黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群结构的影响

【目的】探究饲料中添加不同水平的黄芪多糖对黄喉拟水龟(Mauremys mutica)生长性能、血清生化指标和肠道菌群结构的影响,以期为黄芪多糖在黄喉拟水龟饲料中的应用及黄喉拟水龟的健康养殖提供理论依据。【方法】将初始平均体重为128.36±1.80g的黄喉拟水龟随机分为5组,分别投喂黄芪多糖含量为0(M0,对照组)、0.25%(M25)、0.50%(M50)、0.75%(M75)和1.00%(M100)的等氮等脂饲料,每组设3个重复,每重复10只龟,投喂60 d后测定其生长性能指标和血清生化指标,以高通量测序分析肠道菌群结构。【结果】生长性能分析结果显示,M25、M50和M75组的黄喉拟水龟的增重率和特定生长率显著高于M0组(P<0.05,下同),饲料系数显著低于M0组,其中M50组的增重率和特定生长率最高、饲料系数最低。M25、M50、M75和M100组黄喉拟水龟背甲长、背甲宽和背甲高的日增长与M0组比较均无显著差异(P>0.05,下同)。血清生化指标检测结果显示,M25、M50和M75组的碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性显著高于M0组,M50、M75和M100组的过氧化氢酶活性显著高于M0组;M25、M50和M75组的丙二醛含量显著降低。肠道菌群分析结果显示,M25组群落丰富度指数(Sobs指数和ACE指数)显著高于M0组,群落多样性指数(Shannon指数和Simpson指数)与M0组无显著差异。M50、M75和M100组的Sobs指数、Chao1指数、ACE指数、Shannon指数和Simpson指数与M0组差异均不显著。在门分类水平上,各组丰度占比排名前3的菌群均为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门,0.25%~1.00%的黄芪多糖对门分类水平的肠道菌群组成无显著影响。在属分类水平上,M50组的瘤胃球菌属1和M75组的汉氏盐单胞菌属相对丰度显著提高;添加0.25%和1.00%的黄芪多糖对属分类水平的肠道菌群组成均无显著影响。【结论】饲料中添加适量的黄芪多糖能有效地促进黄喉拟水龟生长、提高抗氧化能力并改善肠道菌群结构。综合分析,建议饲料中黄芪多糖添加量为0.50%。

黄喉拟水龟ISG15基因cDNA序列克隆及其表达特征分析

【目的】克隆黄喉拟水龟(Mauremys mutica)干扰素刺激基因15(ISG15)并分析其表达特征,为探究ISG15蛋白在黄喉拟水龟抗病原微生物侵袭过程中的免疫功能和作用机制提供理论依据。【方法】应用RACE克隆黄喉拟水龟ISG15基因(MmISG15)cDNA全长序列,进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR检测MmISG15基因在健康黄喉拟水龟不同组织中的表达情况,并检测黄喉拟水龟受脂多糖(LPS)、多肌胞苷酸[Poly(I∶C)]和肺炎克雷伯氏菌刺激后,MmISG15基因的表达变化,以PBS为对照。【结果】MmISG15基因cDNA序列全长1274 bp,5'端非编码区(5'-UTR)与3'端非编码区(3'-UTR)分别为126和650 bp,开放阅读框(ORF)为498 bp,编码165个氨基酸残基,蛋白分子量为15.3kD,理论等电点(pI)为7.70。MmISG15蛋白N端存在2个泛素样结构域(UBD),C端含有1段高度保守的LRLRGG基序。MmISG15氨基酸序列与其他爬行动物ISG15氨基酸序列相似性为55.57%~95.54%,与鱼类和哺乳动物的相似性分别为34.09%~49.02%及38.64%~48.25%。系统发育进化树显示,MmISG15和其他爬行动物ISG15聚为一支,其中与乌龟(Mauremys reevesii)亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测结果表明,MmISG15基因在健康黄喉拟水龟8种组织中均有表达,在脾脏组织中相对表达量最高,其次是肝脏,在前肠、后肠、肾脏、肺和肌肉组织中的相对表达量较低,而在脑组织中的相对表达量最低;LPS刺激后黄喉拟水龟脾脏和肝脏组织中MmISG15基因相对表达量与对照无显著差异(P>0.05);Poly(I∶C)刺激后6 h脾脏和肝脏组织中MmISG15基因相对表达量极显著上调(P<0.01,下同)并在刺激后12 h达最大值;肺炎克雷伯氏菌刺激后12 h脾脏和肝脏组织中MmISG15基因相对表达量极显著上调并在刺激后48 h达最大值。【结论】MmISG15属于典型泛素样蛋白,MmISG15基因主要在黄喉拟水龟脾脏和肝脏组织中表达。Poly(I∶C)和肺炎克雷伯氏菌刺激能提高脾脏和肝脏中MmISG15基因的相对表达量,推测MmISG15基因参与黄喉拟水龟抵抗病毒和细菌侵袭的免疫反应,其编码蛋白发挥重要免疫功能。

