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持家基因作为相对定量内标物的稳定性比较 被引量:25
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作者 朱芷葳 董常生 《生物技术通讯》 CAS 2006年第5期807-809,共3页
定量PCR是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术,定量检测时常用编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶、β-肌动蛋白、28S和18SrRNA等的持家基因作为内部参照,这些基因被认为在某些类型细胞中的表达是恒定的。近年来,很多研究者发现上述持家... 定量PCR是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术,定量检测时常用编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶、β-肌动蛋白、28S和18SrRNA等的持家基因作为内部参照,这些基因被认为在某些类型细胞中的表达是恒定的。近年来,很多研究者发现上述持家基因的表达水平并不稳定,利用它们作为内标来定量并不准确。因此,在进行定量实验时应选择适当的2种或2种以上的内参基因,以减少检测标本间的差异。 展开更多
关键词 实时荧光定量反转录PCR 持家基因 定量检测
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高通量测序时代下持家基因定义的发展 被引量:2
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作者 魏凯 马磊 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期127-134,共8页
持家基因一般指在所有细胞中均稳定表达的一类组成型基因,其产物是维持细胞基本生命活动所必需的。持家基因的定义及其发展,反映了其本质和时代特征。本文从基因表达水平量化技术的角度,结合作者利用转录组数据对猪持家基因的分析,讨论... 持家基因一般指在所有细胞中均稳定表达的一类组成型基因,其产物是维持细胞基本生命活动所必需的。持家基因的定义及其发展,反映了其本质和时代特征。本文从基因表达水平量化技术的角度,结合作者利用转录组数据对猪持家基因的分析,讨论了持家基因的定义及其发展,尤其是技术的进步及数据量的剧增对持家基因的定义所引发的问题。本文总结发现,应该在研究技术的进步中,动态地认识持家基因定义所具有的层次性,从而对持家基因的定义不断赋予新的时代特征。 展开更多
关键词 持家基因 转录组测序 基因表达
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基于傅立叶分析的持家基因预测模型
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作者 马知行 赵琦 张浩 《吉林大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1639-1643,共5页
将一组Hela细胞的时序数据通过傅立叶分析变换为傅立叶谱,并设计了基于支持向量机的有监督学习算法,该算法通过提取傅立叶谱中的显著特征鉴定持家基因和非持家基因。本文所提出的方法通过比较两套独立的组织表达谱成功预测了510个人类... 将一组Hela细胞的时序数据通过傅立叶分析变换为傅立叶谱,并设计了基于支持向量机的有监督学习算法,该算法通过提取傅立叶谱中的显著特征鉴定持家基因和非持家基因。本文所提出的方法通过比较两套独立的组织表达谱成功预测了510个人类持家基因,其中包括93个非编码持家基因。分析结果表明:本文方法所预测的持家基因相比其他3种方法更为高效、准确。 展开更多
关键词 计算机应用 持家基因 支持向量机 预测模型
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粪肠、屎肠球菌及相近种部分持家基因的系统发育分析 被引量:3
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作者 张文羿 吕嫱 +4 位作者 徐海燕 宋宇琴 孙志宏 张和平 孙天松 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期297-303,共7页
