拟步甲昆虫基因组DNA提取的比较研究

对拟步甲科 8种昆虫的新鲜标本及无水乙醇浸泡标本 ,分别用SDS 蛋白酶K消化法和乙酸钾抽提法进行基因组总DNA的提取 .经 5次重复实验 ,结果表明 ,用两种方法均能从新鲜标本中获得较完整的DNA ,且DNA得率较高 ;而对于无水乙醇保存的标本 ,提取出的DNA用琼脂糖凝胶电泳检测不出DNA条带 ,说明标本在保存过程中DNA可能发生了变化 ,致使提取出的DNA量太少或未分离出DNA .通过对比实验 ,分析原因 ,阐明了两种方法的优缺点 ,并提出了该类昆虫用于DNA提取的标本的保存方法 .

荒漠拟步甲科昆虫总RNA的有效提取及电泳图谱分析

[目的]获得高质量的总RNA是开展分子生物学研究的重要一步,由于不同生物的机体组成成分有较大差异,需要针对不同类型的物种建立各自有效的RNA提取方法。鞘翅目昆虫富含几丁质的外壳,常规方法难以获得高质量的RNA。[方法]以鞘翅目拟步甲科昆虫小胸鳖甲(Microdera punctipennis)为例,采用TRIzol试剂提取分离总RNA,方法略有改进,并对总RNA的电泳谱带特征进行鉴定。[结果]利用该方法从小胸鳖甲成虫中所获得的总RNA纯度较高完整性好,进一步实验证明提取的总RNA可满足RT-PCR等多种后续实验。琼脂糖凝胶电泳分析表明,其总RNA电泳谱带主要以18S带为主,28S则很弱。[结论]该提取方法对其他荒漠拟步甲科昆虫,尤其是含几丁质外壳的甲虫总RNA提取具有指导作用,小胸鳖甲总RAN的电泳谱带与哺乳动物肿瘤细胞的不同。

一种提取荒漠拟步甲昆虫基因组DNA的新方法

昆虫基因组DNA的提取是研究昆虫功能基因的关键环节。一些荒漠昆虫个体较小,不易除去的外壳会造成多糖污染,用普通动物组织DNA提取方法效果不佳。通过紫外分光光度测定、凝胶电泳检测、PCR反应及限制性酶切分析表明,CTAB-NaCl法是一种适用于拟步甲科小个体昆虫提取基因组DNA的好方法,蛋白质、多糖及RNA影响很低,完全能够满足后续DNA研究的需求。与传统方法相比简便快速,且成本低,尤其适用于拟步甲科昆虫DNA的分离。

微地形变化对沙质荒漠拟步甲科昆虫分布的影响

干旱荒漠微地形变化影响小尺度植被和土壤的分布特征,然而,如何影响拟步甲科昆虫分布的认识仍不够。以甘肃省临泽县绿洲边缘流动沙地(丘)为研究对象,采用样方法调查了丘间低地及沙丘不同部位拟步甲科昆虫的种类组成、数量及生境条件。研究发现:(1)丘间低地拟步甲科昆虫群落结构与沙丘不同并存在季节变化,5月丘间低地拟步甲科昆虫数量、多样性指数和鳖甲属昆虫数量显著高于沙丘,而8月仅有拟步甲科昆虫的数量在丘间低地显著高于沙丘;(2)5月沙丘迎风坡和背风坡拟步甲科昆虫的数量均高于坡顶,宽漠王属和东鳖甲属昆虫主要选择在沙丘迎风坡活动,而鳖甲属昆虫主要选择在沙丘背风坡活动;(3)灌木覆盖度是影响拟步甲科昆虫在丘间低地和沙丘间分布的主要环境因子,而土壤含水量是影响拟步甲科昆虫在沙丘不同部位分布的主要环境因子。总之,拟步甲科昆虫对沙丘微地形变化具有明显的选择性,而这种选择与不同拟步甲科昆虫的生理生态特征密切相关。