紫花苜蓿根腐病原菌--拟枝孢镰刀菌的鉴定及其生物学特性研究

本文对从内蒙古赤峰巴雅尔草业基地紫花苜蓿根部分离到的菌株BYE27-2-5进行了致病性测定、形态学和rDNA-ITS序列分析鉴定及生物学特性测定.结果表明,该菌菌丝生长、产孢和孢子萌发的最适温度分别为25,30和28℃;pH 值5.0～11.0均宜于菌丝生长,产孢最适pH8.0,孢子萌发最适pH7.0;光暗交替利于菌丝生长,光照利于产孢和孢子的萌发;孢子在相对湿度低于75% 不萌发,高于95% 萌发较快;葡萄糖蛋白胨培养基利于菌丝生长和孢子萌发,马铃薯蔗糖琼脂培养基利于产孢;碳源中葡萄糖利于菌丝生长和孢子萌发,蔗糖利于产孢;氮源中蛋白胨利于菌丝生长,酵母膏利于产孢和孢子萌发;菌丝致死温度为54℃（10min）,分生孢子的致死温度为48℃（10min）;根据其形态特征和rDNA-ITS序列分析结果,鉴定其为拟枝孢镰刀菌（犉狌狊犪狉犻狌犿狊狆狅狉狅狋狉犻犮犺犻狅犻犱犲）.

紫花苜蓿不同品种对拟枝孢镰刀菌的抗性评价

在温室盆栽30个紫花苜蓿品种45d后,将拟枝孢镰刀菌接种于幼苗根部土壤中,10d根据根部病情指数评定抗病性,筛选抗性后选择抗病和感病品种再次接种,于4,8和12h时测定与抗性相关酶的活性。结果表明,不同品种间抗性差异显著,其中耐病品种为晋南苜蓿、驯鹿、PG塞特、苏联二号4个,占测定品种总数的13.3%;高感品种为新疆大叶、中苜一号、陇中苜蓿、北疆苜蓿、皇冠、甘肃苜蓿和萨兰斯7个,占23.3%;其余的均为感病品种,占63.4%;未发现抗病和免疫品种。酶活性变化测定表明,对于接菌与未接菌的供试耐病和高感苜蓿品种,不同品种间CAT、SOD、PAL的活性存在一定差异;总体接菌植株的酶活性高于对照,且耐病品种的酶活性高于感病品种,酶活性在接菌后4~8d呈上升趋势,8~12d呈下降趋势;接菌植株CAT活性较对照增幅明显,SOD、PAL活性较其对照增幅不明显。

不同杀菌剂对拟枝孢镰刀菌的毒力测定及田间防效

为筛选高效防治紫花苜蓿根腐病的药剂,选用不同杀菌剂对拟枝孢镰刀菌进行室内毒力测定,盆栽药效试验和紫花苜蓿根腐病的大田防治试验。室内毒力测定结果表明:抑菌效果较好的分别是98%咯菌腈和98%戊唑醇,质量浓度为1.25μg/mL时,它们的抑菌率分别为90.11%和83.68%,抑菌效果较差的分别是98%嘧菌酯和97%恶霉灵。盆栽试验结果表明:98%咯菌腈的EC50值最小,为2.060 3μg/mL,对紫花苜蓿拟枝孢镰刀菌的抑制作用最大。15个复配组合除组合4、8、9和10表现为相加作用外,其余组合均表现为增效作用。大田试验结果表明:50%咯菌腈和43%戊唑醇以有效剂量250g/hm2的防效较好,其防效分别为69.42%和66.78%,50%咯菌腈和43%戊唑醇以有效剂量125和125g/hm2复配具增效作用的同时防效较好,为71.39%。咯菌腈和戊唑醇等可作为大田防治紫花苜蓿根腐病的首选药剂。

黑龙江省主栽马铃薯品种对燕麦镰刀菌(F.avenaceum)和拟枝孢镰刀菌(F.sporotrichioides)的抗病性评价

镰刀菌是引发马铃薯干腐病的病原菌,不仅导致马铃薯产量下降,还影响其储藏和品质。明确黑龙江省主栽马铃薯品种对镰刀菌的抗病性具有重要意义。选取强致病性菌燕麦镰刀菌(F.avenaceum)和弱致病性菌拟枝孢镰刀菌(F.sporotrichioides)接种黑龙江省21个主栽马铃薯品种,采用病级分类和系统聚类分析方法进行抗病性评价。结果表明,不同马铃薯品种对强致病性菌燕麦镰刀菌表现抗性的品种有5个、中抗的有11个和感病的有5个;对弱致病性菌拟枝孢镰刀菌具抗性的品种有3个、中抗的12个和感病的6个。不同致病菌对马铃薯品种的致病性不同,诺兰、克新1号和东农311对两种镰刀菌都具有抗性,鲁引1号、尤金、克新18号和克新19号对两种镰刀菌都较易感病。

