HPLC-TOF/MS法检测黄曲霉毒素及霉菌指纹谱图的建立

拟建立同时检测曲霉代谢物中黄曲霉毒素和菌种鉴定的超高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)测定方法。寄生曲霉(菌株CGMCC3.124)经PD液体培养基培养,Qu ECh ERS方法提取净化后经飞行时间质谱质量分析器分析(正离子模式),检出CGMCC3.124代谢物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、O-甲基杂色曲霉素(MST)、杂色曲霉素(ST)、青霉酸(青霉酸)、曲酸(曲酸)8种代谢物。结果表明,在一定培养条件下霉菌代谢产物稳定,通过代谢软件和统计学分析,可以快速建立一种霉菌有毒代谢物筛选和分类鉴定的方法,为产毒霉菌分类系统提供一定的补充。

HPLC分析烟草化学成分及香精指纹谱图基础研究

对复杂体系组分分离以及分析的过程中现代色谱分析具有十分重要的作用,在色谱分析技术水平不断提升的过程中使其得到了广泛的使用。目前色谱分析技术在生命科学、食品科学、烟草化学中均具有重要的地位,特别是对于烟草等成分及其复杂的样品具有良好的分离效果。

益智液相指纹图谱的研究

[目的]采用高效液相色谱法建立益智的指纹图谱。[方法]采用HPLC检测,检测条件为:分析柱为岛津VP-ODS(150L×4.6mm),流动相为水-乙腈(v∶v=7∶30),进样量为20μl,检测波长为220nm。[结果]海南的益智指纹谱图相似度较大,与广西和广东的益智样品有一定的差异;广东生长的益智和大部分地区的益智有着很大的相似性;而广西的益智在总体上也和各地区的益智相似。[结论]该试验建立了10种不同产地益智的液相指纹图谱,该方法方便、快捷、准确、可靠,可以直接指导实际生产,会成为益智药材快速鉴别的一种新方法。

MALDI-TOF分析多肽指纹图谱的进展与应用

1前言 蛋白组学研究是目前生命科学研究领域中的一大热点,蛋白组学研究中的关键技术之一是如何得到准确的多肽指纹谱图,以保证蛋白质的准确定性.基于方便、快速、简捷的要求,基体辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)技术是目前分析多肽指纹谱图中最常用的方法.

紫外光谱组法鉴别云南白药及其伪品

对云南白药及其伪品的紫外光谱进行了测绘分析 ,结果表明云南白药的紫外吸收光谱特征数据λmax具有很好的重现性 ,特征性强 ,其伪品与之有明显的差异 ,该法用于鉴别云南白药具有良好的重现性及准确性。

鲍姆桑黄孔菌子实体HPLC指纹图谱及抗氧化活性谱效关系

本研究对38个不同批次和菌龄的椴木栽培鲍姆桑黄孔菌Sanghuangporus baumii子实体醇提物进行了高效液相色谱(HPLC)分析,建立了S.baumii醇提物HPLC指纹图谱,提取得到27个共有峰信息(P1–P27);同时,对38个样品醇提取的Trolox等价抗氧化能力(TEAC)进行分析,基于正交偏最小二乘(OPLS)回归建立了抗氧化活性预测模型,潜变量数为3,交互验证所得累积模型预测参数(Q^(2))为0.803,变量累积解释指标(R^(2)X)和(R^(2)Y)分别为0.574和0.954,相关系数平方(R^(2))为0.954,经验证模型可以获得良好的预测效果,可以准确反映谱峰与活性之间相关关系;利用模型变量投影重要性(VIP)指标筛选得到14个共有峰对抗氧化活性具有显著贡献。研究获得的鲍姆桑黄孔菌抗氧化谱效关系模型为桑黄原料活性的预测提供了有效的方法,可辅助指导鲍姆桑黄孔菌活性化合物的分离纯化,也为鲍姆桑黄孔菌栽培子实体的品质控制提供了技术手段。

应用裂解/毛细柱气相色谱技术对食品包装材料鉴定的研究

食品包装物样品,在裂解器中裂解,裂解产物经毛细管色谱柱分离后由火焰离子化检测器(FID)检测,即可获得裂解产物的"指纹色谱图"。对各种各样的食品包装塑料作裂解色谱分析。根据其裂解"指纹色谱图",与标准谱图检索、对比,可快速确定其材质,判别其是否符合食品包装的要求。笔者对市场上现用的食品包装塑料袋(盒),作了一个初步调研,得到结论是:大多数符合要求,但也有个别违规使用现象。

