环黄芪醇促进脊髓损伤小鼠运动功能恢复及皮质神经元再生的相关机制

背景:前期研究证实,环黄芪醇能够促进坐骨神经损伤修复,且环黄芪醇能够激活端粒酶反转录酶进一步参与外周感觉神经元轴突再生的调节。但环黄芪醇是否可以激活皮质神经元轴突再生仍然未知,尤其是环黄芪醇是否参与脊髓损伤修复过程中运动功能的恢复。目的:探究环黄芪醇对小鼠脊髓损伤后运动功能恢复的影响,以及环黄芪醇促进皮质神经元再生的相关机制。方法:①将12只ICR小鼠随机分为溶剂组、环黄芪醇组,每组6只,构建脊髓损伤模型后分别腹腔注射含2%吐温20和5%二甲基亚砜的PBS、环黄芪醇(20 mg/kg),连续给药12周,使用BMS运动功能评分评估小鼠肢体运动功能;②体外培养E14胎鼠大脑皮质神经元,分为二甲基亚砜组与环黄芪醇组,分别用二甲基亚砜、0.5μmol/L环黄芪醇体外培养3 d;③E7孕鼠分为溶剂组与环黄芪醇组,分别腹腔注射含2%吐温20和5%二甲基亚砜的PBS、20 mg/kg环黄芪醇,连续给药7 d,分离出胎鼠大脑皮质,体外培养皮质神经元3 d;④对胎鼠大脑皮质神经元进行Tuj1免疫荧光染色,分析Tuj1阳性细胞的轴突长度,验证环黄芪醇对皮质神经元轴突再生的作用;对胎鼠大脑皮质神经元进行Tuj1、端粒酶反转录酶双标免疫荧光染色,分析环黄芪醇对端粒酶反转录酶表达的影响;蛋白免疫印迹分析胎鼠大脑皮质神经元中端粒酶反转录酶蛋白的相对表达;⑤将6只ICR小鼠随机分为溶剂组、环黄芪醇组,每组3只,构建脊髓损伤模型后分别腹腔注射含2%吐温20和5%二甲基亚砜的PBS和环黄芪醇(20 mg/kg),连续给药7 d,蛋白免疫印迹检测脊髓组织中端粒酶反转录酶蛋白的相对表达。结果与结论:①脊髓损伤后环黄芪醇治疗4,6,8,12周,环黄芪醇组小鼠运动功能评分显著高于溶剂组(P<0.0001);脊髓损伤后环黄芪醇治疗7 d,环黄芪醇组小鼠脊髓组织中端粒酶反转录酶蛋白相对表达量显著高于溶剂组(P<0.05);②Tuj1免疫荧光染色结果显示,0.5μmol/L环黄芪醇组体外干预的皮质神经元轴突长度显著大于二甲基亚砜组(P<0.001),腹腔注射20 mg/kg环黄芪醇组的皮质神经元轴突长度显著大于溶剂组(P<0.01);③端粒酶反转录酶免疫荧光染色结果显示,0.5μmol/L环黄芪醇组体外干预的皮质神经元的端粒酶反转录酶荧光强度显著大于二甲基亚砜组(P<0.01);④蛋白免疫印迹检测显示,0.5μmol/L环黄芪醇组体外干预的皮质神经元中端粒酶反转录酶蛋白相对表达量显著高于二甲基亚砜组(P<0.05),腹腔注射20 mg/kg环黄芪醇组的皮质神经元中端粒酶反转录酶蛋白相对表达量显著高于溶剂组(P<0.05)。结果表明,环黄芪醇能够促进皮质神经元轴突生长并改善小鼠脊髓损伤后运动功能,这一现象可能与端粒酶反转录酶的表达升高有关。