甘肃省沙棘枝枯病病原菌的分离鉴定及其生物学特性

【目的】为我国甘肃地区大果沙棘枝枯病的发生和防控提供参考。【方法】利用组织分离法,在采集自甘肃省庆阳市的沙棘枝枯病样品中分离病原菌,应用柯赫氏法则对病原菌的致病性进行验证,通过形态学和分子鉴定,明确病原菌的分类地位。在不同培养基、光照、温度、培养基pH、碳源、氮源条件下,每日采用十字交叉法测量病原菌菌落直径,并于培养10 d后采用血球计数法计算孢子产量。【结果】形态学鉴定结果表明,致病菌的大型分生孢子数量多,呈镰刀状,中度弯曲,具有3~5个明显的隔膜。结合分子鉴定结果,对以其ITS序列和EF序列构建的系统发育树进行分析,结果表明甘肃省庆阳市沙棘枝枯病的致病菌为拟枝孢镰刀菌Fusarium sporotrichioides。病原菌的生物学特性研究结果表明,在PDA培养基上拟枝孢镰刀菌菌丝生长速度较快,在CMA培养基上产孢量最大,每毫升培养基上产孢量为5.24×10^(5)。利于菌丝生长的条件:全黑暗条件、25℃、培养基pH 6、蔗糖碳源,酵母浸膏氮源。利于产孢的条件:全黑暗条件、25℃、培养基pH 6、蔗糖碳源、甘氨酸氮源。【结论】在甘肃省庆阳市的沙棘枝枯病病原菌为拟枝孢镰刀菌,该致病菌的适应性较强。

沙棘枝枯病的定量检测体系构建和应用

【目的】找到一种灵敏度较高的定量检测沙棘枝干以及土壤中病原菌的方法,为沙棘枝枯病的早期诊断和防控提供参考。【方法】以17份沙棘枝条样本、4份沙棘根际土壤样本为材料,提取拟枝孢镰刀菌DNA,基于翻译延伸因子(EF-1α)设计特异性扩增拟枝孢镰刀菌的引物,检测PCR引物的特异性,检测拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR的灵敏性,并采用实时荧光定量PCR技术检测沙棘枝条和根际土壤微生物DNA样品。【结果】建立了拟枝孢镰刀菌质粒检测标准曲线(R²=0.9849),使用该曲线得到的每微升DNA样本的检测拷贝数是10^(3)~10^(8)。拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测结果表明,在17份枝条样品和4份土壤微生物DNA样品中,有7份样品出现荧光信号。【结论】与普通PCR扩增方法相比,建立的拟枝孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测体系的检测结果更精确,其具有更强的实用性和可操作性,既可以用于定性检测病原菌,又可以用于定量检测沙棘枝干和土壤中病原菌密度。实时荧光定量PCR技术凭借其优异的特异性和灵敏性可以被广泛地应用于多种植物、空气和土壤中病原菌含量的测定。

云南灯盏花根腐病病原初步鉴定

【目的】根腐病是云南省灯盏花人工驯化栽培过程中出现的一种新病害,是限制灯盏花人工栽培产业进一步发展的主要障碍之一。确定引起灯盏花根腐病的病原物,可以为制定有效的防治措施提供依据。【方法】对人工栽培田间的灯盏花根腐病进行调查、采样,对病原菌进行分离、鉴定,并进行了田间人工接种。【结果】观察发现感病后植株地上部先萎蔫,然后整株枯死。根部和茎基部变为黑褐色,将根切开,可以明显看到维管束组织完全变为黑色。分离得到的病原菌在标准培养基上初生菌落为白色,后为红色和红褐色。无性繁殖产生大、小两型分生孢子,大型分生孢子较少,镰刀状;小型分生孢子产生量很大,卵形至棍棒形。在弱培养基(2%的水琼脂)上产生厚垣孢子。【结论】这种新发现病害是由半知菌亚门丝孢纲瘤座菌目镰孢菌属拟枝孢镰刀菌(Fusarium sporotrichioides)引起,本文是国内外对该病害的首次报道,而且灯盏花是拟枝孢镰刀菌的新记录寄主。

美国大豆中镰刀菌的分离鉴定

为加强对美国输华大豆真菌病害的监测力度,降低外来生物入侵风险,本文通过对美国进境大豆病菌分离,共得到32个菌株,并对其中3株镰刀菌进行了形态学和分子生物学鉴定,确认了它们分别是尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、木贼镰刀菌(F.equiseti)和拟枝孢镰刀菌(F.sporotrichioides)。本研究从32个分离菌株中得到的3株镰刀菌分属于不同种,不仅证实了美国大豆中镰刀菌的多样性,也可为港口的植物检疫工作提供借鉴。

猪玉米赤霉烯酮中毒的诊断与治疗

2013年8-10月,东北地区松花江流域连降暴雨,黑龙江省双城区江段出现特大洪水,沿江两岸农作物及牧草被淹,玉米等未成熟就收割了,收获的玉米未经过充分晾晒,玉米中的水分含量高达23%-37%,潮湿的玉米在存储中污染了赤霉菌,部分养猪户将被赤霉菌污染的玉米添加在混合饲料中饲喂猪只,引起玉米赤霉烯酮中毒。