拟人参皂苷F11的生物活性研究进展

中药西洋参是五加科多年生的草本植物西洋参干燥的根,拟人参皂苷F11(PF11)最早在西洋参中发现,是西洋参区别于人参、三七的主要特征成分。本文旨在综述西洋参中特有皂苷PF11的生物活性,对揭示西洋参科学内涵及潜在药物研发具有重要意义。

西洋参特有成分——拟人参皂苷F_(11)的分离、鉴定与含量测定

为了筛选西洋参的特有成分,以利对西洋参生药及其制品的定性鉴别和含量测定,为研制开发新药提供理论依据,本试验采用大孔树脂法和硅胶柱层析分离法对西洋参甲醇提取物进行分离纯化,将所得单体应用质谱1、3C-核磁共振谱、电子轰击质谱(EL-MS)鉴定,并用高效薄层层析法比较了人参、西洋参和三七的甲醇提取物,用薄层扫描法对西洋参各部位拟人参皂苷F11的含量进行了测定。结果表明:西洋参特有皂苷成分为拟人参皂苷F11,在西洋参的花蕾、花柄、果肉、茎叶和根中的含量依次为2.34%,1.93%,1.54%,0.97%和0.28%。

拟人参皂苷F_(11)在大鼠体内的药物代谢研究

目的 探讨拟人参皂苷F11在大鼠体内的药物代谢产物及其过程。方法 ip拟人参皂苷F11后 ,应用TLC分析排泄物中的代谢产物 ,并利用制备薄层分离制备代谢产物 ,通过波谱解析 (MS ,1HNMR ,13CNMR ,1H 1HCOSY)确定其结构。结果 从粪便中分离鉴定了 3种代谢产物 ,分别为拟人参皂苷RT5,ocotillol和 1个新的代谢产物F 3 1,并确定其结构为 6 O α L 吡喃鼠李糖基 ( 1- 2 ) β D 吡喃葡糖基 ( 2 0S ,2 3S ,2 4R) 达玛 2 0 ( 2 4 ) 环氧 3 β ,6α,12 β,2 3 ,2 5 五醇 ( 6 O α L rhamnopyranosyl ( 1- 2 ) β D glucopyranosyl ( 2 0S ,2 3S ,2 4R) dammar 2 0 ( 2 4 ) epoxy 3 β ,6α,12 β ,2 3 ,2 5 pentanol)。但在尿液和胆汁中并未发现任何代谢产物。 结论 拟人参皂苷F11不被肝脏代谢 。

HPLC测定妇康颗粒中拟人参皂苷F_(11)的含量

目的建立妇康颗粒中拟人参皂苷F11的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，以Xterra RP18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱为固定相，乙腈-水（32：68）为流动相；柱温为25℃；流速为1．0ml/min，检测波长为203nm。结果拟人参皂苷F11的测定在2．3—57．5μg范围内线性关系良好，平均回收率为99．97％，RSD为0．64％（n=6）。结论方法简便、准确，重复性好，可用于妇康颗粒的质量控制。

应用HPLC/ELSD法测定西洋参中拟人参皂苷F_(11)的含量

目的：测定西洋参中拟人参皂苷Ｆ１１的含量。方法：应用高效液相色谱法－蒸发光散射检测器（ＨＰＬＣ／ＥＬＳＤ），ＰｌａｔｉｎｕｍＣ１８色谱柱，乙腈－水（３０∶７０）为流动相，并优化选择了蒸发光散射检测器参数，测定了西洋参中拟人参皂苷Ｆ１１的含量。结果：拟人参皂苷Ｆ１１在２１９２～１０９６μｇ范围内呈良好线性（ｒ＝０９９９２，ｎ＝５），回收率为（１０２６±４１）％。结论：本方法精密度、重现性良好，适用于人参皂苷类成分的分析测定。

