛期小细胞肺癌患者中,CES-2表达阳性的中位PFS及OS分别是10.5,14.1个月;CES-2表达阴性的中位PFS及OS分别是10.2,13.8个月。结论:CES-2表达和topo1活性尚不足以预测CPT-11联合铂类治疗小细胞肺癌的预后,有待扩大样本量进一步从疗效、毒性及预后方面同时考察。

直肠癌患者伊立替康化疗敏感性与拓扑异构酶1水平的关系

目的:探讨直肠癌患者伊立替康化疗敏感性与拓扑异构酶1(TOPO-1)水平的关系。方法:纳入江南大学附属医院2017年1月-2019年6月接受伊立替康化疗的直肠癌患者80例。收集其临床资料,包括性别、年龄、临床分期、分化程度、病理类型。化疗8个周期后观察患者的近期疗效,将治疗无效者视为伊立替康化疗不敏感,将治疗有效者视为伊立替康化疗敏感,并分为敏感组和不敏感组。患者均于入院第2天取病理组织,测定并比较两组患者的TOPO-1表达水平。绘制工作特征曲线(ROC),分析TOPO-1水平对伊立替康化疗敏感性的评估价值。分别在患者入院时和化疗8个周期后,采血检测血清糖类抗原19-9(CA19-9)和癌胚抗原(CEA)水平,比较两组患者的血清指标。经Pearson线性相关检验,分析TOPO-1水平与CA19-9和CEA血清水平的相关性。结果:在80例患者中,有32例(40.00%)部分缓解,26例(32.50%)稳定,22例(27.50%)未缓解。敏感组患者的TOPO-1表达水平显著高于不敏感组[(16.39±3.26)%vs(11.28±2.11)%,P<0.05]。TOPO-1表达评估伊立替康化疗敏感性的曲线下面积为0.780(标准误=0.054,P<0.001,95%CI:0.675~0.886)。敏感组治疗后CA19-9和CEA的血清水平显著低于本组治疗前以及不敏感组治疗后(P<0.05)。Pearson线性相关检验提示,TOPO-1水平与CA19-9和CEA的血清水平呈正相关(r=0.817,P<0.001;r=0.701,P<0.001)。结论:与伊立替康化疗不敏感的直肠癌患者相比,敏感患者的肿瘤组织中TOPO-1表达水平明显增高,且TOPO-1表达水平与CA19-9和CEA的血清水平呈正相关。

茚并异喹啉酮类拓扑异构酶1抑制剂的研究进展

拓扑异构酶1(Top1)在调控DNA的拓扑形态中起关键作用,是抗肿瘤药物研发的重要靶点。喜树碱是强效的Top1抑制剂,但具有较多缺陷,在众多寻找成药性更好的非喜树碱类Top1抑制剂的研究中,Cushman小组发展的茚并异喹啉酮类新型化合物是其中的典型代表。目前该领域的研究,已经发现了数十个活性优良的先导化合物,并先后有3个进入临床研究阶段。本文综述了茚并异喹啉酮类新药发展历程及其研究策略。

脱氧核糖核酸拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1与肿瘤的研究进展

脱氧核糖核酸(DNA)损伤应答(DDR)是维持内稳态及肿瘤发展重要机制之一。DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)在维持基因组稳定性及调控DDR相关信号通路中扮演着关键角色。最新研究发现,TopBP1通过多种分子机制促进肿瘤细胞的生长、转移及耐药,并且与肿瘤发病风险及预后显著相关。本文对TopBP1在乳腺及妇科、呼吸及消化系统肿瘤中的最新研究进展进行综述,以期深入了解TopBP1在不同肿瘤中的作用机制,推动其转化为临床标志物或药物干预靶点,并为基于DDR的抗癌策略提供新思路。

DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)磷酸化功能位点推测及功能分析

为阐明DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)参与DNA损伤修复应答的分子机制,本研究通过生物信息学分析,发现多个潜在的TopBP1磷酸化位点T860,S887,T1104及T1167,利用分子生物学手段从人cDNA文库中扩增并获得TopBP1克隆质粒,将上述磷酸化位点突变为丙氨酸,观察突变质粒转染细胞对DNA损伤修复的应答反应.结果显示,在粒子射线照射或化疗药物处理细胞后,第1104丙氨酸突变(T1104A)的TopBP1蛋白导致pRPA32-S33的磷酸化水平大幅降低,同时细胞周期检验点失活,严重阻滞了DNA应激反应,证实T1104是TopBP1参与DNA损伤修复的关键活性位点.