重复性经脊髓磁刺激促进脊髓损伤小鼠运动功能恢复

背景:研究表明重复性经脊髓磁刺激能够抑制脊髓损伤炎症反应,在脊髓区域施加磁场刺激,以调节神经元的兴奋性和突触传递,从而促进神经系统的可塑性和修复。目的:观察重复性经脊髓磁刺激对脊髓损伤后小鼠Toll样受体4/核因子κB/NLRP3信号通路的影响,探讨其对运动功能恢复的机制。方法:将SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组、重复性经脊髓磁刺激组,后2组小鼠麻醉后采用咬骨钳剔除T9椎板,暴露脊髓,使用小型动脉瘤夹夹持脊髓20 s建立脊髓损伤模型。重复性经脊髓磁刺激组小鼠脊髓损伤的第1天开始进行为期21 d的重复性经脊髓磁刺激干预。每天持续10 min,每周刺激5 d,休息2 d。于脊髓损伤后1,3,7,14,21 d进行小鼠运动功能BMS评分,利用Western Blot检测脊髓损伤处的水通道蛋白AQP4、凋亡因子Bax、Bcl-2、CL-Caspase-3、炎症因子肿瘤坏死因子α、干扰素γ、白细胞介素6、白细胞介素4和Toll样受体4/核因子κB/NLRP3信号通路相关蛋白的表达,氧化应激试剂盒检测脊髓损伤处超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性及丙二醛浓度,免疫荧光染色法检测神经元核抗原的表达。结果与结论:(1)重复性经脊髓磁刺激组小鼠的BMS评分高于脊髓损伤组(P<0.05);(2)与脊髓损伤组相比,重复性经脊髓磁刺激组脊髓含水量降低、AQP4蛋白表达降低;丙二醛浓度、Bax、CL-Caspase-3、肿瘤坏死因子α、干扰素γ、白细胞介素6与Toll样受体4/核因子κB/NLRP3信号通路相关蛋白的表达均降低(P<0.05),而超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性、Bcl-2、白细胞介素4与神经元核抗原的表达均升高(P<0.05);(3)结果说明,重复性经脊髓磁刺激能下调Toll样受体4/核因子κB/NLRP3信号通路相关蛋白的表达,缓解脊髓损伤后的脊髓水肿、氧化应激、凋亡反应和炎症反应等,发挥神经保护作用,从而促进脊髓损伤后小鼠后肢运动功能的恢复。

OPG/RANKL/RANK信号通路在脓毒症相关急性肾损伤小鼠中的研究

目的:探讨骨保护素(OPG)/核因子⁃κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子⁃κB受体激活因子(RANK)信号通路因子在脓毒症相关急性肾损伤(SA⁃AKI)小鼠中的改变及可能的作用,为SA⁃AKI的机制研究探索新的思路。方法:通过盲肠结扎穿孔手术(CLP)建立SA⁃AKI模型组(CLP组),对照组为假手术组(Sham组),只行开腹不做盲肠结扎穿孔操作。术后24 h采血并处死留取小鼠肾脏组织,用试剂盒检测血清Scr、BUN水平,酶联免疫测定法(ELISA)检验血清中IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平,苏木精⁃伊红染色(HE)观测肾组织病理学变化,聚合酶链反应(RT⁃qPCR)和蛋白质印迹实验(Western blotting)检验小鼠肾组织中OPG、RANKL、RANK的mRNA和蛋白水平。结果:与Sham组对比,CLP组Scr、BUN、IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组对比,CLP组肾小球充血水肿,部分缺血皱缩,球囊间隙扩大,部分肾小管中可见坏死的上皮细胞,管腔扩大,肾间质水肿,少量炎性细胞浸润;与Sham组相比较,CLP组肾组织中OPG和RANK的mRNA表达显著上调,而RANKL的mRNA表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组相比较,CLP组肾脏组织中OPG及RANK的蛋白表达均升高,而RANKL的蛋白表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在脓毒症的小鼠模型中OPG及RANK表达升高,RANKL表达下降,表明OPG/RANKL/RANK信号通路可能参与了SA⁃AKI的病理生理过程。

芜菁酸性多糖对肺损伤小鼠过氧化损伤及细胞凋亡的影响

研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺损伤小鼠的保护作用及机制。建立LPS诱导肺损伤小鼠模型进行BRAP-1干预,通过生化试剂检测小鼠肺泡灌洗液中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢(H_(2)O_(2))水平;Western blot法检测肺组织中蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase,PI3K)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phospho-protein kinase B,p-AKT)蛋白表达水平及与凋亡相关的B淋巴细胞瘤-2样蛋白关联X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,BAX)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2样蛋白(B-cell lymphoma-2,BCL-2)表达水平。结果表明与模型组相比,BRAP-1不同程度降低小鼠肺泡灌洗液中MDA、MPO、H_(2)O_(2)及肺组织中PI3K、AKT蛋白表达水平以及凋亡因子BAX、凋亡关键因子Cleaved Caspase-3蛋白表达水平,增强抗凋亡因子BCL-2蛋白表达水平。研究表明,BRAP-1可通过清除肺损伤小鼠的肺组织自由基、抑制氧化应激,调节肺组织细胞凋亡,从而起到保护作用。