【目的】利用16S rRNA、clpX和recA基因分子标记研究Enterococcus faecalis、Enterococcus faecium及相近种间的种系发育关系,并比较这些基因序列对E.faecalis、E.faecium及相近种的区分能力。【方法】以分离自传统乳制品中的9株E.faec... 【目的】利用16S rRNA、clpX和recA基因分子标记研究Enterococcus faecalis、Enterococcus faecium及相近种间的种系发育关系,并比较这些基因序列对E.faecalis、E.faecium及相近种的区分能力。【方法】以分离自传统乳制品中的9株E.faecium和1株E.durans分离株为研究对象,以clpX和recA基因片段为标记,通过PCR扩增、测序,结合已公布的近缘种相应序列构建系统发育树并与16S rRNA基因进行比较。【结果】在基于clpX和recA基因的进化树中,10株试验菌株与E.faecalis始终处于同一分支。与该物种这两个基因的平均相似性为99.6%和98.6%,与另一分支的Faecium-group(E.durans和E.faecium)的平均相似性仅为61.5%和33.5%。相近种E.durans和E.hirae间这两个基因的差异性为20.3%和39.0%;在基于16S rRNA基因的进化树中,试验菌株与Faecium-group(E.lactis、E.faecium、E.durans、E.hirae)处于同一分支。与这些成员间该基因的相似性大于99.6%,与E.faecalis基因的平均相似性可达98.4%。相近种间该基因相似性无明显差异。【结论】按照10株试验菌株clpX和recA基因的分析结果可将由传统生理生化和16S rRNA基因序列鉴定的9株E.faecium和1株E.durans归类为E.faecalis,clpX和recA基因可用于部分相近种的分类鉴定。 展开更多
关键词 粪肠球菌 屎肠球菌 系统发育分析 16S RRNA基因 持家基因
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柠檬明串珠菌及相近种部分持家基因的系统发育分析 被引量:2
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作者 吕嫱 陈明 +4 位作者 徐海燕 宋宇琴 孙志宏 丹彤 孙天松 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期669-676,共8页
【目的】利用16S rRNA、dnaA、murC和pyrG基因分子标记研究Leuconostoc citreum(Leu.citreum)及相近种间的种系发育关系,并比较这些基因序列对Leu.citreum及相近种的区分能力。【方法】以分离自酸面团中的7株Leu.citreum为研究对象,以d... 【目的】利用16S rRNA、dnaA、murC和pyrG基因分子标记研究Leuconostoc citreum(Leu.citreum)及相近种间的种系发育关系,并比较这些基因序列对Leu.citreum及相近种的区分能力。【方法】以分离自酸面团中的7株Leu.citreum为研究对象,以dnaA、murC和pyrG基因片段为标记,通过PCR扩增、测序,结合已公布的近缘种及亚种相应序列,计算遗传距离,构建系统发育树,并与16S rRNA基因进行比较。【结果】研究发现Leu.citreum及相近种间的dnaA、murC和pyrG基因构建的系统发育树拓扑结构与16S rRNA基因基本一致,区别在于相似性的不同,其分别为75.5%-97.2%、50.2%-99.7%、65.0%-99.8%和98.5%-100%。【结论】在Leu.citreum及相近种间的种系发育关系中,dnaA、murC和pyrG基因与16S rRNA基因系统进化关系都具有很好的一致性,但这三个持家基因的遗传距离显著高于16S rRNA基因。因此,采用dnaA、murC和pyrG基因可以用于Leu.citreum及相近种的分类鉴定。 展开更多
关键词 柠檬明串珠菌 系统发育分析 16SRRNA基因 持家基因
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恶疫霉实时定量RT-PCR分析中内参基因的选择 被引量:4
6
作者 陈孝仁 张博月 +2 位作者 邢玉平 童蕴慧 徐敬友 《中国农学通报》 CSCD 2012年第30期201-207,共7页