不同酶处理的啤酒酵母蛋白酶解液功能肽组学分析

采用超高效液相色谱⁃高分辨质谱(UHPLC⁃HRMS)联用技术,结合PEAKS Online 1.7肽组学分析软件和Peptide Ranker、BIOPEP数据库,分析比较了啤酒酵母的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解液的肽指纹谱图和活性肽差异,旨在探究不同酶处理的啤酒酵母蛋白酶解液的肽组学差异。PEAKS Online采用de novo测序,相较于传统数据库,更全面地分析得到五肽及其以下寡肽,使样品中的肽段数据更加完整。实验在中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的最佳酶解工艺下制备得到啤酒酵母蛋白酶解液,然后进行UHPLC⁃HRMS分离鉴定及数据检索和分析。研究结果表明,中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的酶解产物中分别鉴定出7221和7062条多肽,其中共有肽为980条,而特有肽分别为6241条和6082条,说明两种不同蛋白酶降解产物的肽指纹谱图有很大的差异。使用Peptide Ranker预测出中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解产物中有3013和3095条肽为潜在活性肽,其占比分别为41.73%和43.83%。搜索BIOPEP数据库发现,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解产物中有295条和357条活性肽,其中主要是血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽、二肽基肽酶Ⅳ抑制肽和抗氧化肽。比较发现,木瓜蛋白酶产物中活性肽数量高于中性蛋白酶产物,但是活性肽的相对含量低于中性蛋白酶产物,本研究更好地揭示了不同蛋白酶对啤酒酵母蛋白肽产品组成的影响。上述结果为啤酒酵母蛋白肽的功能产品开发和啤酒酵母资源的高值化利用提供了参考。

不同等级黄柏炭饮片的HPLC指纹图谱分析

目的对不同等级的黄柏灰饮片进行HPLC指纹图谱分析。方法将29批不同产地的黄柏炭按照传统分级方法分为三个等级,一等品9批,二等品27批,三等品27批,一共63批。采用HPLC方法,以乙腈-0.3%磷酸溶液(含0.3%二乙胺)进行梯度洗脱,建立不同等级黄柏炭饮片的指纹图谱分析方法。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2.0版)”进行共有峰确认及相似度评价;通过SPSS 19.0软件对指纹图谱进行主成分分析。结果分析结果显示不同等级黄柏炭在化学成分上类似,但其在含量上存在一定差异。结论传统分级方法具有一定的科学依据,但后续应建立外观性状与其内在化学成分相关的等级标准以确保同等级黄柏炭饮片质量的一致性。

基于GC-IMS分析2种饲料鸡蛋中挥发性风味物质

风味是影响消费者购买鸡蛋的重要因素。以人参大米鸡蛋和玉米鸡蛋为研究对象,采用气相色谱-离子迁移谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy, GC-IMS)技术分析鸡蛋中挥发性风味物质的组成情况并进行鉴定和比较分析。结果表明,2种饲料鸡蛋中共鉴定出26种挥发性风味物质,包括酮类、醛类、醇类、酯类化合物,其中醇类化合物在人参大米鸡蛋和玉米鸡蛋中的相对含量最高,分别为72.24%、59.60%。不同饲料鸡蛋的特征风味物质不同,正丁醇(单聚体和二聚体)、叔丁醇单聚体、2-己醇单聚体对人参大米鸡蛋的风味贡献表达正相关;羟基丙酮、2-庚醇、2-戊酮、2-甲基戊醛对玉米鸡蛋的风味贡献表达正相关。根据GC-IMS建立的2种不同饲料鸡蛋指纹图谱差异较大,能有效区分蛋鸡的养殖条件和所产鸡蛋的风味差异。

烟用香精、香料质量控制体系研究

将色谱图吻合与色谱峰总量比较相结合作为香精、香料质量控制指标,通过梯度稀释后嗅香、加料评吸等手段确定质量控制限,以此建立香精、香料质控体系,整个控制过程操作简便,计算简单,判断依据直观,便于烟草企业使用.