基于线粒体ND4基因和核c-mos基因初步探讨广西拟水龟和艾氏拟水龟的系统发生

广西拟水龟和艾氏拟水龟的分类和系统发生多年来存在争议。通过测定广西拟水龟、艾氏拟水龟和黄喉拟水龟线粒体ND4基因和核c-mos基因部分序列,合并GenBank中拟水龟属其他物种的ND4基因和c-mos基因部分序列进行分析,从分子水平探讨广西拟水龟和艾氏拟水龟的系统发生。ND4基因数据分析发现NJ、MP和BI树中广西拟水龟与安南拟水龟的聚类分支相互交织聚为一支,二者种内遗传距离均为0.002～0.017,种间遗传距离为0.000～0.035,种间遗传距离明显小于同属内其他种间0.056～0.109的遗传距离,表明广西拟水龟与安南拟水龟可能为同一物种,可能是安南拟水龟的同种异名,或是作为安南拟水龟的一个亚种;NJ树、MP树和BI树均显示,艾氏拟水龟与黄喉拟水龟的位置和关系最为相近,二者间的遗传距离为0.020～0.035,明显小于拟水龟属其他物种间遗传距离,而明显大于同属各物种内遗传距离,艾氏拟水龟与黄喉拟水龟之间系统分类关系是介于种内与种间之间;乌龟、中华花龟、安南拟水龟等物种都是与拟水龟属中其他物种先聚成一支后再与同科的地龟属的地龟形成姐妹支,支持将乌龟属、花龟属和安南龟属并入拟水龟属的分类。c-mos基因数据分析发现,拟水龟属各物种间不存在明显的遗传距离,NJ树和MP树也未能对属中各物种的分子系统发生位置进行有效的界定,但在属及属以上阶元的分子分类系统中c-mos基因可以作为分类依据,并与线粒体基因数据有较好的一致性。

黄喉拟水龟、三线闭壳龟、鳄龟的生长比较研究

本文对黄喉拟水龟、三线闭壳龟、鳄龟周年生长进行了研究与比较。在广州自然温度下 ,人工饲养黄喉拟水龟 343d ,平均体重由 10 .3g增到 71.9g ,生长率为 4 .37mg·g-1·d-1;三线闭壳龟 343d ,由 15 .6g增到 6 8.2g ,生长率为 3.6 8mg·g-1·d-1;鳄龟 36 3d ,由 10 .8g增到 2 6 3.1g ,生长率为 5 .0 8mg·g-1·d-1。即在生长速度上 ,鳄龟 >黄喉拟水龟 >三线闭壳龟。在周年生长中 ,三种龟体重、背甲长、背甲宽与日龄 ;背甲长与宽 ;背甲长、宽与体重 ;均有着显著的正相关关系。温度与龟的生长有密切关系 ,低温抑制龟的生长 ,其影响程度依次为黄喉拟水龟 >三线闭壳龟 >鳄龟。同等条件下 ,三种龟个体间生长有差异 ,差异大小为鳄龟 >黄喉拟水龟 >三线闭壳龟。饵料转化效果 ,鳄龟 >黄喉拟水龟 >三线闭壳龟。日粮需求 ,三线闭壳龟 >黄喉拟水龟 >