西洋参花蕾中人参皂苷Re、拟人参皂苷F_(11)、人参皂苷Rb_3、人参皂苷Rd的含量测定

目的建立运用超高效液相色谱-串联四极杆质谱联用技术同时测定西洋参花蕾中4种皂苷类成分(人参皂苷Re、拟人参皂苷F_(11)、人参皂苷Rb_3、人参皂苷Rd)含量的分析方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈和0.05%氨水为流动相进行梯度洗脱;体积流量为0.45 mL/min;柱温35℃;采用电喷雾离子源(ESI)负离子检测方式,多反应监测模式(MRM)。结果该分析方法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率考察结果均符合要求,各对照品在相应的浓度范围内,线性关系良好。结论建立的方法快速,简便,准确度高,可靠性强,可用于西洋参花蕾中皂苷类成分的分析。

拟人参皂苷F11对甲基苯丙胺依赖大鼠的血清及脑组织中氧化物的影响

目的观察拟人参皂苷F11(PF11)对甲基苯丙胺(MA)依赖大鼠脑组织中氧化物质的干预,探讨PF11对MA依赖大鼠脑损伤的保护作用。方法采用剂量递增法建立MA依赖大鼠模型,分别ig大鼠3、6 mg·kg-1PF11,连续12 d,第13天断头取血、脑,观察各组大鼠血清及脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的变化。结果 MA依赖大鼠血清及脑组织海马区MDA的含量显著升高,SOD、GSH-Px的活力下降,与对照组有显著差异;与模型组比较,PF11 6 mg·kg-1组的脑组织海马区MDA的含量显著降低,SOD、GSH-Px的活力显著升高。结论 PF11能降低MA染毒大鼠脑组织海马区MDA的含量,升高SOD、GSH-Px的活力,通过抗氧化作用对脑组织损伤有较好的干预与保护作用。

西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F_(11)工艺

目的:优选从西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F11的最佳工艺。方法:以拟人参皂苷F11(PF11)提取率为指标,建立HPLC-ELSD检测PF11的方法,并优选AB-8大孔吸附树脂纯化西洋参茎叶总皂苷中PF11的工艺。结果:最佳工艺为西洋参茎叶总皂苷过10倍量AB-8大孔吸附树脂柱,流速5 mL.min-1,依次用7.5 BV 30%～33%乙醇,8 BV 35%～40%乙醇进行洗脱,收集35%～40%乙醇洗脱液,回收乙醇,蒸干,得PF11粗品纯度>50.0%。结论:大孔吸附树脂分离拟人参皂苷F11方法简单、快速、可行。

西洋参中总皂苷的富集工艺研究

目的研究大孔吸附树脂富集西洋参总皂苷的工艺条件及参数,并测定富集后拟人参皂苷F_(11)含量。方法采用紫外分光光度法,以西洋参总皂苷含量为指标,考察上样量、洗脱溶剂及其用量、除杂溶剂及其用量等条件;同时利用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测西洋参中总皂苷富集液中拟人参皂苷F_(11)含量。结果优选大孔吸附树脂富集工艺条件为:采用D101型大孔吸附树脂,上样浓度0.5 g/mL,上样体积0.5 BV,5BV水洗,3 BV 20%乙醇洗脱除杂,6 BV 70%乙醇洗脱富集,流速1 mL/min,得到富集液中西洋参总皂苷转移率为81.04%,纯度为73.75%;富集液中拟人参皂苷F_(11)含量为2.03±0.28 mg/g。结论优选工艺可较好地富集西洋参中人参总皂苷,富集液中拟人参皂苷F_(11)含量稳定,说明优化富集工艺稳定、可行。

