吗啡对大鼠脊髓Ⅱ板层中受损伤坐骨神经的传入纤维终末的影响——抗氟化物酸性磷酸酶组织化学研究

目的 探讨吗啡对钳夹损伤坐骨神经后其传入纤维终末在脊髓Ⅱ板层分布的影响。 方法 用显示抗氟化物酸性磷酸酶 (FRAP)组织化学方法 ,借助图像分析仪测量损伤坐骨神经后 15d和 30d吗啡组和对照组大鼠脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应物面积。 结果 损伤坐骨神经后吗啡组和对照组大鼠脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应区均有不同程度的缺失 ;对照组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积比 15d的FRAP阳性反应物面积增大 40 %。吗啡组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积比 15d的FRAP阳性反应物面积增大 2 2 %;同时也比对照组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积增大 19%。 结论 随着损伤坐骨神经后大鼠存活时间延长 ,其脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应物面积呈恢复性增大 ;吗啡能使坐骨神经损伤大鼠脊髓Ⅱ板层的FRAP阳性反应物面积明显增大。

损伤坐骨神经后脊髓腹角运动神经元中α管蛋白的免疫组化研究

损伤坐骨神经后脊髓腹角运动神经元中α管蛋白的免疫组化研究吴燕米瑞发刘红甘思德范明（军事医学科学院基础医学研究所）在哺乳动物周围神经中应答神经再生的特点之一是细胞骨架蛋白的合成、表达及轴浆转运的变化，这种变化特点与神经元细胞骨架蛋白的结构重建密切相关，...

电针对大鼠损伤坐骨神经再生的影响

目的:探讨电针对受损伤的周围神经功能恢复的影响。方法:Wistar大鼠60只切断左侧坐骨神经并缝合,随机分成电针组与模型组。电针组每天穴位电针20min。分别于术后2,4及8周动态观察髓纤维形态学变化、坐骨神经动作电位幅值的变化。模型组不作任何处理。结果:电针组坐骨神经动作电位幅值恢复率2,4及8周时分别为(11.98±4.12)%,(45.03±7.21)%,(82.41±15.97)%时优于模型组(9.46±4.17)%,(15.02±16.98)%,(33.97±7.46)%(P<0.05);有髓神经纤维数、有髓神经纤维直径及截面积在术后各观察点电针组明显多于模型组(P<0.01)。结论:穴位电针对损伤神经的再生和功能恢复有促进作用。

神经生长因子对损伤坐骨神经的修复作用

目的探讨神经生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)对损伤神经的修复作用。方法Wistar大鼠45只 ,制备坐骨神经夹损模型。术后每日分别局部给予一定量的NGF和等渗盐水共14d ,检测大鼠趾间距和诱发电位 ,以观察其神经功能的恢复情况。结果NGF治疗组大鼠的趾间距及诱发电位在2～3周就已全部恢复正常 ,而单纯损伤组和盐水治疗组则到术后4周才恢复正常。结论外源性NGF能明显改善损伤坐骨神经功能。

前列地尔对SD大鼠损伤坐骨神经的修复作用

以SD大鼠坐骨神经建立周围神经损伤动物模型,以坐骨神经传导速度、坐骨神经干病理切片(光镜、电镜)为观察指标,观察前列地尔对周围神经损伤后恢复的影响。发现前列地尔组给药四周后能显著改善大鼠坐骨神经损伤状况。认为前列地尔对周围神经损伤有一定的修复作用。

生长相关蛋白及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达

为了研究大鼠周围神经损伤后远侧端组织中生长相关蛋白 (GAP-4 3 )及其 m RNA的表达 ,采用正常 SD大鼠坐骨神经横断损伤的模型 ,于术后不同时间取坐骨神经远侧端组织 ,以 Western Blot和 RT-PCR法检测 GAP-4 3及其 m RNA的表达。RT-PCR法检测结果显示 ,正常大鼠坐骨神经组织中 GAP-4 3 m RNA表达量较低 ,而损伤坐骨神经的远侧段 GAP-4 3 m RNA的表达量明显增加 ,于损伤第 2周时达高峰。用抗 GAP-4 3抗体进行 Western Blot检测 ,结果表明 ,正常坐骨神经 43 k Da处出现弱阳性反应的蛋白区带 ,而损伤后坐骨神经远侧段 43 k Da处阳性反应条带着色明显加深 ,损伤后第 3周时阳性反应着色最强。本研究结果提示 ,GAP-4 3及其 m RNA在大鼠损伤坐骨神经远侧段组织中表达增强 ,其 m RNA表达上调高峰在神经损伤后的第 2周 ;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第 3周。