为选择合适的内参基因用于分析植物病原卵菌恶疫霉(Phytophthora cactorum)的基因表达情况,本研究利用实时定量RT-PCR分析持家基因Ubc、Tub-b、WS21和WS41在恶疫霉生长发育阶段和侵染草莓阶段的表达差异,并利用软件geNorm、NormFinder和... 为选择合适的内参基因用于分析植物病原卵菌恶疫霉(Phytophthora cactorum)的基因表达情况,本研究利用实时定量RT-PCR分析持家基因Ubc、Tub-b、WS21和WS41在恶疫霉生长发育阶段和侵染草莓阶段的表达差异,并利用软件geNorm、NormFinder和BestKeeper比较其表达稳定性。结果表明:基于公共数据库序列和其他疫霉菌同源序列设计的持家基因引物在恶疫霉中具有良好的扩增效率、反应有效性和特异性。通过分析,发现在恶疫霉的不同生长发育阶段(菌丝生长、游动孢子囊、游动孢子和休止孢萌发)和侵染草莓阶段(接种后3、5、7天),表现最为稳定的是Ubc基因。当使用多个内参基因时,Ubc和WS41是最适合校正恶疫霉基因表达数据的内参基因组合。本研究结果为利用实时定量RT-PCR准确分析恶疫霉基因相对表达量提供了重要的内参基因,也为其他疫霉菌的基因表达研究提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 内参基因 持家基因 恶疫霉 实时定量RT-PCR 草莓
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落叶松实时定量PCR内参基因的筛选 被引量:1
7
作者 吴涛 李万峰 +3 位作者 张俊红 韩素英 杨文华 齐力旺 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2013年第F10期1-8,共8页
本研究针对日本落叶松(Larixkaempferi(Lamb.)Carr.)体细胞胚胎发育过程中原胚团时期到胚胎成熟时期、种子萌发过程、植株幼年生长阶段和成年生长阶段等生长发育过程中的31份材料,应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分析了12个... 本研究针对日本落叶松(Larixkaempferi(Lamb.)Carr.)体细胞胚胎发育过程中原胚团时期到胚胎成熟时期、种子萌发过程、植株幼年生长阶段和成年生长阶段等生长发育过程中的31份材料,应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分析了12个持家基因(ACT4、APm、Chc、Gapc、RPu、RPL2、EFl、EF2、elF、E3UL、UBQ和UPL2)在这3l份材料中的表达情况。经geNorm和NormFinder两种分析软件对这12个持家基因进行表达稳定性分析,结果表明:APm在不同器官、体细胞胚胎发育和种子萌发过程中表达均最为稳定;EFJ在不同生长年龄植株的顶梢中表达最为稳定;e伊在不同年龄植株的针叶中表达最为稳定。分析结果表明,针对不同的研究材料和发育阶段应选择适合的持家基因做内参基因使用。进行基因表达细微差异研究时,可根据需要使用2个或2个以上内参组合。 展开更多
关键词 落叶松 持家基因 qPCR 基因表达 稳定性
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不同发育时期鸡下丘脑和卵巢组织中内参基因表达稳定性分析 被引量:3
8
作者 袁振杰 陈秋月 +3 位作者 姜运良 唐辉 李显耀 康丽 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 2017年第6期801-806,共6页
本文对常作为内参基因的3种常用持家基因在鸡不同发育时期下丘脑和卵巢中的表达稳定性进行分析,为鸡性腺轴上相关功能基因定量检测时内参基因的选择提供科学依据。以性发育不同阶段的济宁百日鸡为实验材料,利用实时荧光定量PCR技术检测... 本文对常作为内参基因的3种常用持家基因在鸡不同发育时期下丘脑和卵巢中的表达稳定性进行分析,为鸡性腺轴上相关功能基因定量检测时内参基因的选择提供科学依据。以性发育不同阶段的济宁百日鸡为实验材料,利用实时荧光定量PCR技术检测常用持家基因beta-肌动蛋白基因(β-actin)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和18S核糖体RNA基因(18S r RNA)在下丘脑和卵巢组织中的表达,并利用ge Norm、Norm Finder和Bestkeeper软件比较其表达稳定性。结果表明:在性发育不同阶段的济宁百日鸡下丘脑中,表达最为稳定的是GAPDH基因,而在卵巢中表现最为稳定的是β-actin基因。此结果为利用实时荧光定量PCR准确分析鸡性腺轴上基因相对表达的研究提供参考。 展开更多
关键词 持家基因 实时荧光定量PCR 卵巢 下丘脑
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V-ATPase基因家族调控SREBPs入核及功能的作用机制
