以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<...以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<3 k Da)。以体外血管紧张素转移酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,评价其活性。结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4%,A的ACE抑制率最低,为34.6%。为了进一步评价组分C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10 h)与长期(28 d)降血压功效,结果显示:灌胃3种剂量组分C对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著。为了确定C组分降血压肽的结构,采用凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合对其进行了分离纯化,获得了2个较纯的组分,经电喷雾质谱鉴定,一种为Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,另一种为Pro-Ala-Leu,它们的IC50分别为22.9μmol/L和12.2μmol/L。展开更多
为了从远东拟沙丁鱼肉酶解物中制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)抑制肽并研究其降尿酸活性,该研究以远东拟沙丁鱼肉为原料,XO抑制率为考察指标,采用碱性蛋白酶水解远东拟沙丁鱼肉,产生的酶解物通过超滤与凝胶色谱、反相高效液相色...为了从远东拟沙丁鱼肉酶解物中制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)抑制肽并研究其降尿酸活性,该研究以远东拟沙丁鱼肉为原料,XO抑制率为考察指标,采用碱性蛋白酶水解远东拟沙丁鱼肉,产生的酶解物通过超滤与凝胶色谱、反相高效液相色谱(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离纯化,从中分离出2个XO抑制肽,它们的氨基酸序列采用超高效液相四级杆飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography quadrupole time of flight tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定为苯丙氨酸-亮氨酸-精氨酸(Phe-Leu-Arg,FLR)与精氨酸-脯氨酸-赖氨酸(Arg-Pro-Lys,RPK)。采用腺苷及XO联合诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)构建高尿酸细胞模型,对2个肽的降尿酸功效进行评价,结果显示FLR、RPK具有显著降尿酸作用。展开更多
文摘以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<3 k Da)。以体外血管紧张素转移酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,评价其活性。结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4%,A的ACE抑制率最低,为34.6%。为了进一步评价组分C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10 h)与长期(28 d)降血压功效,结果显示:灌胃3种剂量组分C对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著。为了确定C组分降血压肽的结构,采用凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合对其进行了分离纯化,获得了2个较纯的组分,经电喷雾质谱鉴定,一种为Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,另一种为Pro-Ala-Leu,它们的IC50分别为22.9μmol/L和12.2μmol/L。
文摘为了从远东拟沙丁鱼肉酶解物中制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)抑制肽并研究其降尿酸活性,该研究以远东拟沙丁鱼肉为原料,XO抑制率为考察指标,采用碱性蛋白酶水解远东拟沙丁鱼肉,产生的酶解物通过超滤与凝胶色谱、反相高效液相色谱(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离纯化,从中分离出2个XO抑制肽,它们的氨基酸序列采用超高效液相四级杆飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography quadrupole time of flight tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定为苯丙氨酸-亮氨酸-精氨酸(Phe-Leu-Arg,FLR)与精氨酸-脯氨酸-赖氨酸(Arg-Pro-Lys,RPK)。采用腺苷及XO联合诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)构建高尿酸细胞模型,对2个肽的降尿酸功效进行评价,结果显示FLR、RPK具有显著降尿酸作用。