排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:采用逆转录定量PCR方法测定不同剂量排钱草总生物碱对大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的相对表达值。结果:高、中剂量组大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达显著低于模型组,P<0.05。与正常对照组相比差异无显著性意义。结论:排钱草总生物碱能显著降低猪血清所致免疫性肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。

排钱草总生物碱对实验性肝纤维化动物相关指标的作用

目的 观察排钱草总生物碱对实验性肝纤维化的作用效果及其作用机制。方法 采用四氯化碳 (CCl4 )诱导肝纤维化模型 ,分别按阻断肝纤维化实验研究方法和治疗肝纤维化实验研究方法 ,从血清相关指标、肝脏羟脯氨酸含量和病理组织学等观察排钱草总生物碱的疗效 ,以秋水仙碱作为阳性对照药。结果 排钱草总生物碱能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT、HA、γ 球蛋白及肝组织羟脯氨酸含量。肝脏病理组织学检查亦显示良好的作用效果。

排钱草总生物碱对化学损伤性肝纤维化大鼠肝脏病理及超微结构变化的影响

目的 观察排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠肝脏组织病理改变的影响。方法 用四氯化碳 (CCL4)复制肝纤维化大鼠动物模型。结果 动物造模后光镜下肝细胞变性坏死程度加重、胶原纤维分布明显增多。电镜下肝细胞及细胞器形态结构破坏明显 ,贮脂细胞、枯否氏细胞增多 ,胶原纤维分布广泛。经排钱草总生物碱治疗后 ,肝组织病变减轻 ,上述与纤维化有关细胞及胶原纤维明显减少。结论 排钱草总生物碱可以减轻CCL4致肝纤维化的病变程度 ,抑制肝纤维化的发展。

排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠血清干扰素-γ和肝脏组织病理学的影响

目的探讨排钱草总物碱抗肝纤维化作用与干扰素-γ(IFN-γ)的关系。方法腹腔注射猪血清复制免疫性肝纤维化大鼠动物模型,给药8周后,测定大鼠血清IFN-γ的含量并观察肝脏组织结构变化。结果排钱草总生物碱高、中剂量组大鼠血清IFN-γ的含量显著高于模型对照组,具有显著的统计学意义(P<0.001)。与模型对照组比较,肝脏病理切片观察各给药组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻。结论排钱草总生物碱能提高免疫性肝纤维化大鼠血清IFN-γ的含量,改善肝组织纤维化程度,可能是其抗肝纤维化作用机理之一。

排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠肝组织Hyp和血清HA、LN、PCⅢ的影响

目的 :观察排钱草总生物碱对大鼠免疫性肝纤维化的影响。方法 :采用猪血清腹腔注射建立大鼠免疫性肝纤维化模型 ,观察排钱草总生物碱对实验大鼠血清透明质酸 (HA)、层粘连蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )及肝脏羟脯氨酸 (Hyp)含量的影响。结果 :排钱草总生物碱可有效对抗猪血清所致肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ及肝脏Hyp含量升高。结论 :排钱草总生物碱有抗肝纤维化作用。

排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞相关细胞因子蛋白表达的影响

目的探讨排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞T6(HSC-T6)中血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、转化生长因子βⅠ型受体(TβR-Ⅰ)蛋白表达的影响。方法将体外培养HSC-T6细胞分为空白对照组、阳性对照组(1.0μg/ml秋水仙碱)及37.5μg/ml、75.0μg/ml、150.0μg/ml排钱草总生物碱组。空白对照组加入培养液,其他组加入相应药物作用48 h后,提取总蛋白,免疫印迹法检测HSC-T6中PDGF-BB、TGF-β1、PI3K、TβR-Ⅰ蛋白表达水平。结果阳性对照组、37.5μg/ml、75.0μg/ml及150.0μg/ml排钱草总生物碱组的TGF-β1相对表达水平低于空白对照组(均P<0.05);5组PDGF-BB、PI3K及TβR-Ⅰ蛋白相对表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论排钱草总生物碱可下调HSC-T6中的TGF-β1蛋白表达水平,这可能是其抗肝纤维化的作用机制。