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作者 张泽渊 邱璐 +9 位作者 何成诗 张荷兰 李妍 王丽 张富刚 谢忠祥 尹书 赵有亮 张丽华 曹鹏 《解剖学研究》 CAS 2020年第5期397-400,421,共5页
目的胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控脂类代谢的重要转录因子,其与代谢性疾病密切相关。V-ATPase作为持家基因,通过全酶的聚集和解离调节酶的活性。目前尚未有关于V-ATPase及其所在通路调控SREBP的相关报道。方法构建基因重组质粒... 目的胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控脂类代谢的重要转录因子,其与代谢性疾病密切相关。V-ATPase作为持家基因,通过全酶的聚集和解离调节酶的活性。目前尚未有关于V-ATPase及其所在通路调控SREBP的相关报道。方法构建基因重组质粒,PCR法扩增V-ATPase基因片段,并将其插入表达载体pcDNA3.1质粒,构建基因重组质粒pcDNA3.1-V-ATPase,将目的质粒pcDNA3.1-V-ATPase及对照质粒pcDNA3.1分别转染大鼠肾小球系膜细胞。采用WesternBlotting、q-PCR、荧光显微观察等方法研究V-ATPase和SREBPs的关系。结果发现V-ATPase功能缺失抑制大鼠肾小球系膜细胞脂肪积累,V-ATPase调控SREBP的功能具有保守性,V-ATPase调控SREBP-1的入核不依赖于泛素化降解,V-ATPase调控SREBP-1的核积累依赖于溶酶体的pH值。结论上述结果说明V-ATPase是新的调控SBP-1的基因。这为寻找新的调控SREBP的因子,并研究其调控脂质代谢的作用机制提供了依据。 展开更多
关键词 胆固醇调节元件结合蛋白 脂肪代谢 V-ATPase持家基因
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张国捷教授团队合作成果解释不完全谱系分流现象广泛影响灵长类物种分化过程
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《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期337-337,共1页
2023年6月2日,浙江大学生命演化研究中心张国捷教授团队与丹麦奥胡斯大学Mikkel H SCHIERUP教授团队合作在《科学》(Science)上发表了最新的研究成果论文“Pervasive incomplete lineage sorting illuminates speciation and selection ... 2023年6月2日,浙江大学生命演化研究中心张国捷教授团队与丹麦奥胡斯大学Mikkel H SCHIERUP教授团队合作在《科学》(Science)上发表了最新的研究成果论文“Pervasive incomplete lineage sorting illuminates speciation and selection in primates”(DOI:10.1126/science.abn4409)。该研究利用全基因组数据,对29个灵长类祖先节点的不完全谱系分流现象进行了分析。研究发现在灵长类所有演化节点上,灵长类基因组上有5%~64%区域发生了不完全谱系分流,说明在灵长类的演化历程中,不完全谱系分流对灵长类的物种分化过程产生了较大的影响。而有些基因组区域在多个物种分化事件中都经历不完全谱系分流,反映了这些区域受到特殊的选择压力。如与肤色和免疫相关的基因一直处于较高不完全谱系分流水平,丰富了这些基因在灵长类物种间的多样性。相反,极度保守、维持细胞最基本功能所必需的持家基因则较少经历不完全谱系分流,基本遵循物种的分化过程中在物种间形成的差异。 展开更多
关键词 生命演化 持家基因 基因组数据 物种分化 演化历程 团队合作 成果论文 多样性
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老年人肠道乳酸菌的分离与鉴定及其来源发酵乳杆菌的遗传进化分析 被引量:4
11
作者 张振东 王玉荣 +3 位作者 向凡舒 侯强川 李宝坤 郭壮 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第22期105-112,共8页