三维定量荧光技术在冀东油田的研究与应用

随着冀东油田大斜度、大位移井数量大幅增加,以及钻井新工艺的采用,导致录井过程中油气显示发现难度日益增大;同时因钻井液中添加了大量具有荧光特性的添加剂,导致钻井液出现不同程度荧光污染,严重干扰了地质录井油气显示的发现。为此,冀东油田开展了三维定量荧光录井技术研究首先,对其含油浓度和对比级的对应性、样品分析结果重复性误差进行了可靠性分析,指出了该技术的优势与局限性;其次,根据现场应用流程,明确了不同性质原油的主要谱图类型,厘清了不同区块、层位谱图形态特征,并梳理了该地区常用钻井液添加剂谱图类型,通过辨识不同样品在主峰出峰位置和出峰组合上的差异,达到有效排除钻井液污染影响,发现岩屑中真实油气显示的目的;最后,优选三维定量荧光含油性特征参数CN指数和N指数,建立三维定量荧光解释方法,实现对储集层含油性的有效识别。通过多口井的应用表明,三维定量荧光技术能够满足大斜度、大位移井钻探的需要,具有全面推广的应用价值。

κ-卡拉胶的高温高压法降解工艺和降解机制研究

目的研究高温高压降解法降解κ-卡拉胶制备水溶性卡拉胶的工艺和降解产物的寡糖指纹谱图,探究κ-卡拉胶的糖链结构特点和高温高压降解机制。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、高效分子排阻色谱分析高温高压降解产物的分子量和得率。采用傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)分析κ-卡拉胶降解前后的结构变化。利用亲水液相色谱-高分辨质谱法(hydrophilic interaction liquid chromatography-high resolution mass spectrometry,HILIC-HRMS)比较不同p H时,降解产物的寡糖指纹谱图。结果采用乙酸溶液调节溶液的p H在4.0~5.0之间,高分子量κ-卡拉胶在100~120℃加热30~90 min后迅速降解,可以获得不同分子量的降解产物。p H和温度对卡拉胶的高温高压降解产物的分子量和得率有很大的影响,高温高压降解不会改变卡拉胶原有的结构。降解产物的寡糖指纹谱图显示,高温高压降解获得的卡拉胶寡糖产物主要是聚合度2~8的卡拉胶偶数糖和微量的奇数糖,还有约20%的聚合度1~8的硫酸半乳寡糖。寡糖指纹谱图证明κ-卡拉胶的糖链主要是由4-硫酸半乳糖-3,6内醚半乳糖二糖单元组成,还存在少量的无硫、双硫酸化、三硫酸化二糖单元,以及不同硫酸化的半乳寡糖结构域。不同硫酸化寡糖产物的存在证明κ-卡拉胶的糖链中存在不同硫酸化的半乳糖-3,6内醚半乳糖二糖和半乳寡糖片段。结论通过控制溶液的pH、降解温度和时间,高温高压法可以快速、高效地制备降解卡拉胶,高温高压降解和HILIC-HRMS可以准确地分析κ-卡拉胶糖链的精细结构,对不同的寡糖域进行定性和定量分析。

GC-MS法对不同产地大米的快速鉴定

采用GC-MS对4种不同产地大米中的脂溶性成分进行分析,并利用NIST标准质谱库和质谱图搜索程序进行检索。结果表明,大米中主要的脂溶性成分为棕榈酸、亚油酸、油酸、角鲨烯和谷甾醇。不同产地大米中脂溶性化合物的指纹谱图存在显著差异,通过主成分分析和聚类分析,建立了一种对不同产地大米进行快速鉴定的方法。

基于多成分含量测定结合化学计量学考察甘草不同提取方法对药效成分的影响

以9个产地甘草药材为原料,通过水浴回流法、超声波辅助法和微波辅助法获得甘草药材提取物,采用超高效液相色谱(UPLC)法测定甘草药材中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮以及甘草酸的含量,并建立指纹谱图。通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法—判别分析(OPLS-DA)研究不同提取方法对甘草药材溶出成分的影响。结果表明:不同提取方法建立的甘草指纹谱图中有30个共有峰,通过对照品指认出芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮和甘草酸7个峰;不同提取方法甘草药材的相似度为0.832~0.985;利用PCA和OPLS-DA分析将不同提取方法甘草药材划分为3类,分别对应3种提取方法,共确定9个差异标志物,影响显著性排序分别为峰25>峰12(芹糖异甘草苷)>峰20>峰9>峰14>峰18>峰30>峰13>峰29。9批甘草药材中7种药效成分的含量采用微波辅助法提取时最高,分别是超声波辅助法的113%~135%,水浴回流法的115%~150%。微波辅助法对甘草药材溶出成分最好。