TOPO-1在转移性结直肠癌组织中的表达及与伊立替康化疗的相关性研究

目的探讨拓扑异构酶1(topoisomerase1,TOPO-1)在转移性结直肠癌组织中的表达,并分析其与伊立替康(CPT-11)化疗疗效的相关性。方法经病理活检证实为转移性结直肠癌初诊者98例,均接受FOLFIRI方案一线化疗,化疗前检测肿瘤组织TOPO-1的表达水平,分析TOPO-1表达水平与近期疗效的关系,并观察远期疗效。结果 TOPO-1表达水平与转移性结直肠癌的临床特征无明显相关性(P>0.05)。高表达组患者RR为52.2%(24/46),低表达组RR为28.8%(15/52),差异有统计学意义(P<0.05)。TOPO-1高表达组中位PFS为9.5个月(8~12个月),低表达组为8.0个月(7~9个月),差异有统计学意义(P=0.002)。结论 TOPO-1高表达转移性结直肠癌患者可从伊立替康化疗中获得更高的近期疗效和更长的无疾病进展生存时间,可能对伊立替康化疗更敏感。

CPT-11联合5-Fu/FA治疗晚期大肠癌

目的研究CPT-11(伊立替康)联合5-Fu(5-氟脲嘧啶)/FA治疗晚期大肠癌的疗效及其不良反应,及拓扑异构酶-1(TopoⅠ)阳性对CPT-11的疗效是否有预测作用。方法28例晚期大肠癌患者接受治疗CPT-11 180 mg/m2,静脉滴注,第1天;FA 200 mg/m2,静脉滴注,第l^2天;5-Fu 400 mg/m2静脉推注,5-Fu 600 mg/m2静脉滴注22 h,第1~2天,每2周重复1次(l个周期)的方案治疗,4个周期后评价疗效。结果在27例可评价疗效的患者中,CR 1例,PR 7例,SD 8例,PD 11例,有效率29.62%。经卡方检验,TopoⅠ阳性组及阴性组有效率、疾病控制率及中位TTP比较,均无显著性差异。Ⅲ~Ⅳ度毒性反应以骨髓毒性及延迟性腹泻为著。结论CPT-11联合5-Fu治疗晚期大肠癌有一定疗效,且毒性可以耐受。TopoⅠ阳性组及阴性组治疗反应相仿。

TopBP1多克隆抗体的制备及初步鉴定

研究以人cDNA文库为模板,构建重组质粒pET41a-TopBP1,在原核表达菌株BL21中通过IPTG诱导,表达并经GST亲和纯化重组蛋白TopBP1-GST,免疫家兔后制备多抗血清,并采用Western-Blot检测其效价和特异性,为TopBP1在DNA损伤修复中的研究奠定基础.结果显示在表达受体菌株BL21中成功表达并纯化了TopBP1-GST重组蛋白,免疫家兔并获得了高效价的多抗血清,利用Western-Blot也证实了抗体特异性,并能识别出经CPT处理后的特异性磷酸化条带.以上表明,高效价的兔抗人TopBP1血清抗体制备成功,为TopBP1相关领域的研究提供了技术支撑.