首先对湖北襄阳和恩施地区的健康老年人肠道乳酸菌进行分离与鉴定,然后从中选择发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析。结果显示,基于可培养方法,湖北襄阳与恩施地区老年人肠... 首先对湖北襄阳和恩施地区的健康老年人肠道乳酸菌进行分离与鉴定,然后从中选择发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析。结果显示,基于可培养方法,湖北襄阳与恩施地区老年人肠道乳酸菌可以鉴定为以乳杆菌属(Lactobacillus)为主的5个菌属,15个种。总的来说,发酵乳杆菌和唾液乳杆菌(L.salivarius)占老年人肠道源乳酸菌分离株总量的55%左右,表明人体肠道可以作为发酵乳杆菌的重要分离来源。基于8个持家基因的MLST分析表明,25株来源于肠道的发酵乳杆菌可以划分为25个序列型,具有极高的遗传多样性;基于选择压力分析与phi-test,选用的8个持家基因均受到纯化选择作用,且其中仅基因rpoB显著经历了基因重组事件;另外,基于Prim’s和goeBURST的进化分析表明,一半左右的肠道源发酵乳杆菌倾向于形成单独的分支,表明它们具有一定的宿主特异性,可能的原因是为适应肠道环境,这些发酵乳杆菌经历了有异于发酵食品生境的进化历程。 展开更多
关键词 老年人肠道 乳酸菌 多位点序列分型 发酵乳杆菌 持家基因
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一种植物总RNA的快速提取方法 被引量:7
12
作者 刘芬 于秀梅 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页
为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiqui... 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。 展开更多
关键词 植物 总RNA提取 持家基因 小麦 RT—PCR
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椰纤果产生菌株分离鉴定和小型菌种库的建立
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作者 刘龙祥 刘四新 +4 位作者 陈华美 余敏华 陈白羽 毕继才 李从发 《广东农业科学》 CAS 2016年第3期142-147,共6页
从海南省内外的椰纤果生产企业代表性的布点采样、分离以及交换等方式共获得145株细菌纤维素产生菌,对其中93株采用持家基因、16Sr DNA基因等序列分析结合形态特征进行鉴定,引入近缘的7株不同种的模式菌株作为参照。结果显示,这些菌株... 从海南省内外的椰纤果生产企业代表性的布点采样、分离以及交换等方式共获得145株细菌纤维素产生菌,对其中93株采用持家基因、16Sr DNA基因等序列分析结合形态特征进行鉴定,引入近缘的7株不同种的模式菌株作为参照。结果显示,这些菌株被鉴定为驹形氏杆菌属(Komagataeibacter),其中79株分别鉴定为3个已知种:K.nataicola、K.europaeus、K.hansenii,另14株为未知种。采用持家基因dna K、rpo B和gro EL对14株未知菌进行鉴定,发现它们两两序列相似度均大于种间差异的临界值99.0%、98.8%和99.2%,推测该14株菌可能为驹形氏杆菌属的同一个新种。实验室目前的细菌纤维素产生菌包含模式种在内至少有9个已知种、还有至少1个疑似新种。小型菌种库还在持续建设中,这为保护我国椰纤果生产的菌种资源、优良菌株的遗传选育、椰纤果发酵生产的技术升级以及细菌纤维素的相关理论研究等奠定了基础。 展开更多
关键词 椰纤果 细菌纤维素 菌种分离鉴定 菌种库建立 持家基因 16SrDNA序列分析
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应用单核苷酸多态性技术对食品中大肠埃希氏菌的地理溯源
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作者 赵宏 尹静 +1 位作者 曲鹏 李君文 《解放军预防医学杂志》 CAS 2012年第6期394-397,共4页
