遗传性视网膜色素变性3型基因位点单拷贝探针库的构建

目的：构建遗传性视网膜色素变性３型（ＲＰ３）基因位点的单拷贝探针库。方法：对包含ＲＰ３位点的酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＨＯ５１２进行亚克隆，用人总ＤＮＡ杂交法去除重复顺序克隆。结果：构成ＲＰ３位点特异的单拷贝探针库。结论：该库对于构建ＲＰ３位点精细的Ｃｏｓｍｉｄ克隆重叠群及最终识别ＲＰ３基因提供了一种有效的工具。

基于通用探针库的实时荧光PCR技术快速检测阳性血培养瓶中的细菌病原体

为从阳性血培养瓶中快速检测8种细菌,选取Roche公司通用探针库的锁核酸探针进行基于实时荧光PCR技术的一组试验。为鉴定菌种根据革兰氏染色的结果,对四组靶向于一个革兰氏阳性菌和一个革兰氏阴性菌的双重实时荧光PCR反应进行优化。检测的灵敏度是1-10CFU(菌落形成单位)/PCR反应混合物。试验的特异性和交叉反应由28个来自于ATCC(美国模式培养物集存库)的参考菌株和77种血培养阴性的标本进行鉴定。在这些试验样品中没有观察到交叉反应,因此证明试验100%的特异性。72种此前鉴定过的临床病毒株通过实时荧光PCR技术进行测试,验证实时荧光PCR试验的精确度和可行性。此外,用实时荧光PCR试验55类阳性血培养样本,通过生化分析评价,50(90.9%)类被鉴定为相同物种。实时荧光PCR与传统的方法有98.2%的一致。实时荧光PCR可以用来作为从阳性血培养中早期检测常见病原体方法的补充。