新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

目的对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测7种振荡混匀方法进行比较,确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究:第1阶段,采用小样本(每种方法30例),从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应(PCR)3个层面评价7种振荡方法的有效性,并确定最优时间参数;第2阶段,采用大样本(2150例),验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示,除超声振荡外,其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多(P<0.05)。实时荧光PCR结果显示,颠倒和回旋振荡处理后,核酸扩增未见内参循环阈值(Ct)明显下降(P>0.05);吹打6次和往复振荡5 min处理后,核酸扩增未见内参Ct值下降;单管/多管涡旋和超声振荡处理后,核酸扩增内参Ct值显著下降(P<0.0001)。大样本量实时荧光PCR结果显示,多管涡旋振荡2 min较超声振荡5 min效果更优(P<0.0001)。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。

加提取液后不同振荡混匀时间对HBV DNA检测结果的影响

目的探讨在PCR定量检测HBV DNA过程中,加入提取液后的振荡混匀时间对检测结果的影响,以选择适当的混匀时间。方法选择10份HBV DNA阳性标本,分为4组,在加入提取液后,每组标本分别混匀0s(不混匀)及10、60、180s,其他步骤完全按说明书操作,对不同混匀时间组HBV DNA定量结果进行统计分析。结果在加入提取液后,分别混匀10、60、180s,其HBV DNA检测结果差异无统计学意义(P>0.05);加提取液后不混匀组检测结果最低,与其他各组检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV DNA定量检测中,加入提取液后必须振荡混匀,混匀时间在10s左右即可,不必将沉淀完全混匀。

不同振荡方式对全自动酶免系统检测结果的影响

目的探讨ELISA试验时,不同振荡混匀方式对全自动酶免系统检测结果的影响。方法选择HBs Ag试剂盒与全自动酶免系统进行匹配试验,根据振荡混匀参数不同,选择低速振荡(B)组和高速振荡(C)组,每组再根据振荡混匀时间(10、30、60 s)不同分为3组(B1-B3、C1-C3),另设手工混匀对照(A)组,每小组采用低值质控血清作为标本进行16孔试验。计算各组均值±标准差(x珋±s)及变异系数(CV),对最终的检测结果进行分析。结果 A组(4.65±0.29)6.2%,B组:B1(3.54±0.46),13.0%;B2(4.08±0.44),10.8%;B3(4.49±0.21),4.7%,C组:C1(3.12±0.71),22.8%;C2(3.86±0.31),8.0%;C3(4.57±0.31)6.8%。各组结果与充分混匀A组比较,只有B3、C3组的结果差异无统计学意义;振荡时间相同的B组和C组比较均无统计学意义。结论作为全自动酶免系统运行的重要环节之一,振荡方式的合理选择会直接影响ELISA结果的准确性。

不同振荡方式对FAME全自动酶免分析系统检测结果影响的分析

目的探讨进行ELISA实验时,不同振荡混匀方式对FAME全自动酶免系统检测结果的影响。方法选择HBs Ag试剂盒（A/B/C）、HCVAb试剂盒（a/b/c）在同一台全自动酶免系统进行匹配实验,根据振荡混匀参数不同,设置低速振荡（B/b）组和高速振荡（C/c）组,每组再根据振荡混匀时间（0、10、20、30 s）不同分为4个小组（B0~B3/b0~b3、C0~C3/c0~c3）,实验另设手工充分混匀对照（A/a）组,每组采用低值质控血清作为标本进行实验。计算各组（x±s）及变异系数（CV）,对最终的检测结果进行分析。结果 HBs Ag试剂B、C组结果与相应充分混匀A组比较,B0（0 s）、B1（10 s）、C0（0 s）、C1（10 s）组的结果差异有统计学意义（P〈0.05）;HCVAb试剂b、c组结果与相应充分混匀a组比较,b0（0 s）、c0（0 s）组的结果差异有统计学意义（P〈0.05）;振荡时间相同而振荡频率不同的B/b组和C/c组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论振荡方式是全自动酶免系统运行的重要环节之一,其是否合理选择会直接影响ELISA实验结果的准确性。