目的利用大肠埃希氏菌持家基因中高分辨力单核苷酸多态性(SNP)位点对不同地理来源食品中的大肠埃希氏菌进行地理溯源,为追溯、控制食源性感染提供技术保障。方法根据大肠埃希氏菌多位点基因序列分型(MLST)数据库中序列信息,利用SNP分析... 目的利用大肠埃希氏菌持家基因中高分辨力单核苷酸多态性(SNP)位点对不同地理来源食品中的大肠埃希氏菌进行地理溯源,为追溯、控制食源性感染提供技术保障。方法根据大肠埃希氏菌多位点基因序列分型(MLST)数据库中序列信息,利用SNP分析软件Minimum SNPs测算得到大肠埃希氏菌4个持家基因中的12个高分辨力SNP位点。利用这些位点组合对来源于12个国家或地区的食品中分离出的253株大肠埃希氏菌进行分析。结果得到了大肠埃希氏菌特异性的地理标记;盲样分析证明洲际溯源准确率为80%,国家或地区溯源准确率为60%。结论持家基因中的高分辨力SNP位点组合具有对不同地理来源大肠埃希氏菌进行追溯的能力。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌 持家基因 单核苷酸多态性 溯源 食品 分子分型
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四川白三叶根瘤菌遗传多样性及系统发育研究 被引量:7
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作者 潘明洪 凌瑶 +2 位作者 景文 马洪平 彭燕 《草业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期143-152,共10页
为阐明四川部分地区野生白三叶根瘤菌的遗传多样性及系统发育地位,对分离自四川雅安、康定、泸定、西昌、成都和乐山6个地区白三叶根瘤的69株菌进行系统研究。采用16SrDNA限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymor... 为阐明四川部分地区野生白三叶根瘤菌的遗传多样性及系统发育地位,对分离自四川雅安、康定、泸定、西昌、成都和乐山6个地区白三叶根瘤的69株菌进行系统研究。采用16SrDNA限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFLP)和16SrDNA基因、持家基因(recA、atpD、glnII)、结瘤基因(nodC)、固氮基因(nifH)系统发育分析的方法进行了研究。结果表明,16SrDNA PCR-RFLP中所有供试菌株产生了4种酶切图谱类型,表现出较为丰富的遗传多样性。持家基因与16SrDNA基因系统发育分析结果基本一致,9株代表菌株主要分布在α-变形菌纲(Alpha-Proteobacteria)的根瘤菌属(Rhizobium),并与豌豆根瘤菌三叶草生物型(R.leguminosarumbv.trifolii)ATCC 14480T的亲缘关系较近。PCR可扩增出nodC和nifH基因片段,但从属于土壤杆菌属(Agrobacterium)的菌株LS1105中则扩增不出这两个基因。所有供试菌株被鉴定到了种的水平,证实了68株为白三叶根瘤菌,并通过不同采样地点菌株之间的比较,发现白三叶与根瘤菌的共生关系因地理分布不同而具有多样性,对于丰富白三叶根瘤菌资源及其开发利用具有重要意义。 展开更多
关键词 白三叶 根瘤菌 遗传多样性 16S RDNA PCR-RFLP 持家基因 系统发育
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正阳县花生根瘤菌遗传多样性及其共生特性研究 被引量:4
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作者 张俊杰 彭姗姗 +3 位作者 余辉 李硕 杨超 尚益民 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第3期495-503,共9页
从河南省正阳县土壤中捕捉67株根瘤菌,根据IGS-RFLP结果分成9个基因内间隔区(intergenic spacer,IGS)类型,通过16S rRNA基因序列系统发育分析鉴定菌株为慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium),并依据持家基因多位点序列分析(multilocus sequence... 从河南省正阳县土壤中捕捉67株根瘤菌,根据IGS-RFLP结果分成9个基因内间隔区(intergenic spacer,IGS)类型,通过16S rRNA基因序列系统发育分析鉴定菌株为慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium),并依据持家基因多位点序列分析(multilocus sequence analysis,MLSA)结果将其分成7个簇(Clusters)。其中,Clusters 1被鉴定为广东慢生根瘤菌(B.guangdongense),Clusters 2、3、4、5和6分别被鉴定为慢生根瘤菌属的疑似新种群B.genospeciesⅡ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ。选取11个代表菌株,结瘤基因nodA序列与广东慢生根瘤菌CCBAU 51649T和广州慢生根瘤菌(B.guangzhouense)CCBAU 51670T聚为相同分支,宿主均为花生。所有代表菌株均能与花生植株共生结瘤,且叶绿素含量、地上部干质量和地下部干质量、株高度、根长度与对照相比均有显著提升,其中接种ZB30的处理组的地上部干质量是对照组的2.7倍。 展开更多