壮药排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞胶原和细胞因子生成的影响

目的:研究排钱草总生物碱对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)相关胶原和细胞因子的分泌影响。方法:体外培养HSC-T6细胞,将排钱草总生物碱(终浓度为500、250、125、62.5、31.25、15.625μg/m L)作用于细胞48h后,以MTT法检测细胞存活率,求出半数抑制浓度(IC50),根据IC50选取无细胞度浓度进一步研究;收集细胞上清液,用ELISA法分别检测Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)、转化生长因子(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)的含量。结果:排钱草总生物碱能明显抑制HSC-T6细胞的增殖,其抑制作用与药物终浓度呈量效关系,求得IC50为337μg/m L;并显著降低HSC-T6细胞生成的COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1,PDGF含量,与空白对照组比较,P<0.05或P<0.01。结论:排钱草总生物碱对HSC-T6细胞增殖有显著抑制作用,并能降低COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1、PDGF的含量。

排钱草总生物碱对人肝星状细胞增殖及肝纤维化相关胶原蛋白、细胞因子的影响

目的:观察排钱草总生物碱对人肝星状细胞系Lx-2增殖及分泌肝纤维化相关胶原、细胞因子的影响。方法:Lx-2细胞调整细胞密度为1.0×105个/mL,以0.1 mL/孔接种于37℃培养,设空白对照组,排钱草总生物碱100,75,55,40,30,20,15,10 mg.L-1组,给药48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测Lx-2细胞增殖;Lx-2细胞调整细胞密度为1×105个/mL,以0.1mL/孔接种于37℃培养,设空白对照及秋水仙碱(6.25 mg.L-1),排钱草总生物碱40,20,10 mg.L-1组,给药48 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测Lx-2细胞上清液Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)和转化生长因子β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子(PDGF)含量。结果:与对照比较,排钱草总生物碱在质量浓度为100,75,55,40,30,20,15,10 mg.L-1能够浓度依赖性的抑制Lx-2细胞增殖,抑制率分别为49.4%,25.9%,24.7%,15.3%,15.3%,12.9%,2.35%,1.18%;与对照相比,排钱草总生物碱40 mg.L-1能显著抑制COLⅠ,COLⅢ,COLⅣ和TGFβ1,PDGF的分泌(P<0.05或者P<0.01)。结论:排钱草总生物碱对Lx-2细胞的增殖和COLⅠ,COLⅢ,COLⅣ,TGFβ1,PDGF的分泌有抑制作用。

排钱草总生物碱通过抑制NF-κB通路对急性肝衰竭大鼠的保护作用

目的探讨排钱草总生物碱通过抑制核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性肝衰竭(ALF)大鼠的保护作用及其机制。方法Wistar雄性大鼠随机分成对照组、模型组和排钱草总生物碱组,ip D-半乳糖胺(D-GalN)(400 mg/kg)/脂多糖(LPS)(10μg/kg)建立ALF大鼠模型。对照组和模型组大鼠均ig 3 g/kg生理盐水;排钱草总生物碱组大鼠ig排钱草总生物碱3 g/kg,给予药物干预14 d后,观察排钱草总生物碱对大鼠一般情况的影响,测定ALF大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平并用HE染色观察排钱草总生物碱对ALF大鼠肝组织病理学的影响,采用Western blotting法检测各组大鼠肝组织NF-κB及Iκβ磷酸化的表达水平。结果排钱草总生物碱可有效降低模型大鼠血清ALT、AST水平(P<0.001);HE染色显示,排钱草总生物碱可以使模型大鼠肝组织坏死程度减轻,可见部分增生肝细胞,炎性浸润减轻。Western blotting结果显示,排钱草总生物碱可以抑制模型大鼠肝组织p-NF-κB和p-Iκβ表达升高,从而抑制NF-κB通路的激活。结论排钱草总生物碱可能通过抑制NF-κB通路发挥其对ALF大鼠的保肝作用。