血小板衍生生长因子受体-β信号促进突变型p53介导MDA-MB-231细胞阿霉素耐药

目的探讨血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-beta,PDGFR-β)信号与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞阿霉素耐药的关系及机制。方法采用流式细胞术、MTS法检测PDGF-DD(PDGFR-β特异性配体)对阿霉素所致的细胞G_2期阻滞、细胞凋亡及死亡情况的影响;qPCR和Western blot检测突变型p53、cdk1、PDGFR-β、p21、bax、hsp90及TopBP1表达水平,以研究PDGF-DD、Wortmannin(PI3K抑制剂)对突变型p53及其功能的影响;利用siRNA干扰技术、qPCR探讨突变型p53、PDGF-DD和耐药相关基因表达的关系。结果 PDGF-DD明显提高阿霉素条件下细胞存活率、降低细胞凋亡率、一定程度改善细胞G_2期阻滞,显著提高突变型p53蛋白水平并改变其下游基因cdk1、PDGFR-β、p21、bax表达,但突变型p53 mRNA变化差异不具统计学意义(P>0.05)。PDGF-DD显著上调hsp90(突变型p53蛋白稳定因子)和TopBP1(突变型p53功能促进蛋白)mRNA和蛋白水平,Wortmannin处理后表达明显下降。PDGF-DD明显提高耐药相关基因FOXC2、twist、snail、nanog、oct4mRNA水平,p53 siRNA处理后mRNA表达显著下降。结论 PDGF-DD/PDGFR-β信号能诱导MDAMB-231细胞发生阿霉素耐药,通过PI3K途径转录水平上调hsp90和TopBP1表达、稳定并促进突变型p53介导细胞耐药是其重要机制之一。

植物生物碱抗肿瘤机制(英文)

生物碱中的一些种类用于治疗癌症已有相当长的一段时间。回顾了近年来在分子、细胞及生理水平上这些生物碱抗肿瘤的作用机制 ,包括长春花生物碱类、喜树碱、秋水仙碱、玫瑰树碱等。

片螺素D(LMD)及其衍生物的研究进展

片螺素(Lamellarins)是一类从前腮亚纲软体动物中分离的具有较强生物活性的海洋吡咯生物碱,迄今已发现40余种.片螺素D(LMD)是片螺素系列化合物中生物活性最强的,是继喜树碱(CPT)之后的一种新的拓扑异构酶1抑制剂,对一系列癌细胞具有很强的细胞毒性,并作用于细胞线粒体,影响细胞周期,诱导细胞凋亡.结合作者的研究工作,综述了LMD及其衍生物的最新研究进展,重点介绍其化学合成(包括合成中心吡咯环和以吡咯环为中心的两大类合成方法),并展望了该领域今后的发展趋势.

药物代谢酶在大肠癌化疗个体化方案选择中的作用

目的探讨伊利替康(CPT-11)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗晚期大肠癌患者的临床疗效和胸苷酸合成酶(TS)、拓扑异构酶-1(Topo-1)和二氢吡啶脱氢酶(DPD)对预后的预测价值。方法采用免疫组化方法检测了CPT-11+5-FU一线治疗80例大肠癌患者的TS,Topo-1和DPD的表达,并对化疗疗效和患者的临床预后进行了分析。结果各检测指标的表达水平与临床疗效之间无关联,但是临床预后不同。其中TS低表达患者表现明显长的肿瘤进展时间(TTP,P<0.05)和存活期(OS,P<0.05),DPD低表达也预示长的OS(P<0.05)。与单个指标相比较,两个指标的联合也不能预测临床疗效,但是对预后的判断作用明显提高。TS低表达、DPD低表达以及TS和DPD均低表达患者的TTP分别为9.1,8.2和17.3个月(P<0.05);TS低表达、Topo-1低表达以及TS和Topo-1均低表达患者的TTP分别为9.1,9.1和13.2个月(P<0.05);而Topo-1低表达、DPD低表达以及Topo-1和DPD均低表达患者的TTP分别为8.2,9.1和11.4个月(P<0.05)。其中任何两个指标均低表达肿瘤的TTP和OS均明显长于高表达者(P<0.05)。结论TS、Topo-1和DPD不能预测大肠癌患者CPT-11+5-FU的疗效,但对其临床预后有一定的预测作用。其中任何两个指标的联合,比单一指标对患者预后的预测价值明显提高。

MTT比色法测定羟基喜树碱和平阳霉素对Acc-M细胞作用的实验研究

为观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和两两联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用,采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期变化。结果表明,两种药单用及两药合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PYM合用最强。HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长,克隆形成率降低,细胞凋亡率增加,以联合用药为佳。结论:HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc-M细胞在体外有很好的抑制作用,且与以联合应用效果更佳。

肠易激综合征

胸苷酸合成酶和拓扑异构酶-1及Ki-67对伊立替康联合5-氟脲嘧啶治疗晚期大肠癌的预测价值；氟西汀和多塞平治疗难治性肠易激综合征；谷参肠安胶囊与思密达对肠易激综合征腹泻型临床疗效观察；马来酸曲美布汀治疗肠易激综合征的疗效和安全性研究；