黄喉拟水龟的繁殖生物学研究

1998年 4— 1 1月对黄喉拟水龟的繁殖生物学进行了研究。在广东 ,黄喉拟水龟的产卵高峰期在 5— 6月 ,窝卵量 1— 7枚 ,平均 2 5枚 ;卵重平均 1 3 95g ;长径平均 4 3 4cm ;短径平均 2 2 3cm。卵重与卵长径呈正相关关系。在 2 5— 3 2℃、沙床含水量 5— 1 0 %孵化条件下 ,孵化时间平均 73 8d ,孵化率 84 2 %。初生稚龟均重 9 75g。背甲长平均 3 77cm ;背甲宽平均2 91cm。稚龟体重与背甲长、宽呈极显著的正相关关系。稚龟经 8— 1 1月 3个月生长 ,平均日增重 0 1 49g。稚龟体重、背甲长、宽与日龄呈极显著的正相关关系 ,稚龟体重与背甲长宽也呈极显著的正相关关系。

黄喉拟水龟(♀)与三线闭壳龟(♂)杂交后代的形态特征及其与父母本的比较研究

本研究通过黄喉拟水龟Mauremys mutica(♀)与三线闭壳龟Cuora trifasciata(♂)进行杂交,成功获得了杂种龟。这说明黄喉拟水龟和三线闭壳龟是可以进行属间远缘杂交的,但杂交组合的受精率及孵化成功率均低于黄喉拟水龟的同种组合。杂种稚龟与黄喉拟水龟稚龟在背甲纹路、腹甲黑斑、四肢和尾腹面的皮肤颜色、喉盾前端形状及起点位置、喉盾宽/喉盾缝长、喉盾缝长/肱盾缝长、股盾缝长/肛盾缝长存在差异。1龄前,杂种龟生长快于黄喉拟水龟。形态特征上,杂种龟头顶部淡棕黄色,头侧眼后有两条黑色纵纹,颈腹部淡黄色;背甲棕色,腹甲浅黄色,每一盾片中间都有边缘呈放射状的黑斑;四肢、尾腹面及裸露皮肤部分为黄褐色。形态可量数据分析显示杂种龟在形态上接近黄喉拟水龟。建立了三种龟的形态判别公式,判别的准确率为100%(p<0.01),判别分析中贡献最大的4个变量分别是腹甲后半部长/背甲长、喉盾宽/背甲长、肱盾缝长/背甲长、股盾缝长/背甲长,可见三线闭壳龟、黄喉拟水龟与杂交种腹部的腹甲后半部长、喉盾宽、肱盾缝长、股盾缝长等参数可作为鉴别三者的直接依据。本实验的结果对杂种龟的鉴定、龟类的杂交育种及养殖生产实践都有一定的借鉴作用。

温度对黄喉拟水龟性别决定的影响

研究了不同孵育温度对黄喉拟水龟(MauremysmuticaCantor)性别决定的影响,同时分析了孵育温度对胚胎发育及成活率的影响。实验设置的3个孵化温度为(25±0.5)℃,(29±0.5)℃和(33±0.5)℃。每一温度指标下设置40枚受精卵。在实验温度内,胚胎的发育速度随着孵化温度的升高而加快,所用的孵育时间也越来越短。孵化累积温度CTUs在25℃时最高,在29℃时最低,而33℃时则居中,在25℃和29℃时,孵化成活率较高,均达到97.5%。在33℃时孵化成活率只有67.5%,而在孵出的稚龟中亦有一定数量的畸形龟,累积孵化温度也高于29℃时的CTUs,说明33℃的孵育温度对胚胎发育有不利影响,预示33℃已临近其胚胎发育的存活阈(Survivalthreshold)。在25℃时,雄性子代占优势,雌性率为23.7%;在33℃时,雌性子代占绝对优势,雌性率为94.7%;在29℃时,性比达到平衡,雌性率为50%。经X2检验,在25℃及33℃时的性比与依赖概率估计的性比(1∶1)有极显著的差异(p<0.005),这种显著的偏离说明黄喉拟水龟的性别决定属于TSD机制,而且可能属于其中的TSDⅠ型,即高温产生雌性子代,低温产生雄性子代。而29℃可能是黄喉拟水龟性别决定的临界温度。