玄参提取物对脑缺血再灌注损伤小鼠氧化应激及炎症反应的影响

目的探讨玄参提取物对脑缺血再灌注损伤(CRI)小鼠氧化应激及炎症反应的影响。方法将60只SPF级雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为模型组、正常组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组,每组各12只。模型组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组建立小鼠CRI模型。建模前,低、高剂量组小鼠术前分别给予5、20 mL/kg玄参提取物灌胃;阳性对照组给予20 mL/kg辛伐他汀灌胃;模型组和正常组术前分别给予等量0.9%氯化钠注射液灌胃,均1次/d,连续5 d。采用Bederson评分法和Longa评分法评价小鼠神经功能;采用Morris水迷宫实验测定小鼠找到平台的时间(潜伏期)和穿越平台次数;采用硫代巴比妥酸比色法测定血清丙二醛(MDA)水平,采用黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化歧化酶(SOD)水平;采用ELISA法测定血清IL-6、IL-8和TNF-α水平;测量小鼠脑梗死体积百分比。结果与正常组比较,其他各组Bederson评分、Longa评分、MDA水平、IL-6、IL-8和TNF-α水平、脑梗死体积百分比均明显增高,而SOD水平明显降低(均P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、低剂量组与高剂量组Bederson评分、Longa评分、MDA水平、IL-6、IL-8和TNF-α水平、脑梗死体积百分比均明显降低,而SOD水平明显增高(均P<0.05);与阳性对照组和低剂量组比较,高剂量组Bederson评分、Longa评分、脑梗死体积百分比、MDA水平、IL-6、IL-8和TNF-α水平均明显降低,而SOD水平明显增高(均P<0.05)。其他各组第1、2、3、4天潜伏期均长于正常组(均P<0.05);阳性对照组、低剂量组与高剂量组第1、2、3、4天潜伏期均短于模型组(均P<0.05);高剂量组第1、2、3、4天潜伏期均短于阳性对照组和低剂量组(均P<0.05)。结论玄参提取物对脑缺血再灌注损伤小鼠有较好的保护作用,可显著改善小鼠神经功能,明显缩小小鼠脑梗死体积,其机制可能与改善氧化应激及减轻炎症反应有关。

诺丽多糖对电离辐射损伤小鼠的防护作用及对肠道菌群的影响

目的:探讨诺丽多糖对小鼠电离辐射损伤的防护和肠道菌群的调节作用。方法:将50只KM雄性小鼠随机分为正常组、模型组、诺丽多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组,采用医用电子直线加速器进行全身一次性X射线辐照建立急性辐射损伤小鼠模型。观察辐射后小鼠的生存质量,检测辐射后72 h小鼠血清和肝脏组织相关生化指标;通过小鼠粪便的16S rRNA测序分析肠道菌群多样性。结果:诺丽多糖能够改善辐射损伤小鼠的生存质量,提高脏器指数、小鼠外周血白细胞(WBC)数、脾结节数、骨髓DNA含量,降低骨髓嗜多染红细胞微核(MN-PCE)率,提高血清及肝脏中的抗氧化酶过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,降低丙二醛(MDA)含量。与MC组相比,诺丽多糖高剂量组外周白细胞数和脾结节数分别增加了46.85%和38.23%,骨髓DNA含量提高了51.95%,MN-PCE降低率为38.84%,并对辐射后小鼠的氧化应激均有不同程度的改善。此外,诺丽多糖能够促进辐射损伤小鼠肠道菌群向有益于宿主健康的方向生长,同时促进益生菌的生长并抑制有害菌的定植,恢复电离辐射引起的肠道菌群变化。结论:诺丽多糖对X射线所致的电离辐射损伤小鼠具有明显的防护作用,且对辐射造成的肠道菌群紊乱有一定的恢复作用。