参桂鹿茸丸中人参掺伪检查研究

目的:建立参桂鹿茸丸中人参掺伪检查方法,考察企业是否存在使用西洋参或其边脚料替代人参投料的现象,为中药监管提供技术支持。方法:以西洋参特征组分拟人参皂苷F11为掺伪检测依据,采用超高效液相色谱-串联质谱法,采用C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以甲醇和0.1%的甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温25℃;电喷雾正离子模式(ESI^(+)),多反应监测(MRM)模式进行检测。结果:拟人参皂苷F11进样浓度在12.32~616.00 ng·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系(R^(2)>0.9999);重复性试验的RSD为2.1%;平均回收率为102.6%,RSD=2.1%(n=9);43批样品中,16批样品检出西洋参,检出率高达37%。结论:该方法灵敏、准确,可作为参桂鹿茸丸中人参掺伪的检查方法。

UPLC-MS/MS同时检测人参健脾丸和人参归脾丸中非法添加西洋参

目的:建立一种可同时测定人参归脾丸和人参健脾丸中非法添加西洋参的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测方法。方法:用80%甲醇回流提取制备供试品溶液,使用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^(-1),柱温为40℃,采用电喷雾离子源、多反应监测模式、负离子方式进行扫描。结果:拟人参皂苷F_(11)在5.025~100.500 ng·mL^(-1)线性关系良好(r=0.9985),重复性RSD为1.4%,拟人参皂苷F_(11)在人参归脾丸和人参健脾丸中的回收率分别为97.71%、97.64%,检出限为1 ng·mL^(-1),定量限为3 ng·mL^(-1)。结论:建立的方法灵敏度高、实用性强,可作为人参归脾丸和人参健脾丸中非法投入西洋参的补充检验方法。

UPLC-MSMS法在西洋参、人参、红参中3种人参皂苷的含量研究与应用

目的:建立一种可以同时测定西洋参、人参、红参中3种人参皂苷的UPLC-MSMS法。方法:采用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.3 mL/min的流速,以0.1%甲酸水溶液和四氢呋喃-乙腈溶液(5∶95)为流动相进行梯度洗脱,使用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)的模式。结果:拟人参皂苷F11、人参皂苷Rf、Re分别在0.005μg/mL~0.20μg/mL、0.01μg/mL~0.40μg/mL、0.01μg/mL~0.40μg/mL的浓度范围内,呈良好的线性关系;3种人参皂苷的平均回收率分别为93.9%(RSD=1.9%)、91.9%(RSD=2.3%)和101.3%(RSD=4.1%),检出限分别为0.0005μg/mL、0.001μg/mL、0.003μg/mL,定量限分别为0.0017μg/mL、0.003μg/mL、0.010μg/mL。结论:该法具有准确,快速,灵敏,简便的特点,适用于西洋参、人参、红参3种人参皂苷化合物含量测定。

参麦颗粒中红参掺伪研究

目的建立参麦颗粒中红参掺伪的检查方法。方法采用固相萃取-超高效液相色谱串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)法,色谱柱为Shimadzu Shim-pack GIST C18柱(100 mm×2.1 mm,2μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL。电喷雾离子源、负离子模式(ESI-),多反应监测(MRM)模式。结果拟人参皂苷F11质量浓度在9.030~344.0 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9992,n=5),检测限和定量限分别为1.1288,22.8 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于4.0%;平均加样回收率为108.17%,RSD为4.24%(n=6)。以0.051μg/g为掺伪判定限度,3家企业的85批样品中有9批超出限度(检出率为10.59%)。结论所建立的方法简便快速、准确度高、专属性强,可作为参麦颗粒中红参掺伪的检查方法。

基于HPLC-MS/MS法的脑灵素制剂中人参掺伪检查研究

目的建立脑灵素制剂中人参掺伪检测方法。方法高效液相色谱法-串联电喷雾三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS),采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈-水为流动相,流速为0.35 mL·min^(-1);柱温为40℃,进样量为5μL,多反应监测(MRM)模式。结果66批脑灵素制剂样品中,有36批样品检出拟人参皂苷F_(11)成分,检出率为54.5%。结论脑灵素制剂中存在人参掺伪使用的现象,本方法准确可靠,可为脑灵素制剂中人参质量控制提供参考。