吡咯喹啉醌对大鼠损伤坐骨神经的修复作用

目的探讨吡咯喹啉醌 (PQQ)对损伤的坐骨神经的修复作用。方法Wistar大鼠 30只 ,制备坐骨神经夹损模型 ,术后每日分别局部注射一定量的PQQ、神经生长因子 (NGF)和生埋盐水 14d ,检测大鼠趾间距和电生理指标 ,比较PQQ对损伤神经的修复作用。结果PQQ及NGF组的趾间距及电生理指标在前两周的恢复明显好于生理盐水组 ,且有显著性差异。

生长相关蛋白-43及mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达 (英文)

目的探讨坐骨神经离断后,其远侧端组织中生长相关蛋白-43mRNA(GAP-43mRNA)及其蛋白表达的变化,为临床神经修复过程中更好地改善微环境提供实验依据。方法正常SD大鼠24只,行坐骨神经横断术,术后1,2,3,4周取坐骨神经远侧端组织,以WesternBlot和RT-PCR法检测GAP-43及其mRNA的表达。结果RT-PCR结果显示,正常大鼠坐骨神经组织中GAP-43mRNA表达量较低,损伤坐骨神经远侧端GAP-43mRNA的表达量明显增加,于损伤第2周时达高峰。采用抗GAP-43抗体,进行WesternBlot检测结果:正常坐骨神经43kDa处出现弱阳性反应的蛋白区带,损伤后坐骨神经远侧端43kDa处阳性反应条带着色明显加深,损伤后第3周时阳性反应着色最强。结论GAP-43及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经远侧端组织中表达增强,其mRNA表达上调高峰在神经损伤后的第2周;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第3周。

生长相关蛋白在损伤坐骨神经中的表达

目的 :研究大鼠周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白的表达。方法 :取正常SD大鼠坐骨神经和离断损伤后不同时间近侧端和远侧端神经组织 ,采用Anti GAP 43抗体以WesternBlot方法检测GAP 43的表达变化。结果 :NC膜上 43kDa位置出现阳性反应条带 ,在正常坐骨神经中反应微弱 ,损伤后明显加强 ,随损伤时间延长 ,神经近侧端的反应无明显改变 ,神经远侧端的反应逐渐加强 ,以第 3周为最强 ,之后逐渐减弱。结论 :GAP 43在正常坐骨神经中低表达 ,损伤后近侧端与远侧端表达均增加 ,远侧端的表达增加以第 3周为高峰。

携带脑源性神经营养因子基因腺病毒载体转染在体大鼠损伤坐骨神经基因表达的检测

目的:观察携带小鼠脑源性神经营养因子cDNA表达片段的重组腺病毒载体AxCA-BDNF,转染大鼠坐骨神经后基因表达的情况。方法:实验于2000-03/2002-04在第三军医大学大坪医院野战外科研究所、北京军区总医院神经外科实验室完成。实验材料:体质量200g左右的Wistar大鼠90只,雌雄不限。实验方法:①制备坐骨神经损伤模型:用1%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。在大鼠右侧股后部作纵行切口,无菌条件下显露坐骨神经,自股中部切除10mm坐骨神经,然后随机分为3组,每组30只,按不同方式处理:A组:坐骨神经缺损+硅胶管+AxCA-BDNF原液8μL;B组:坐骨神经缺损+硅胶管+脑源性神经营养因子溶液8μL;C组:坐骨神经缺损+硅胶管+空白病毒稀释液8μL。②灌注固定和组织切片制备:分别于术后3d、7d、14d、1个月、2个月、4个月共6个时相点,每组各取5只大鼠进行灌注。另外取5只正常Wistar大鼠作为正常对照。应用原位杂交和免疫组化等手段从脑源性神经营养因子mRNA和蛋白水平,定性和半定量分析测定坐骨神经损伤后脑源性神经营养因子基因表达。结果:90只大鼠均进入结果分析。A组3d、7d、14d、1个月时近、远端神经干和脊髓(L3～6)中脑源性神经营养因子mRNA水平均远远高于B、C组(近端神经干:A组:90.70±3.32,108.32±3.95,110.51±2.13,60.39±3.24;B组:15.46±1.89,20.50±2.31,94.37±2.45,48.32±2.37;C组:14.49±2.03,22.42±2.24,95.28±3.66,46.47±2.11;远端神经干:A组:96.24±4.58,113.10±5.83,116.28±5.22,66.91±3.87;B组:21.37±3.39,28.56±2.67,105.62±4.31,52.54±4.15;C组:20.75±3.56,27.33±2.52,104.45±4.98,53.40±3.76;脊髓:A组:100.43±4.17,109.69±6.06,103.47±5.47,60.84±4.84;B组:50.51±4.32,37.36±3.15,35.05±3.82,35.82±3.35;C组:51.03±3.91,38.98±3.75,39.36±3.34,34.64±2.84,P<0.05,P<0.01),脑源性神经营养因子水平也高于C组。结论:通过腺病毒介导转染的脑源性神经营养因子基因在大鼠坐骨神经内得到了有效表达,并通过轴突逆行转运到了相应的脊髓神经元。