陈皮复合固体饮料制备工艺及其对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用

[目的]以药食同源的陈皮、山楂、葛根为主要原料,开发一种具有解酒功能的固体饮料,并探究其对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用。[方法]以浸膏得率和总黄酮含量为标准,采用正交试验选取最佳提取工艺;以感官评价、成型率、溶化性的综合评分为指标,采用单因素试验优化成型工艺。采用52%酒精灌胃的方法建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,检测陈皮复合固体饮料对模型小鼠肝脏指数,血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),肝组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,苏木素—伊红(HE)染色分析各组肝脏病理变化。[结果]陈皮复合固体饮料最佳制备工艺:3味药材浸泡30 min后提取2次,第一次料液比1∶12(g/mL)、提取时间2.0 h,第二次料液比1∶10(g/mL)、提取时间1.5 h;经浓缩、干燥、粉碎后得到干膏粉;干膏粉与麦芽糊精1∶1混合,加入1.0%的罗汉果甜苷,并以90%乙醇作为润湿剂进行湿法制粒。动物试验表明:与模型组相比,陈皮复合固体饮料组的AST、ALT、TG、TC、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.01或P<0.05),GSH、SOD含量增加(P<0.01或P<0.05),且肝组织病理切片显示给药组小鼠肝损伤程度均有显著改善。[结论]陈皮复合固体饮料色泽均匀、溶解性好、甜度适中、口感细腻,对急性酒精性肝损伤具有良好的保护作用。

脊髓背根神经节ZXDC介导CCL2对慢性压迫性 神经损伤小鼠神经性疼痛的作用

目的探讨脊髓背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中转录因子锌指X连锁复制C(zinc finger X-linked duplicated C,ZXDC)介导CCL2/CCR2信号通路对慢性压迫性神经损伤(chronic construction injury model,CCI)诱导神经性疼痛的作用及机制。方法构建小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤模型,免疫荧光染色、Western blot法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测正常情况和CCI造模后DRG中ZXDC及CCL2表达变化;将实验动物分为假手术(Sham)组、CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组;Western blot法和免疫荧光染色检测各组小鼠CCI造模后各时间点DRG中ZXDC、CCL2和CCR2表达,RT-qPCR检测DRG中促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达,机械性缩足反射测试检测神经性疼痛行为改变。结果ZXDC表达定位在DRG大、中、小神经元。CCI损伤后1~3天DRG中ZXDC和CCL2蛋白和mRNA表达显著增高,CCI后7天二者表达显著降低,ZXDC和CCL2mRNA表达量呈正相关(P均<0.05)。CCI后3天,与Sham组比较,CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1βmRNA表达显著增高,其中CCI+AAV-ZXDC siRNA组较CCI+AAV-NC组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1βmRNA显著降低(P均<0.05)。与Sham组比较,CCI+AAV-ZXDC siRNA组和CCI+AAV-NC组CCI后各时间点机械缩足阈值均显著降低,其中CCI后7天,CCI+AAV-ZXDC siRNA组机械缩足阈值显著高于CCI+AAV-NC组(P均<0.05)。结论脊髓背根神经节ZXDC基因敲减通过抑制CCL2/CCR2信号通路介导CCI诱导的神经性疼痛。

针灸结合三氧直肠灌注对不完全性脊髓损伤小便障碍的疗效研究

目的:观察针灸结合三氧直肠灌注对不完全性脊髓损伤小便障碍患者逼尿肌损伤修复及膀胱功能、应激状态和尿动力学的影响。方法:选择2022年7月—2023年7月于广西壮族自治区江滨医院治疗的86例不完全性脊髓损伤小便障碍患者,按照随机数字表法分为两组,三氧直肠灌注组43例,基础治疗的同时给予患者三氧直肠灌注治疗;针灸联合组43例,三氧直肠灌注组治疗基础上给予患者针灸治疗。比较两组临床疗效,治疗前、后评价中医证候,记录两组患者每次排尿量、膀胱安全容量,给予患者国际下尿路功能症状(LUTS)、尿失禁生活质量问卷(I-QOL)评价,测定膀胱顺应性、充盈期膀胱压力、最大尿流速时逼尿肌压力,检测热休克蛋白70(HSP70)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:针灸联合组总有效率较三氧直肠灌注组高(P<0.05);中医证候评分较三氧直肠灌注组降低(P<0.01);膀胱安全容量、每次排尿量大于三氧直肠灌注组(P<0.01),I-QOL评分高于三氧直肠灌注组(P<0.01),LUTS评分少于三氧直肠灌注组(P<0.01);最大尿流速时逼尿肌压力、充盈期膀胱压力低于三氧直肠灌注组(P<0.05),膀胱顺应性高于三氧直肠灌注组(P<0.01);HSP70、ROS水平低于三氧直肠灌注组(P<0.05),SOD水平高于三氧直肠灌注组(P<0.01)。结论:针灸结合三氧直肠灌注治疗不完全性脊髓损伤小便障碍患者,可抑制氧化应激,促进修复受损逼尿肌,改善尿动力学,提升膀胱功能、排尿功能、临床疗效及生活质量。

