耐药质粒在肠道杆菌间的接合传递研究

选用１３ 种抗菌药物对１８ 株肠道杆菌进行药敏试验、质粒检测并用传统及改良两种接合转移试验方法，以５ 株伤寒杆菌的不相容性 Ｃ群（ Ｉｎｃ Ｃ） Ｒ 质粒、６ 株大肠杆菌及２ 株鼠伤寒杆菌的 Ｒ 质粒作供体，研究其在肠道杆菌间的传递。结果显示， Ｒ 质粒能在４ 种肠道杆菌间互相传递，其中伤寒杆菌 Ｉｎｃ Ｃ 群 Ｒ 质粒能在这４ 种菌中稳定复制并表达耐药性。质粒的可传递性给阻断耐药性的传播和疾病的防治带来很大困难，单纯消除某个菌中的耐药质粒已难以奏效，正常菌群中庞大的耐药基因库是致病性耐药菌株流行的潜在危险；合理选择、控制抗生素的使用，降低“选择性压力”显得尤为重要。

烧伤病区绿脓杆菌R质粒的接合传递试验

为了探讨烧伤病区绿脓杆菌耐药性增多的原因,以便研究其防治对策,我们进行了绿脓杆菌R质粒的接合传递试验.1 材料和方法1.1 菌株 ①供菌体:绿脓杆菌系1989年9月至1989年12月从烧伤病区环境和患者创面采集,经乙酰胺平板筛选后,用生物学方法鉴定证实.

产毒性大肠杆菌R质粒体外和动物体内接合传递试验的研究

本文报告用人源产毒性大肠杆菌(ETEC)84010、84053、84056菌株作为供体菌,与受体菌C_(606)及绿腋杆菌p97菌株,分别在体外及乳鼠、小鼠、豚鼠和家兔体内进行了R质粒接合传递试验。体外接合试验表明:3株供检测的大肠杆菌均能将其部分抗性传递给受体菌C_(600)。接合频率为10^(-3)～10^(-4)。84010和84056菌对Tc的抗性还能传递给绿脓杆菌P97。动物体内接合试验表明:3株ETEC携带的R质粒在乳鼠、小鼠、豚鼠和家兔体内均能与受体菌C_(600)发生接合。供体菌对AP、TC和SM的抗性都能传递给受体菌。而且,84010和84056菌对CM的抗性可分别在家兔和豚鼠体内接合传递。

22株伤寒杆菌R质粒的分析与接合传递

我们对1988年附院传染病科分离的22株伤寒杆菌进行了R 质粒的检测与接合传递,并对其耐药类型与R 质粒带的关系进行了分析,现将结果报告如下.一、材料与方法1.菌株来源22株伤寒杆菌由附院传染病科提供,为1988年流行菌株.所有菌株均经形态、染色、系列生化反应及血清学反应鉴定为伤寒沙门氏菌.2.药敏试验采用纸片法.

5种大肠埃希氏菌Col质粒接合传递实验研究

以5种61株Col^+大肠埃希氏菌为供体,与受体E.Coli K_(12)进行接合实验,结果有16株供体菌的Col质粒传递给K_(12),占25.4％。其中NPEC、ETEC、EPEC、EIEC、EAEC的传递比率分别是8/22、 4/21、2/15、1/2、1/1。按传递方式分类,52株耐药供体菌有10株的Col质粒和耐药标记(或R质粒)发生共同传递,占19.2％,伴发Col质粒传递的耐药标记有8种,其中TC、SM、COS、KM的并发传递率较高(16—20％)。不同耐药标记菌株的Col质粒传递率范围在0—66.7％。在8株敏感菌和1株耐药菌中有6株Col质粒发生单独传递,占66.7％。实验发现4个配对组的Col质粒和R(r)质粒发生分离而独自传递。本文分析了Col质粒传递方式和耐药性的关系,同时讨论了接合传递的不同方法。为阐明和研究R^+Col^+肠道菌的演变及其对正常菌群生态平衡的影响提供遗传学依据。