黄喉拟水龟雌、雄生长及形态差异

人工饲养新孵出黄喉拟水龟(MauremysmuticCantor)龟苗,试验期为44个月。观察与测量结果表明,雌、雄性别在背甲长、背甲宽、体高的形态参数及其与体重的相关关系上没有明显差异;雌、雄性别形态的区别在于第二性征的出现,即雌性腹甲平坦,尾巴短小,泄殖孔近尾基部;雄性腹甲内凹,尾巴粗壮,泄殖孔远离尾基部。雌、雄生长存在明显差异,雄性生长快于雌性。在试验期间,雄性个体增重为雌性个体的1.253倍。

人工饲养对黄喉拟水龟繁殖力的影响

在自然温度、人工环境及人工饲养条件下 ,黄喉拟水龟可以自然产卵 ,产卵高峰期在 5～ 6月份。产卵时间有逐年集中并前移的趋势。饲养 2年半中 ,产卵次数、产卵量及受精率逐年提高 ,产卵量增长了134 % ,受精率提高了 7.8% ,产卵次数增加了 99%。产卵高峰期、受精率高峰期与日粮需求高峰期时间一致。环境的适应及饲料的质和量是决定繁殖力高低的主要因子。

黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及药敏试验

黄喉拟水龟(Mauremys mutica),俗称石龟、石金钱龟、黄板龟等,为龟科拟水龟属,主要分布于中国江苏、安徽、福建以及越南、日本等。黄喉拟水龟具有食用、药用和观赏价值,近年来野生资源日趋减少,人工养殖发展迅速。细菌性病原感染是黄喉拟水龟养殖过程中常见疾病,目前已报道黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)[1]、松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)[2]、摩氏摩根菌(Morganella morganii)[3]。

黄喉拟水龟细胞核DNA含量的分析

以黄喉拟水龟 (Mauremysmutica)的红血细胞为材料 ,以鸡红血细胞为DNA标准 ( 2 5pg/2c) ,采用流式细胞仪测定了黄喉拟水龟及其两个种群的细胞核基因组DNA含量。黄喉拟水龟的细胞基因组DNA含量为 5 16± 0 2 9pg/2c (n =6 0 ) ;南方种群的细胞核DNA含量为 5 19± 0 30pg/2c (n =30 ) ,北方种群为 5 14±0 30pg/2c (n =30 ) ,两个种群的核DNA含量无显著差异 (t=0 6 84 7,df =5 8,P >0 0 5 )。

基于微卫星多重PCR技术的黄喉拟水龟亲子鉴定

利用黄喉拟水龟(Mauremys mutica)微卫星标记,筛选出16对微卫星引物,通过优化各引物比例、荧光接头浓度、退火温度和循环次数,建立了基于2组各含8个微卫星位点多重PCR体系的黄喉拟水龟亲子鉴定技术。应用2组微卫星多重PCR体系,通过ABI3130遗传分析仪以及cervus3.0软件对428只黄喉拟水龟进行了个体基因型检测和遗传多样性分析,结果显示,群体的平均等位基因数为14.190,平均多态信息含量为0.748,平均观测杂合度和期望杂合度分别为0.687、0.771。对89只候选母本及296只子代进行亲子鉴定分析,结果显示:在父本信息未知时,母本鉴定率为87%;母本获得的子代个数范围为1—12,个体间表现出巨大的差异,这为选择育种提供了物质基础。黄喉拟水龟多重PCR亲子鉴定技术的建立为群体遗传多样性分析、家系鉴定管理和选择育种提供了有效的技术手段。

黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及系统发育分析

从广西某黄喉拟水龟（Mauremys muticaCantor）养殖场发病的黄喉拟水龟的肝、肺分离到一致病性的菌株（HX081027）,经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化进行分析,试验结果与报道的摩氏摩根菌一致,表现为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,葡萄糖产酸产气,接触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氨酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,氧化酶、脂酶、DNA酶和赖氨酸脱羧酶阴性,甲基红阳性,VP反应阴性,MR阳性等特征。采用扩增细菌16S rDNA的通用引物对该菌的16S rDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1506bp的核苷酸序列（GenBank登录号为FJ858185）。以该菌16S rDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列进行同源性比对分析和构建系统发育树,结果显示分离菌HX081027与摩氏摩根菌属内相关菌株的同源性在98.8%~99.6%,且在系统发育树上与来源于鱼类的M.morganiiJCM1672聚为一支,结合形态及生理生化特点将其确定为摩氏摩根菌（Morganella morganii）。