奥拉帕利对内毒素致急性肺损伤小鼠的保护作用

目的探讨奥拉帕利对内毒素致急性肺损伤小鼠的保护作用。方法24只SPF级雄性C57BL/6小鼠,8~10周龄,体质量20~30 g,按随机数字表法分为4组(n=6):control组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组。LPS组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组采用1 mg/mL LPS雾化构建ALI模型,每天30 min,连续3 d。5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组在第3天雾化后,即刻分别腹腔注射5,10 mg/kg奥拉帕利;control组腹腔注射等量生理盐水。给药后观察小鼠行为改变等一般情况,并于给药后24 h后处死小鼠,检测肺湿/干重比;BCA法分别测定血清和肺泡灌洗液总蛋白的含量,计算肺通透性指数(lung pemeability index,LPI);ELISA法测肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β的浓度;酶比色法测肺组织脂质过氧化丙二醛(malondialdehyde,MDA)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的活性;HE染色测定肺组织损伤程度评分;免疫组化评估肺组织Caspase-1的表达水平。结果腹腔注射奥拉帕利后可见小鼠均存活,精神较前无明显烦躁及萎靡,无恶心、呕吐、腹泻、食欲减退等症状。与control组比较,LPS组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著升高(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著升高(P<0.05),肺组织MDA的含量和MPO的活性显著升高(P<0.05),肺组织SOD的活性和T-AOC的含量显著下降(P<0.05),肺组织Caspase-1的表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著升高(P<0.05)。与LPS组比较,5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著降低(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著降低(P<0.05),肺组织MDA的含量和MPO的活性显著降低(P<0.05),SOD的活性和T-AOC的含量显著升高(P<0.05),Caspase-1的表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著降低(P<0.05)。与5 mg/kg奥拉帕利组比较,10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著降低(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著降低(P<0.05),MDA的含量和MPO的活性显著降低(P<0.05),SOD的活性和T-AOC的含量显著升高(P<0.05),Caspase-1的表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著降低(P<0.05)。结论腹腔注射奥拉帕利能够减轻内毒素致ALI小鼠肺部及全身炎症反应、肺水肿、肺组织损伤,降低肺组织氧化应激水平,通过抑制Caspase-1/IL-1β信号通路减轻细胞焦亡,且剂量为10 mg/kg时未见明显不良反应,疗效更佳。