关键词 花生根瘤菌 慢生根瘤菌属 基因内间隔区 持家基因 共生基因 多位点序列分析 共生特性
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棉花纤维发育和体细胞胚发生过程中实时定量PCR内对照基因的筛选 被引量:32
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作者 涂礼莉 张献龙 +6 位作者 刘迪秋 金双侠 曹景林 朱龙付 邓锋林 谭家福 张存斌 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第20期2379-2385,共7页
实时定量PCR技术(qRT-PCR)能够快速地对多个样品进行基因表达分析,因此已成为芯片和微点阵数据验证的常用手段.为了得到更精确的数据,通常需要一个和多个内对照基因来平衡化qRT-PCR数据.目前一般选择持家基因(housekeeping gene)作为内... 实时定量PCR技术(qRT-PCR)能够快速地对多个样品进行基因表达分析,因此已成为芯片和微点阵数据验证的常用手段.为了得到更精确的数据,通常需要一个和多个内对照基因来平衡化qRT-PCR数据.目前一般选择持家基因(housekeeping gene)作为内对照,但很多持家基因的表达水平随着环境的改变而改变.在棉花纤维发育和体细胞胚发生机制研究过程中已经产生大量芯片和微点阵数据,但目前在采用实时定量PCR验证这些数据时都只用了一个持家基因来平衡化数据.为了验证其可靠性,本研究根据常用的持家基因(18S rRNA,Histone3,UBQ7,Actin,Cyclophilin,Gbpolyubiquitin-1和Gbpolyubi-quitin-2)设计了7对引物,用相对的绝对定量法验证了在棉花不同组织和不同发育阶段(21个样品)表达水平的稳定性,发现在纤维发育的后期(17 DPA(day post anthesis)以后),这些基因的表达都下调,而纤维发育后期特异表达基因AGP的表达从15DPA开始到27DPA一直都呈上升趋势.因此对于纤维系列特别是纤维发育后期基因的qRT-PCR更好的选择是相对的绝对定量.而对于非纤维系列,这些持家基因的表达水平相对纤维系列变化幅度较小,但为了得到更精确的表达数据,应该同时用Histone3,UBQ7和Gbpolyubiquitin-1一起来平衡化qRT-PCR数据. 展开更多
关键词 棉花 纤维发育 持家基因 内对照 实时定量PCR(qRT-RCR) 体细胞胚胎发生
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葡萄果实发育后期半定量RT-PCR内参基因的优选 被引量:26
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作者 赵晓 马会勤 +1 位作者 陈尚武 徐海英 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期7-14,共8页
葡萄果实发育后期基因表达水平的变化对果实品质形成具有重要影响,内参基因的选择是基因表达定量分析的关键影响因素。本试验以雷司令葡萄品种花后50、75和95 d的果实为材料,通过半定量RT-PCR,研究了常用持家基因Actin、Tubulin、GAPDH1... 葡萄果实发育后期基因表达水平的变化对果实品质形成具有重要影响,内参基因的选择是基因表达定量分析的关键影响因素。本试验以雷司令葡萄品种花后50、75和95 d的果实为材料,通过半定量RT-PCR,研究了常用持家基因Actin、Tubulin、GAPDH1、8 S rRNA的表达变化,探讨其作为葡萄果实发育后期基因表达半定量分析内参基因的可行性。结果表明:18 S rRNA的表达水平高,且最稳定,其次是Actin,而Tubulin和GADPH的相对表达水平较低;对VvTLP、GHF17 P和VvASR3个功能基因在不同果实材料中的表达水平进行半定量RT-PCR,VvTLP和VvASR的相对表达水平较高,GHF17 P的表达水平较低,整体上均呈现递增的趋势;以Actin和18 S rRNA为内参得到的归一化结果基本一致,在4个持家基因中18 S rRNA和Tubulin是优选的葡萄果实发育后期基因表达研究的内参基因。 展开更多