大鼠损伤坐骨神经远侧端CNTF表达的免疫组织化学研究

目的 探索大鼠坐骨神经损伤后 CNTF的表达和变化。方法 采用抗 CNTF抗体免疫组织化学方法和计算机图象处理系统定量观察大鼠正常坐骨神经与坐骨神经横断损伤后 1周、 2周、 4周神经远侧端 CNTF的表达。结果 正常大鼠坐骨神经具有高水平的 CNTF免疫阳性反应 ,坐骨神经损伤后 1周、 2周、 4周远侧端神经中 CNTF免疫阳性反应均低于正常坐骨神经 ,免疫阳性反应强度为正常 >伤后 1周 >伤后 2周 >伤后 4周 ,呈逐渐减弱趋势。结论 大鼠坐骨神经损伤后远侧端神经中 CNTF的表达呈下调性变化。

周围神经43kD蛋白在损伤坐骨神经中的表达

目的 :探索SD大鼠损伤坐骨神经组织中 43kD蛋白的表达。方法 :采用周围神经 43kD蛋白单克隆抗体 ,以WesternBlot方法检测大鼠损伤坐骨神经中相应蛋白的表达情况。结果 :正常大鼠坐骨神经组织与大鼠损伤后 2周的坐骨神经远侧端组织 ,在 43kD处均有免疫反应阳性条带 ,在大鼠损伤后 2周的坐骨神经远侧端组织中阳性反应产物着色较深。结论 :大鼠坐骨神经组织中有 43kD蛋白的表达 ,而损伤神经远侧端 43kD蛋白表达增强。

睫状节神经营养因子在大鼠损伤坐骨神经中的表达变化

目的 :探索坐骨神经损伤后睫状节神经营养因子 CNTF的表达变化。方法 :采用抗 CNTF抗体以Western Blot方法检测大鼠损伤两周坐骨神经远侧端和正常神经中 CNTF表达。结果 :正常神经组织中在 2 2 k D处有特异性 CNTF阳性反应条带 ,在损伤两周的坐骨神经远侧端中尚未出现 CNTF阳性反应条带。结论 :正常成年鼠坐骨神经中 CNTF表达处于一定的水平 ,神经损伤两周后的坐骨神经远侧端中 CNTF表达明显减少。

化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞修复损伤坐骨神经的生物力学评价

背景:以拉伸力学指标评估化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞治疗坐骨神经损伤的效果,目前鲜有报道。目的:评估化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞移植治疗坐骨神经损伤的效果。方法:将45只SD大鼠随机分为自体神经移植组、化学去细胞异体神经移植组、化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞移植组,每组15只,制备10 mm坐骨神经损伤模型,分别以自体神经、化学去细胞异体神经、化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞修复坐骨神经损伤,术后20周,进行坐骨神经电生理检测和坐骨神经单向拉伸实验。结果与结论:①化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞移植组与自体神经移植组波幅值、运动传导速度值大于化学去细胞异体神经移植组(P<0.05);②化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞移植组与自体神经移植组拉伸弹性限度应变、弹性限度应力、最大应变、最大应力大于化学去细胞异体神经移植组(P<0.05);③结果表明,化学去细胞异体神经联合骨髓间充质干细胞移植对坐骨神经损伤具有明显的修复效果。

纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子对大鼠损伤坐骨神经血管新生的影响

目的探讨局部应用纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子对损伤坐骨神经组织血管生成的影响。方法将36只Wistar大鼠左侧坐骨神经切断,神经两断端原位缝合,制作大鼠坐骨神经损伤动物模型。然后将大鼠随机分成实验组(纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子给药组)与对照组(血管内皮生长因子基因转染给药组),每组18只,于用药后4、8、12周行肉眼观察、神经微血管计数检查。结果实验组用药后4、8周的神经微血管计数显著低于对照组(P<0.05),用药后12周两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论纤维蛋白凝胶可以作为血管内皮生长因子的载体,纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子给药可以促进神经血管新生。

针灸配合磁疗治疗肌注损伤坐骨神经痛38例疗效观察

方法 :应用针灸配合磁疗治疗肌注损伤坐内神经痛 38例 ,并与口服西药治疗的 30例进行比较。结果 :前者治愈率和显效率分别为 86 .8%、97.3%,后者治愈率和显效率分别为 6 3.3%、83.3%,两者之间疗效比较 ,经统计学处理 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :前者疗效明显优于后者。

瑞芬太尼调节IL-10/β-内啡肽信号通路对坐骨神经损伤大鼠疼痛的影响

目的探讨瑞芬太尼对坐骨神经损伤(SNI)大鼠疼痛的影响及作用机制。方法建立SNI大鼠模型,大鼠分为假手术组、模型组、瑞芬太尼低剂量组(5μg·kg^(-1)·min^(-1))、瑞芬太尼高剂量组(20μg·kg^(-1)·min^(-1))和瑞芬太尼+抑制剂组(20μg·kg^(-1)·min^(-1)的瑞芬太尼+10μL IL-10抗体),评估大鼠疼痛阈值,统计坐骨神经指数(SFI),Masson染液评价靶肌肉萎缩情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量,免疫荧光检测微管相关蛋白(MAP2)的表达,Western blot检测IL-10、β-内啡肽蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠疼痛阈值、SFI和IL-10、β-内啡肽蛋白的表达水平下降,肌肉萎缩、IL-1β、IL-6、TNF-α、MAP2表达增加(P<0.05);与模型组比较,瑞芬太尼低、高剂量组大鼠疼痛阈值、SFI和IL-10、β-内啡肽蛋白的表达水平升高,肌肉萎缩、IL-1β、IL-6、TNF-α、MAP2表达降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与瑞芬太尼高剂量组比较,瑞芬太尼+抑制剂组大鼠疼痛阈值、SFI和IL-10、β-内啡肽蛋白的表达水平下降,肌肉萎缩、IL-1β、IL-6、TNF-α、MAP2表达增加(P<0.05)。结论瑞芬太尼可能通过激活IL-10/β-内啡肽信号通路抑制SNI大鼠的疼痛行为。

齐刺环跳穴干预坐骨神经损伤大鼠脊髓背角炎症因子及胶质原纤维酸性蛋白表达影响的实验研究

目的通过观察齐刺环跳穴对坐骨神经损伤(Sciatic nerve injury,SNI)大鼠脊髓背角炎症因子及胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic arotein,GFAP)表达的影响,探讨齐刺环跳穴治疗神经病理痛(Neuropathic pain,NP)的镇痛机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、齐刺组、单刺组及药物组,每组12只,采用钳夹法制备大鼠坐骨神经损伤模型。造模第2天开始进行针刺及药物干预,连续14 d。观察各组大鼠干预前后热缩足反射潜伏期(Paw with⁃drawal latency,PWL)的变化,治疗结束后取损伤处坐骨神经,苏木素伊红(HE)染色观察神经形态;取腰3~5脊髓节段ELISA法检测白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)蛋白表达水平,实时定量PCR法及免疫组化法检测GFAP表达水平。结果治疗前,与假手术组比较,各组PWL指数降低(P<0.01),与模型组比较,齐刺组治疗后显著改善(P<0.01)。HE染色,模型组神经纤维排列紊乱,齐刺组、单刺组及药物组神经纤维在数量及排列紊乱程度等方面均有改善,齐刺组改善最为明显。ELISA法、RT-PCR法及免疫组化检测,模型组、齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达较假手术组显著升高(P<0.01);与模型组相比,齐刺组、单刺组、药物组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFAP表达显著下降,齐刺组表达低于单刺组及药物组(P<0.01)。结论齐刺环跳穴缓解坐骨神经痛的镇痛机制可能与下调脊髓背角炎症因子表达,抑制星形胶质细胞活化,降低中枢痛觉敏化程度有关。