汉黄芩素对脂多糖诱导的急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 探讨汉黄芩素(WOG)对脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤的保护作用。方法 用LPS试剂诱导C57BL/6J小鼠构建脓毒症致急性肾损伤模型。以未经处理的C57BL/6小鼠作为常规对照组。24只小鼠被随机分配到四个组别:常规对照(NC)组、WOG(WOG 12.5 mg/kg)组、LPS(LPS 10 mg/kg)组以及LPS+WOG(LPS 10 mg/kg+WOG 12.5 mg/kg)组。检测小鼠血肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平。聚合酶链式反应(PCR)检测小鼠肾损伤分子1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的表达情况。苏木精-伊红(HE)染色和糖原(PAS)染色观察肾脏病理损伤程度。免疫组化检测肾组织的炎性标志物白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达程度。Western blot法检测肾脏组织核因子κB(NF-κB)信号通路亚基P65和PP65蛋白表达变化的情况。结果 相较于NC组,LPS组CRE和BUN上升(FCRE=60.90,P<0.001;FBUN=82.13,P<0.001);相较于LPS组,LPS+WOG组CRE和BUN降低(P<0.001)。PCR检测结果显示,相对于NC组,LPS处理的小鼠其肾脏内的KIM-1和NGAL mRNA表达增加(FKIM-1=146.3,FNGAL=161.2,均P<0.001),而在LPS+WOG组中,KIM-1和NGAL mRNA表达下降(均P<0.01)。肾脏组织病理学检查显示,与NC组相比,LPS组小鼠肾组织肾小管扩张明显、炎症细胞浸润;与LPS组相比,LPS+WOG组肾小管扩张数量减少和炎症细胞浸润减少(FHE=721.4,FPAS=518.9,P<0.001)。免疫组化染色检测结果显示,相较于NC组,LPS处理的小鼠中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达量上升(FIL-1β=114.6,FIL-6=108.9,FTNF-α=251.6,均P<0.001);而对比LPS组,LPS+WOG组中的这些指标则有所减少(均P<0.01)。使用Western blot方法进一步研究表明,相较于NC组,LPS处理的小鼠其NF-κB信号途径已被激活并产生高磷酸化状态(FPP65=13.02,P<0.01),然而对比LPS组时,LPS+WOG组的该路径却表现出相反的效果,即活性减弱且磷酸化程度降低(P<0.01)。结论 WOG能有效地阻断LPS引发的急性肾损伤模型小鼠的NF-κB信号途径,从而削弱由LPS引起的急性肾损伤小鼠肾脏的炎性应答及其组织损害。

黄精多糖对X射线辐射损伤小鼠外周血象及肠道菌群的影响研究

目的探讨黄精多糖对X射线全身照射小鼠造血系统损伤和肠道菌群的作用。方法30只C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、照射对照组和黄精多糖给药组。分析照射前和照射后14 d内小鼠外周血白细胞、血小板和红细胞计数和不同分类白细胞百分比变化;16S rRNA高通量测序分析照后7 d小鼠肠道菌群组成和结构。结果黄精多糖组外周血白细胞数在照射后第4、7、10天,红细胞数在第1、14天均明显高于照射对照组(P<0.05),黄精多糖增加了照射后小鼠淋巴细胞百分比,降低了中性粒细胞和单核细胞的百分比。各组小鼠肠道菌群α多样性无明显改变。β多样性分析显示肠道菌群结构发生改变。功能预测分析显示,黄精多糖组参与低聚木糖、核黄素、吲哚-3-甲醛等11种物质代谢的微生物丰度明显高于正常组和照射对照组。结论黄精多糖能有效保护辐射引起的造血损伤,改变辐射所致小鼠肠道菌群结构组成和功能,为开发新型天然产物辐射防护剂提供理论依据。

压力性损伤小组管理模式对临床压力性损伤护理质量的影响研究

探讨压力性损伤小组管理模式对临床压力性损伤护理质量的影响。方法 以摸球法将2021.7—2023.7期间收录的80例压力性损伤高危患者分为对照组、观察组后对应给予常规护理、压力性损伤小组管理模式。结果 较之对照组,观察组护理质量评分更高,压力性损伤发生率更低,依从性、满意度更高,P<0.05。结论 压力性损伤高危患者接受压力性损伤小组管理模式的价值显著。

党参多糖通过调控MAPK/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的保护作用

目的观察党参多糖对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织的保护作用,并探讨其作用机制。方法50只雄性昆明小鼠随机分为对照组,模型组,地塞米松组,党参多糖高剂量组(300 mg/kg)和党参多糖低剂量组(150 mg/kg)5个组。采用腹腔注射LPS法建立ALI小鼠模型。除对照组外,其余小鼠均根据分组给予灌胃给药。多参数肺功能检测系统检测小鼠0.3 s用力呼气量(FEV0.3)和用力肺活量(FVC)及其比值,苏木精-伊红(HE)染色法检测小鼠肺组织病理学变化,瑞氏-吉姆萨染色法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞分类和计数,ELISA法检测BALF中IL-1β、IL-6、髓过氧化物酶(MPO)、TNF-α水平,Western blot法检测p-p38、p-IκB-α、p-p65蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组小鼠出现了明显的肺病理损伤,FEV 0.3、FVC、FEV0.3/FVC检测值显著降低,肺组织湿质量/干质量(W/D)、BALF中性粒细胞、淋巴细胞、IL-1β、IL-6、MPO、TNF-α水平、p-p38 MAPK、p-IκB-α、p-p65蛋白表达显著增高(P<0.05)。而党参多糖可缓解模型组小鼠上述变化。结论党参多糖可通过抑制MAPK/NF-κB通路,减轻急性肺损伤模型小鼠肺组织病理损伤,降低炎症因子水平,改善肺功能。