黄喉拟水龟胚胎发育的观察

在恒温(29±0.5)℃,相对湿度为80%—93%,沙盘含水量5%—10%的孵化条件下,观察研究了黄喉拟水龟胚胎的发育过程。黄喉拟水龟胚胎孵化周期为67d,根据胚胎日龄、大小及形态特征变化将整个胚胎发育过程划分为22期,其中1—7期以卵黄囊血管区、体节数目、心脏形态变化为主要分期依据;8—22期主要以四肢、背甲、腹甲变化为分期依据。同时在胚胎生长发育过程中对头宽、眼径、背甲长和背甲宽等器官生长数据进行了测量统计,发现头宽、眼径、背甲长、背甲宽与日龄呈显著正相关关系。在胚胎发育过程中观察卵壳外观变化,通过对照各期的胚胎发育状况与卵壳外观变化发现,第1期胚胎时,卵壳中部开始出现白色受精斑;第5—7期时,受精斑绕卵短径一周成环状;第20—21期时受精斑在卵长径的增长停止。

黄喉拟水龟致病菌——松鼠葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

从患病的黄喉拟水龟Mauremys mutica肝、肾中分离得到一株革兰氏阳性菌株，经人工感染试验证实，该菌为致病菌。对该菌的生理生化指标进行了分析，结果表明：该菌具有氧化酶、触酶、葡萄糖呈阳性，凝固酶、鸟氨酸脱羧酶、密二糖呈阴性，M—R为阳性，VP反应为阴性等特征，与报道的松鼠葡萄球菌特征一致。采用BIOLOG自动微生物鉴定系统对该菌进行鉴定，将适当浊度的细菌悬液接种GP2板条培养16—24h后读出结果，并将结果输入计算机，经Biolog Microlog24．2软件分析鉴定，结果显示为松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri，可能性为99％，相似性和位距分别为0．913和1．30。结合形态和生理生化特点，将其鉴定为松鼠葡萄球菌。纸片扩散法药敏试验结果表明，该菌仅对头孢拉定和阿米卡星敏感，对头孢哌酮中度敏感，对其他抗生素均存在不同程度的耐药性。

湿度对黄喉拟水龟胚胎发育与新生幼体特征的影响

黄喉拟水龟(Mauremys mutica Cantor)为东亚常见的淡水水生龟类之一,主要分布于中国、日本和越南。在中国,黄喉拟水龟已成为潜在的水产养殖品种,研究了湿度对黄喉拟水龟胚胎发育和新生幼体的影响。恒温29℃时,用未受精卵做对比,在-12、-150kPa和-300kPa3种孵化湿度下,观察并记录了黄喉拟水龟胚胎发育过程中卵重的变化、孵化周期、孵化成功率、卵壳龟裂率、卵壳受精斑变化规律及新生幼体的特征。在-12kPa和-150kPa处理组,受精卵在孵化中期开始持续增重;而在-300kPa处理组,受精卵在孵化中期开始持续减轻;孵化湿度显著影响卵壳受精斑的变化,-12kPa处理组的受精斑绕卵短径合拢的时间显著长于-150kPa和-300kPa处理组;受精卵的卵壳龟裂率随着孵化湿度的增加而增加;湿度显著影响新生幼体体重和背甲宽,但对体高、背甲长、腹甲长、腹甲宽以及尾长无明显影响;孵化湿度对孵化周期及新生幼体的运动能力影响不明显。

