拟黑虫草菌cnig-56固体发酵生产虫草素工艺

以虫草素含量为指标,采用正交实验优化了适合拟黑虫草(Cordyceps nigrella)菌株cnig-56固体发酵的培养基,并探讨了该菌株固体发酵的最佳条件。结果表明,菌龄为3d的拟黑虫草菌种按10%接种量接入优化的固体培养基上(配方为大米粉9.9%,青稞粉6.6%,玉米粉9.9%,蚕蛹粉3.3%,粗麸皮70.15%,KH2PO40.05%,MgSO40.1%)于24℃发酵培养30d,其产物的虫草素含量最高为101μg/g。

拟黑虫草子实体的人工培育研究

用从野外采集的拟黑虫草鲜品上分离出的菌株为供试材料,并在不同培养基、培养辅料、不同温度和不同pH值等条件下对菌株进行探索实验,掌握了拟黑虫草菌株的人工培养最佳条件。实验结果为今后利用拟黑虫草的优质菌株进行人工培养和筛选高产栽培技术提供了重要的参考依据。

陕西省野生拟黑虫草的多基因分子生物学鉴定

虫草是中国重要的生物资源,为明确从陕西省旬邑县石门山林区采集到的1种野生虫草种类及其虫生真菌(虫草菌DY6F)的分类地位,研究在利用PCR技术对该虫草子实体的核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、延伸因子1α(elongation factor 1α,EF-1α)和RNA聚合酶Ⅱ大亚基(RNA polymeraseⅡlarge subunit,RPB1)的基因片段进行扩增与测序的基础上,分别基于这3个基因片段构建单基因系统进化树,并基于EF-1α和RPB12个基因联合序列构建多基因系统进化树。结果显示,该虫草子实体的这些基因序列与线虫草属拟黑虫草菌(Ophiocordyceps nigrella)的相应基因序列相似度为99%~100%,且在进化树上,二者聚于同一分支,支持率均为100%。因此,虫草菌DY6F被鉴定为拟黑虫草菌,该虫草为拟黑虫草。

双水相萃取法提取虫草发酵液中甘露醇的研究

探索采用正丙醇/(NH4)2SO4双水相系统从拟黑虫草发酵液中提取甘露醇的方法。实验研究了正丙醇、(NH4)2SO4、溶液浓度和pH值对甘露醇分配系数、萃取率的影响,确定提取甘露醇的最佳条件,即正丙醇溶液浓度为20%、(NH4)2SO4溶液浓度为25%、pH7.4时分配系数为0.028,甘露醇萃取率最高为73.79%。