金昭胶囊对慢性酒精性肝损伤小鼠的保护作用

目的:基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子(Nrf2)/核因子κB通路研究金昭胶囊对慢性酒精性肝损伤小鼠的保护作用。方法:小鼠按体质量随机区组法分为空白组,模型组,阳性药组,金昭胶囊低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组小鼠每日灌胃50%乙醇10 mL/kg。各组持续给药4周后,观察小鼠状态,测定血清转氨酶活性、肝组织乙醇及脂肪代谢相关酶活性、抗氧化酶活性及Keap1/Nrf2/核因子κB通路相关指标并取肝脏进行苏木精-伊红(HE)病理学检查。结果:与模型组比较,金昭胶囊各剂量组小鼠血清转氨酶活性、肝组织乙醇及脂肪代谢相关酶活性、抗氧化酶水平、炎症介质中白细胞介素-10(IL-10)水平、Nrf2 mRNA水平及Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)表达水平均显著升高(P<0.05、P<0.01);肝组织炎症介质中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平、Keap1mRNA、核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)mRNA水平及Keap1、NF-κB p65和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIκ-Bα)表达均显著降低(P<0.05、P<0.01)。结论:金昭胶囊具有保护慢性酒精性肝损伤的功效,其作用机制可能与增强肝组织中乙醇代谢酶、抗氧化酶活性,调节炎症介质水平和Keap1/Nrf2/核因子κB通路各指标mRNA及蛋白表达水平相关。

酵母抽提物与姜黄素复合对急性酒精性肝损伤小鼠肠道菌群的调节作用

目的:研究酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤的预防保护作用及其对肠道菌群的调节作用,并探讨其保护作用机制。方法:建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,分别给予酵母抽提物和姜黄素+酵母抽提物复合物,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotrans-ferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)和肝组织中总谷胱甘肽(Toal glutathione,T-GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(Malonicdialdehyde,MDA)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)的变化,观察肝组织病理切片损伤情况,分析肠道菌群等指标。结果:与模型组相比,酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物能够降低小鼠ALT、AST、MDA、TC和TG的水平,提高GSH-Px、TGSH的水平;肝组织切片表明,受试物明显改善酒精引起的肝细胞脂肪浸润和炎症浸润;肠道菌群分析表明,酒精性肝损伤小鼠肠道菌群结构发生变化,姜黄素+酵母抽提物复合物能有效恢复因酒精改变的不动杆菌属、普雷沃菌属、瘤胃球菌属的相对丰度,效果优于酵母抽提物。结论:酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与调节氧化应激、脂质代谢、肠道菌群有关。

顺铂致肝损伤小鼠Notch信号通路差异基因筛选及针灸对其调控的研究

目的通过筛选顺铂(Cisplatin,DDP)致肝损伤小鼠肝组织中Notch信号通路显著性差异基因,探讨针灸改善肝损伤的作用机制。方法雄性KM小鼠随机分成空白组、模型组、针刺组、艾灸组、阻断剂针刺组、阻断剂艾灸组,每组10只。空白组以10 mg·kg^(-1)剂量腹腔注射0.9%NaCl溶液,其余各组腹腔注射同等剂量的DDP溶液,24 h后模型成功。针刺组、阻断剂针刺组取“大椎”和双侧“肝俞”“肾俞”“足三里”干预,艾灸组、阻断剂艾灸组取相同腧穴干预,阻断剂组均于治疗前30 min腹腔注射同等剂量的DAPT。连续干预5天,于第6天取肝脏左外侧叶备检DEGseq、免疫组化以及透射电镜。结果DEGseq初步筛选出57个与Notch信号通路相关差异基因,7个热点基因Notch1、Hes1、Adam17、Lfng、Numb、Hdac1、Notch2与肝损伤关系密切。免疫组化法对7个热点基因进一步筛选,与空白组比,模型组中Notch1、Hes1、Adam17、Lfng、Numb、Notch2、Hdac1蛋白含量上调,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比,其余4组中Notch1、Hes1、Adam17、Lfng蛋白含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Numb、Hdac1、Notch2各组间差异无统计学意义(P>0.05)。超微病理示针灸对损伤的肝细胞具有明显的修复作用,且优于阻断剂组。结论针刺和艾灸可能通过良性调节与Notch信号通路显著性相关的差异基因Notch1、Hes1、Adam17、Lfng的表达,抑制Notch信号通路异常激活,并能改善受损的肝细胞微观结构,减轻DDP化疗所致肝损伤,这可能是针灸减轻DDP致肝损伤的机制之一。