基于闪式提取-UPLC-MS/MS检测参苓白术散中非法添加西洋参的研究

采用闪式提取法提取,UPLC-MS/MS法检测参苓白术散中非法添加的西洋参下脚料的方法。方法 用体积分数为75%的甲醇闪式提取制备供试品溶液,使用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18 色谱柱(2.1mm×100mm,1.8μm),乙腈和水为流动相在不同的时间以不同的比例梯度洗脱,体积流量为0.30mL·min-1,柱温箱设置为38℃,采用ESI源,MRM模式,负离子方式进行扫描。结果 拟人参皂苷F11在5.08~101.6ng·mL-1的浓度范围呈良好的线性(r=0.99851),重复性的RSD为0.86%,拟人参皂苷F11的回收率为97.67%,检出限为1ng·mL-1,定量限为3ng·mL-1。结论 所建立的方法灵敏度高、实用性强,可以做为参苓白术散中非法投入西洋参的补充检验方法。

人参及脑安制剂中西洋参掺伪检查方法研究

目的建立人参及脑安制剂中拟人参皂苷F 11检查方法,考察人参药材及含人参的中成药中是否存在以西洋参(或须根)冒充人参的现象。方法分析采用高效液相色谱串联三重四极杆质谱法;Waters Acquity UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱;流动相乙腈-四氢呋喃-20 mmol/L甲酸铵溶液(22.5∶2.5∶75);体积流量0.3 mL/min;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果拟人参皂苷F 11在0.03~3μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9947),人参药材、脑安制剂A、脑安制剂B的平均加样回收率分别为105.3%、94.4%、91.9%,RSD分别为6.4%、7.0%、3.1%。结论该方法灵敏、准确,可用于检查人参药材及脑安制剂中西洋参掺伪。

基于代谢组学和斑马鱼模型探究西洋参抗疲劳的关键活性成分

探索西洋参皂苷类成分中抗疲劳关键活性成分。利用斑马鱼模型评价西洋参样本的抗疲劳活性;运用代谢组学技术分析鉴定不同产地西洋参中主要皂苷类差异成分;通过构建西洋参皂苷类成分-疾病靶点PPI蛋白互作网络初步筛选出西洋参发挥抗疲劳作用的活性物质和相关靶点,利用分子对接的方法筛选出关键活性成分;最后使用斑马鱼模型评价关键活性成分的抗疲劳活性,动物实验获得山东省医学科学院伦理委员会的批准(SYXK20220005)。斑马鱼活性评价结果显示,两个产地的西洋参样本的活性存在显著差异,进一步经过代谢组学检测、模式判别共鉴定出其中10个差异皂苷类成分可能与抗疲劳活性有关。借助成分-疾病靶点的PPI筛选的抗疲劳的核心靶点,结合类药性参数及分子对接技术发现其中pseudoginsenoside F11与5个靶点均具有较好的结合活性。经斑马鱼模型验证发现拟人皂苷F11具有显著的抗疲劳活性。本研究运用代谢组学和斑马鱼模型筛选出了西洋参发挥抗疲劳的关键活性物质,为西洋参皂苷类抗疲劳的进一步研究提供参考。

UPLC-MS/MS检测乌鸡白凤丸中非法添加西洋参

目的建立UPLC-MS/MS测定乌鸡白凤丸中非法添加的西洋参。方法使用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈和水为流动相,梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^-1,柱温40℃,电喷雾电离源(ESI-),多反应离子监测(MRM)扫描方式进行检测。结果拟人参皂苷F11在0.113 0~451.9 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.999),重复性的相对标准偏差为3.5%,拟人参皂苷F11平均加样回收率(n=9)为96.9%,检出限为0.1ng·mL^-1,定量限为0.4 ng·mL^-1。结论所建立的方法快速准确、灵敏度高,可用于乌鸡白凤丸中非法添加西洋参的筛选和检测。