成人正常肝细胞的持续旋转培养

目的 探讨维持培养成人肝细胞较长时间高活性的方法。 方法 采用限制贴壁、培养液中加入细胞生长因子和激素、持续轻微旋转的方法培养肝细胞。定期进行活细胞计数及培养上清液中人白蛋白浓度检测 ,并在光镜和透射电镜下观察细胞生长情况。 结果 肝细胞有一定程度的增殖 ,从第 2天至第 14天活细胞密度可维持在 4.0× 10 5 / m l以上 ,分泌白蛋白可维持较高功能状态至 2 0天左右 ,均明显优于对照方法 ;光镜观察旋转的细胞聚集体可基本保持形状至 2 0天 ,电镜亦显示培养至 15天的悬浮聚集体肝细胞仍具有正常肝细胞超微结构特征。 结论 应用该法能较长时间保持成人肝细胞的高活性状态 ,可用于生物人工肝系统所需的细胞供体培养。