爬岩红提取物对化学性肝损伤小鼠的保护作用

分别用体积分数0.5%CCl_(4)、50%乙醇溶液建立小鼠急性肝损伤模型,研究爬岩红水提物、醇提物对CCl_(4)和酒精所致的肝损伤小鼠的保护作用。结果显示,爬岩红水提物、醇提物均能降低CCl_(4)肝损伤小鼠血清ALT活性、肝组织MDA水平,升高肝组织GSH-PX、T-SOD、CAT、白蛋白水平,减轻CCl4肝损伤小鼠肝组织的病理变化程度,且二者的保肝作用无显著差异(P>0.05);爬岩红水提物、醇提物均能降低酒精性肝损伤小鼠血清ALT活性、肝组织MDA和TG水平,升高肝组织GSH、T-SOD水平,减轻酒精性肝损伤小鼠肝组织的病理变化程度,且水提物的效果更为显著(P<0.05)。爬岩红水提取物、醇提取物对CCl_(4)和酒精所致的肝损伤小鼠均有保护作用,水提物对酒精性肝损伤的保护作用更好。

清胰汤对肝缺血再灌注损伤小鼠的肝脏保护作用及铁死亡机制研究

目的 观察清胰汤对肝缺血再灌注损伤小鼠肝脏的保护作用并探讨其机制。方法 30只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为5组:假手术组、模型组及清胰汤低、中、高剂量组,每组6只。各清胰汤组小鼠于造模前7 d连续灌胃相应剂量药物,假手术组及模型组小鼠灌胃生理盐水。以夹闭小鼠肝左叶及肝中叶动静脉血流的方法构建70%肝脏缺血再灌注损伤模型,缺血60 min,再灌注12 h。以ELISA法检测血清肝酶指标;HE染色观察肝组织缺血情况;DHE荧光探针观察肝细胞活性氧(ROS)水平;酶标仪检测肝组织亚铁离子含量及脂质过氧化水平(MDA);Western blotting法及免疫组化染色检测肝组织GPX4表达情况。结果 清胰汤中、高剂量均可以明显改善小鼠肝缺血再灌注损伤,有效降低小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平(P<0.05),减少肝组织缺血坏死情况,降低肝细胞ROS水平,并且能够有效降低肝组织亚铁离子含量及脂质过氧化水平(P<0.05),恢复GPX4活性(P<0.05)。结论 清胰汤中、高剂量均可减轻模型小鼠的肝脏氧化应激,减少肝缺血坏死,改善肝功能,对于肝缺血再灌注损伤的肝脏具有保护作用,其潜在机制可能与干预肝铁死亡的发生有关,且其作用呈剂量依赖性。

丹酚酸B对肝损伤小鼠肠道菌群和短链脂肪酸代谢的影响

本研究旨在探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对小鼠肝损伤的干预作用,以及对肠道菌群和短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)代谢的影响。通过皮下注射20%CCl 4溶液建立小鼠肝损伤模型,在造模的同时给予Sal B和阳性药2-脱氧-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose)灌胃干预,干预结束后通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)、Masson、天狼星红染色观察小鼠肝脏病理变化;采用生化试剂盒检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;运用16S rRNA测序技术检测小鼠肠道菌群结构变化;通过气相色谱法测定小鼠粪便中SCFAs的含量。结果显示,Sal B可以显著降低CCl 4诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST水平(P<0.001),并减轻肝组织病理损伤。测序结果显示,Sal B可以部分恢复肝损伤小鼠的肠道菌群结构,同时显著增加肠道中异丁酸、异戊酸、丙酸和戊酸的含量(P<0.001)。本实验揭示了Sal B可以减轻CCl 4所诱导的小鼠肝损伤,机制可能与其对肠道菌群和SCFAs紊乱的调节有关。