关键词 葡萄 发育后期 持家基因 半定量RT-PCR
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可用于实时荧光定量PCR标准化的白桦内参基因 被引量:12
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作者 尹静 任春林 +4 位作者 詹亚光 滕文华 陈秀福 王玉成 孙红冉 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1061-1066,共6页
为了快速、准确的对白桦多个样品进行基因表达分析,本研究应用荧光定量PCR技术,对白桦持家基因微管蛋白基因(Tu)和泛素基因(UbQ)在不同处理的细胞及不同树龄或不同生长季节白桦植株各部位表达的稳定性进行检测。结果表明,对于茉莉酸甲酯... 为了快速、准确的对白桦多个样品进行基因表达分析,本研究应用荧光定量PCR技术,对白桦持家基因微管蛋白基因(Tu)和泛素基因(UbQ)在不同处理的细胞及不同树龄或不同生长季节白桦植株各部位表达的稳定性进行检测。结果表明,对于茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)处理的白桦细胞和不同生长季节白桦植株的基因定量表达分析,可同时使用Tu和UbQ平衡化qRT-PCR数据;而针对不同树龄白桦茎皮中基因表达研究时,单独使用UbQ基因作为内参对照即可获得精确的表达数据。 展开更多
关键词 白桦 实时定量PCR 持家基因
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基于多位点序列分型对新疆伊宁学龄儿童肠道两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)群体遗传差异解析
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作者 金之烜 王平 +2 位作者 张雪玲 田丰伟 倪永清 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5487-5504,共18页
【背景】两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)是专性代谢人体母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)和宿主肠道黏膜上皮黏蛋白聚糖的肠道共栖益生菌,对生命早期健康和发育至关重要,目前对其不同人群来源的群体遗传报道较少。... 【背景】两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)是专性代谢人体母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)和宿主肠道黏膜上皮黏蛋白聚糖的肠道共栖益生菌,对生命早期健康和发育至关重要,目前对其不同人群来源的群体遗传报道较少。【目的】探究在有限地域内遗传、饮食相近人群来源的B.bifidum菌株集的遗传结构是否具有族群特异的规律性,为开发个性化的益生菌株提供理论基础。【方法】对来自新疆伊宁两个族群(维吾尔族和哈萨克族)学龄儿童队列的肠道两歧双歧杆菌进行分离和鉴定,共获得115个菌株,对基于细菌基因组重复序列PCR(repetitive sequence-PCR,rep-PCR)方法筛选的53株代表菌株采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)进行群体遗传差异分析。【结果】53株代表菌株共分为37个序列型(sequence type,ST),具有很高的遗传多样性;其中26株源自维吾尔族儿童的菌株有17个ST,而20个ST来自27株哈萨克族儿童的菌株,两个族群来源的菌株之间检测到较少的同源基因重组事件。goeBURST分析显示,来自同一族群的B.bifidum分离株比来自另一族群的菌株更有可能被归入特定的系统发育分支或克隆复合体(clonal complexes,CC)。【结论】不同族群来源的B.bifidum分离株显示出较高的遗传多样性,群体遗传结构一定程度上呈现出民族族群来源的特异性,需要更大规模的取样证实。为进一步开展体内外实验并筛选针对区域族群的特色优良益生菌株提供了理论基础。 展开更多
关键词 两歧双歧杆菌 多位点序列分型 遗传多样性 克隆复合群 持家基因
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