木香、黄精提取液在小鼠体内抑制R质粒接合传递的实验研究

目的观察中药木香、黄精提取液在小鼠体内抑制S.flexneriD15 R-plasmid CmR和E.coli1485 RifR之间R质粒的接合传递作用。方法木香、黄精提取液分别与S.flexneriD15 R-plasmid CmR和E.coli1485 RifR混合后注入昆明小鼠腹腔;取作用24和48 h的腹腔液接种含氯霉素和不含氯霉素麦康凯琼脂平板,37℃培养。实验设溴化乙锭组和未加药对照组。根据培养24 h后的菌落数计算各组的R质粒转移率及R质粒转移抑制率。结果木香组、黄精组及未加药对照组24 h R质粒转移率分别为(4.17±0.59)%、(11.83±2.37)%和(58.67±5.80)%,差异有统计学意义(P<0.01);48 h R质粒转移率分别为(1.94±0.62)%、(15.61±0.12)%和(57.61±3.32)%,差异有统计学意义(P<0.01)。木香组和黄精组24 h的R质粒转移抑制率分别为(92.9±7.81)%和(79.82±6.94)%;48 h的R质粒转移抑制率分别为(96.63±8.52)%和(72.91±7.42)%。结论木香、黄精提取液在体内能有效抑制S.flexneriD15 R-plas-mid CmR和E.coli1485 RifR之间R质粒的接合传递。

木香、黄精提取液抑制R质粒接合传递的体外实验研究

目的体外观察中药木香、黄精提取液抑制痢疾杆菌氯霉素耐药株(S.flexneRiD15 R-plasmid CmR)和大肠埃希菌氯霉素敏感株(E.coli1485 RifR)间的R质粒接合传递作用。方法木香、黄精提取液分别与S.flexneRiD15 R-plasmid CmR和E.coli1485 RifR共同培养24 h和48 h后接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养24 h,计算木香、黄精及不加药对照组的R质粒转移率和R质粒转移抑制率。结果24 h R质粒转移率木香组为(4.60±0.14)%,黄精组为(4.15±0.78)%,未加药对照组为(47.3±0.53)%,差异有统计学意义(P<0.01);48 h R质粒转移率木香组为(3.65±0.07)%,黄精组为(2.8±0.71)%,未加药对照组为(68.90±1.01)%,差异有统计学意义(P<0.01)。24 h的R质粒转移抑制率木香组为(90.30±8.33)%,黄精组为(91.22±7.76)%;48 h的R质粒转移抑制率木香组为(94.70±9.68)%,黄精组为(95.90±10.23)%。结论木香、黄精均具有体外抑制S.flexneRiD15 R-plasmid CmR和E.coli1485 RifR间R质粒接合传递的作用。

2株嗜麦芽寡养单胞菌对β-内酰胺类耐药性的传递

目的了解嗜麦芽寡养单胞菌临床株对抗生素的耐药情况及耐药性的可传递性。方法琼脂纸片扩散法药物敏感试验检测嗜麦芽寡养单胞菌的抗生素耐药情况。接合传递实验获耐药接合株。结果临床菌株H417传递的抗生素耐药性是对头孢噻肟、头孢哌酮、羧苄西林、头孢他啶及庆大霉素;临床菌株A3573传递的耐药性有头孢噻肟、头孢他啶、羧苄西林、氨苄西林/克拉维酸和氨曲南。同时伴有质粒的传递。结论嗜麦芽寡养单胞菌临床株对β-内酰胺类及氨基糖苷类的耐药性可经质粒介导传递。

