基于ciRS-7/miR-7/FAK通路研究掌叶半夏水提物对宫颈癌的抑制作用

目的:探讨掌叶半夏水提物(pinellia extract,PE)通过调节小脑变性相关蛋白1反义转录物(circular RNA sponge for microRNA-7,ciRS-7)/microRNA-7(miR-7)/着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)通路对宫颈癌细胞的抑制作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞(HeLa),分为HeLa细胞对照组和HeLa细胞PE干预组(0.15 g·L^(-1)),Transwell小室实验检测HeLa细胞侵袭及迁移能力。18只雌性BALB/c-nu裸小鼠随机分为正常对照组、皮下移植瘤模型组和PE干预组,每组6只。取对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,调整密度为1×10^(7) mL^(-1),除正常组外,其余组裸小鼠颈背部皮下注射接种人宫颈癌HeLa细胞0.2 mL建立移植瘤模型。当瘤体直径大约5 mm时,PE干预组裸鼠腹腔注射PE 10 mg·kg^(-1),其余组给予同等体积的生理盐水,每天1次,连续3周。检测小鼠的肿瘤体积,并计算抑瘤率;RT-qPCR法检测各组小鼠肿瘤组织中ciRS-7 mRNA及miR-7 mRNA的表达水平;Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中FAK及p-FAK的蛋白表达水平。结果:与HeLa细胞对照组比较,HeLa细胞PE干预组HeLa细胞侵袭及迁移数目显著降低(P<0.01)。与正常对照组比较,皮下移植瘤模型组小鼠ciRS-7 mRNA、FAK蛋白表达水平显著升高(P<0.05),miR-7 mRNA、p-FAK蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与皮下移植瘤模型组比较,PE干预组荷瘤裸鼠肿瘤体积明显变小(P<0.01),肿瘤质量明显降低(P<0.01),ciRS-7 mRNA、FAK蛋白表达水平显著降低(P<0.05),miR-7 mRNA、p-FAK蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:PE可抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭及迁移,并抑制宫颈癌肿瘤的生长,其机制可能与调节ciRS-7/miR-7/FAK信号通路有关。