孵化温度对黄喉拟水龟胚胎发育和幼体特征的影响

用3个恒定温度(24、26和28℃)孵化黄喉拟水龟南方种群卵,检测孵化温度对孵化期、孵化成功率和孵出幼体特征的影响。孵化温度显著影响孵化期和孵化成功率、以及幼体的性别、大小和早期生长。黄喉拟水龟幼体的性别取决于孵化温度(属TSDⅠa型),26℃和28℃孵出幼体偏雄性,30℃孵出幼体都是雌性。随着孵化温度的升高,孵化期呈非线性缩短,而孵化成功率略微增加。较高温度下孵出的幼体较大且具有较好的功能表现,但生长较慢。低温孵出幼体较小,但胚后生长速率较快。低温孵出幼体较小可能与胚胎发育期长、总代谢消耗大有关;而生长速率快则可能是因为低温产生的雄性幼体生长快于高温产生的雌性幼体。与已报道的黄喉拟水龟北方种群卵孵化结果相比较,26℃和28℃条件下南方种群卵的孵化期和产生1∶1性比的关键温度较大。这种地理上的变异可能反映不同种群对当地热环境适应性上的差异。

三种孵化介质对黄喉拟水龟卵孵化期、孵化成功率和孵出幼体特征的影响

自然温度下,分别以泥土、沙子和蛭石为孵化介质,研究了三种孵化介质对黄喉拟水龟(Mauremysmutica Cantor)卵的孵化期、孵化成功率和孵出幼体特征的影响。用泥土、沙子和蛭石作为孵化介质时,孵化期依次缩短,平均孵化期分别为61.2 d、60.9 d、59.4 d,差异显著(P<0.05);孵化期间,卵壳外层出现龟裂现象的卵所占比率分别为0、12.5%、40%;孵化成功率分别为40%、75%、90%。三种孵化介质条件下孵出的幼体的平均体重、体高、尾长和运动能力均无显著差异,而平均背甲长、背甲宽和平均腹甲长、腹甲宽差异显著,其中以蛭石作为孵化介质时孵出的幼体的腹甲宽和背甲宽最大,且运动能力较好。试验结果表明,三种孵化介质中蛭石的孵化效果最好,蛭石作为孵化介质时黄喉拟水龟卵的平均孵化期最短、孵化率最高,且孵出幼体的个体相对较大,并具有较强的运动能力。

黄喉拟水龟体表溃疡病原菌SG_(24)的分类鉴定

从患溃疡的黄喉拟水龟病灶中分离到一株病原菌SG24。对菌株SG24进行了常规生理生化测定和ATBExpression半自动细菌鉴定仪鉴定,并测定16S rRNA序列,分析其与相关细菌相应序列的同源性,构建了系统进化树。普通细菌学方法结果显示菌株SG24为黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)。以沙雷氏菌属的16S rRNA基因序列设计一对引物进行PCR扩增,获得了菌株SG24大小约950 bp的16S rRNA部分基因片段,测序结果显示菌株SG24与黏质沙雷氏菌同类,与已登录的黏质沙雷氏菌(S.marcescensDQ207558)的16S rRNA同源性大于99%。综合以上分类鉴定结果,确定菌株SG24属于沙雷氏菌属的黏质沙雷氏菌。药物敏感试验结果表明:菌株SG24对链霉素、庆大霉素、壮观霉素、强力霉素、卡那霉素、阿米卡星、诺氟沙星、氧氟沙星和复方新诺明敏感。

黄喉拟水龟母体大小对繁殖性能的影响

对黄喉拟水龟Mauremys mutica同一种群中3种规格(小型个体783.0 g±55.2 g、中型个体991.3 g±62.3 g和大型个体1248.5 g±122.9 g)母体的繁殖性能进行了研究。结果表明:在繁殖季节,不同规格母体的月产卵量差异较明显,其中小型母体在产卵期首月和末月产卵量所占比例相对较高;3种规格母体的平均产卵量、受精率和孵化率与母体的大小呈正相关,平均窝数与母体大小则呈负相关;窝卵数、卵重、卵宽也与母体规格呈正相关,其中窝卵数的差异极显著(P<0.001)。在代表卵形状的卵长径与短径比值中,小规格母体产的卵略长,但差异不显著;大规格母体产的稚龟则显著大于小规格母体产的稚龟(P<0.05)。本研究结果表明,以大规格母体作为繁殖亲本,可以获得更多的后代。