鸭源大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因的检测与传播扩散机制

目的探索鸭源大肠杆菌对氨基糖苷类耐药及耐药传播的分子机制。方法用微量稀释法测定鸭源大肠杆菌对氨基糖苷类药物的耐药表型,用PCR和DNA测序方法检测多种氨基糖苷修饰酶基因和质粒介导的16S甲基化酶基因,通过质粒接合试验分析有关耐药基因和耐药性的质粒接合传递特点,并采用基因克隆方法研究rmtB的基因环境。结果 27株分离菌中,有23株、19株、19株和18株分别对安普霉素、庆大霉素、阿米卡星和新霉素耐药,耐药率分别为85.2%、70.4%、70.4%和66.7%。27株中的13株检测到rmtB基因,6株同时检测到rmtB和aac(3)-IV基因。质粒接合试验获得5株接合子,接合子对安普霉素、庆大霉素、阿米卡星和新霉素均高水平耐药(MIC≥128μg/ml),rmtB基因检测呈阳性反应。结论鸭源大肠杆菌氨基糖苷类药物耐药和交叉耐药十分严重,质粒介导的rmtB基因和质粒接合传递是其耐药及其传播扩散的重要机制。

鸡志贺氏菌β-内酰胺酶的测定及其与耐药质粒的关系

通过对鸡志贺氏菌β-内酰胺酶及ESBLs的测定、质粒提取、细菌转化及质粒结合转移等试验,分析其耐药性与其质粒之间的关系,探讨耐药质粒在细菌间的传递方式.结果表明,质粒转化后的转化子对β-内酰胺类抗生素全部耐药,对氨基糖苷类、氟诺酮类有一定程度的敏感;而质粒接合传递体的耐药谱与质粒转化子一致.耐药菌株的质粒可编码β-内酰胺酶,且耐药质粒可通过结合转移方式传递至感受态大肠杆菌.

伤寒沙门菌噬菌体分型及药敏试验报告

伤寒沙门菌噬菌体分型及药敏试验报告巢国祥，徐勤，魏汉加（扬州市卫生防疫站，江苏扬州，２２５００２）伤寒为我市的主要传染病，近年有暴发，并出现耐药菌株流行。为指导临床治疗，我们对近年来的２８８株伤寒杆菌作了药敏试验并对其中部分作了噬菌体分型，耐药性接合...

耐药质粒pR_(ST98)在不同种属肠道杆菌间的接合及表达

目的 研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98在不同种属肠道杆菌间 (大肠杆菌、伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌及痢疾杆菌 )互相接合传递的规律及表达。方法 以 3株携带不相容性C群 (IncC)pRST98的伤寒杆菌作供体 ,用传统及改良的两种接合转移试验方法 ,研究其在肠道杆菌间的传递及耐药标志的表达 ,并用核酸内切酶对供体菌及受体接合子的R质粒进行分析。结果 pRST98能在 4种肠道杆菌间传递 ;但在不同种属中R质粒接合难易程度不同 ;同一R质粒在不同宿主菌中耐药标志的表达亦有差异。结论 质粒的可传递性给阻断耐药性的传播和疾病的防治带来很大困难 ,大肠杆菌在一定条件下可将耐药质粒传递给伤寒杆菌等肠道致病菌。正常菌群中庞大的耐药基因库是致病性耐药菌株流行的潜在危险 ;同一质粒在不同宿主菌中耐药标志的差异显示出耐药质粒表达的多样性和复杂性。

20种中草药对产不同基因型ESBLs鲍曼不动杆菌的抑菌作用的研究

目的研究中草药醇提液对产不同基因型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)的抑菌效果及有效药物对质粒接合传递实验的作用,为临床治疗产ESBLs A.baumannii的感染提供参考。方法采用纸片扩散法测定20种中草药醇提液对产ESBLs A.baumannii的体外抑菌效果,并采用二倍稀释法测定中草药醇提液的最小抑菌浓度(MIC),选取抑菌效果较好的中草药醇提液作用于A.baumannii质粒的接合传递实验。结果 20种中草药中,五倍子、黄连、蒲公英和乌梅醇提液对产不同基因型ESBLs鲍曼不动杆菌表现出了一定的抑制作用,其中五倍子的抑菌效果最显著,抑菌圈可达25.0mm,MIC值最低为0.391 mg/ml,且抑制了A.baumannii质粒的接合传递实验。结论五倍子对产ESBLs A.baumannii抑菌效果较好,可为临床抗菌药物的研发提供参考。