冷光源光化学诱导局灶性脑梗塞及血管损伤半暗带大鼠模型

目的建立可同时观察局灶性梗塞区及周边血管损伤半暗带的大鼠脑缺血动物模型 ,并可进行局部脑组织血流、t-PA、PAI、NO、ET等指标变化的监测 ,以期为脑缺血血管因素变化规律的研究及治疗药物的筛选提供可靠实用的工具。方法利用已建立的光化学诱导血栓形成的原理 ,短时间内造成大鼠脑皮质大脑中动脉供血区的完全性局灶性梗塞 ,观察梗塞面积、血管损伤半暗带面积及程度、组织病理、局部脑组织血流、t-PA、PAI、NO、ET等指标的时相变化。结果实验数据显示 ,在局灶性梗塞形成后 ,梗塞灶、周边血管损伤半暗带、脑组织血流、纤溶、凝血各指标 ,模型动物与对照组比较表现出不同的时相变化趋势。结论该模型观察指标较全面 ,可为脑梗塞后血管损伤保护及溶栓治疗提供实用性工具。

创伤性脑损伤后损伤半暗带区的病理生理改变

创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后的二次损伤包括释放对受损组织完整性造成严重伤害的信号分子,导致损伤半暗带区在初始损伤后的几分钟至几天内发生一系列演变,但演变机制仍不十分清楚。这些二次损伤可能通过细胞凋亡、神经胶质增生、兴奋毒性、钙稳态破坏、自由基产生、血脑屏障破坏、缺血性损伤及水肿形成等进程,导致细胞功能和损伤扩散的改变（[1]）。这种动态进程,涉及神经细胞和血管,成为TBI的潜在治疗目标。本文旨在综述TBI后损伤半暗带区的病理生理改变,为TBI的预防治疗提供科学依据。

创伤性脑损伤大鼠半暗带脑组织中Elk1的表达及作用

目的探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠半暗带脑组织中ETS结构域包含蛋白Elk1的表达及作用。方法将80只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI-siRNA组和TBI-空病毒载体组,每组20只。TBI组、TBIsiRNA组和TBI-空病毒载体组大鼠建立中度液压脑损伤模型,假手术组大鼠手术步骤与TBI组、TBI-siRNA组和TBI-空病毒载体组相同,但未实施液压冲击。TBI-siRNA组及TBI-空病毒载体组大鼠于造模前24 h分别经侧脑室注射10μL Elk1-siRNA慢病毒表达载体和空病毒载体,假手术组和TBI组大鼠经侧脑室注射10μL磷酸盐缓冲液。各组大鼠分别于脑损伤后12、24、72 h采用Shapira和Wahl脑损伤神经功能评分法评估神经功能,神经功能评估后快速断头处死大鼠(每个时间点每组选取5只大鼠),取脑组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测脑组织中Elk1 mRNA表达,Western blot法检测脑组织中Elk1蛋白表达,比色法检测脑组织中Caspase-3活性;各组大鼠脑损伤后24 h选取5只大鼠断头取脑组织,采用Fluoro-Jade染色法计数坏死神经元。结果大鼠脑损伤后12、24、72 h,TBI-空病毒载体组、TBI组大鼠神经功能评分显著低于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠神经功能评分高于TBI-空病毒载体组和TBI组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠神经功能评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠脑损伤后12、24、72 h,TBI组和TBI-空病毒载体组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量显著高于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量显著低于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。脑损伤后24 h,假手术组、TBI组、TBI-空病毒载体组和TBI-siRNA组大鼠大脑皮层坏死神经元数目分别为4.0±1.0、32.0±4.0、33.0±3.0、16.0±2.0,TBI组、TBI-空病毒载体组大鼠大脑皮层半暗带坏死神经元数目显著多于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠大脑皮层坏死神经元数目显著少于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.01),TBI组与TBI-空病毒载体组大鼠大脑皮层半暗带坏死神经元数目比较差异无统计学意义(P>0.05)。脑损伤后12、24、72 h,TBI-空病毒载体组、TBI组大鼠大脑皮层半暗带脑组织中Caspase-3活性显著高于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠损伤半暗带脑组织中Caspase-3活性显著低于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠损伤半暗带脑组织中Caspase-3活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Elk1在TBI大鼠损伤半暗带脑组织中表达上调,抑制Elk1表达可减轻损伤半暗带神经元坏死,改善神经功能。

半暗带的损伤机制及脑电地形图表现

Astrup于1977年首先提出缺血半暗带(Ischemic Penumbra,IP)的概念.以后的研究提示,局灶性脑缺血损伤的结果不只取决于血流阈值.在半暗带内发生的一系列病理变化,局部脑血流量降低、电活动终止、代谢增加、基因选择性表达以及进行性发展的神经元凋亡,都影响了它的转化方向,即"损伤级联反应"[1].这促使不少学者从电生理、代谢、组织学、早期基因表达等多角度重新认识半暗带的损伤机制.