人接头蛋白LNK对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨人接头蛋白LNK(hLNK)对非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展的影响。方法构建稳定过表达hLNK的人NSCLC细胞株H1299-hLNK及对照细胞株H1299-pCDH。采用Western blot验证上述稳转细胞株中hLNK的表达水平;采用平板克隆实验分析hLNK过表达对H1299细胞增殖的影响;采用划痕实验分析hLNK过表达对H1299细胞侵袭能力的影响;对细胞中上皮间质转化(EMT)的典型标志蛋白进行分析。结果成功构建过表达hLNK的人NSCLC细胞株H1299-hLNK。与对照细胞H1299-pCDH比较,hLNK过表达抑制了H1299细胞的增殖和迁移能力,且细胞EMT水平被抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论hLNK主要通过下调NSCLC细胞H1299的EMT水平抑制癌细胞的增殖、迁移。

6-羟多巴损伤黑质导致弓状核离子钙接头蛋白1和阿片-促黑素皮质素原表达的变化

目的:观察6-羟多巴(6-OHDA)损伤大鼠黑质(SN)后下丘脑弓状核(Arc)中酪氨酸羟化酶(TH)、离子钙接头蛋白1(Iba1)和阿片-促黑素皮质素原(POMC)的表达变化,为帕金森病(PD)患者消瘦的发生机制提供线索。方法:20只SD大鼠随机分为6-OHDA大鼠组(双侧SN内注射6-OHDA)和对照组(注射等体积生理盐水)。免疫荧光染色和Western blot检测SN内TH,以及Arc内TH、Iba1和POMC的表达。结果:与对照组比较,6-OHDA大鼠组体重无明显变化,但腹膜后脂肪重量从(7.550±0.670)g减少到(3.895±0.465)g(P<0.01)。SN内TH阳性细胞数量从56±5减少至14±2(P<0.05);蛋白表达水平从0.75±0.11降低至0.41±0.09(P<0.01)。Arc中TH阳性细胞数量从21±2减少到10±3(P<0.05);Iba1阳性细胞数量从12±2增加到30±5(P<0.05);POMC阳性细胞数量从16±4增加到31±2(P<0.05)。下丘脑内TH蛋白的表达水平从0.35±0.05降低到0.21±0.02(P<0.01);Iba1蛋白的表达水平从0.23±0.06增加至0.51±0.04(P<0.01);POMC的蛋白表达水平从0.37±0.05增加至0.65±0.03(P<0.01)。结论:Arc中TH、Iba1和POMC表达变化可能与PD脂肪减少存在一定的联系。

使用特异的接头蛋白规范Toll样受体的胞内信号流(英文)

免疫学近20年来的研究强调了Toll样受体在识别病原微生物、激活天然免疫应答从而抗击感染方面的重要角色。当特异的配体结合Toll样受体,细胞使用特异的接头蛋白组织胞内信号转导通路,最终激活转录因子激酶,活化转录因子。看来Toll样受体使用特异的接头蛋白来规范胞内信号流。

TLR接头蛋白研究进展

Toll样受体(TLR)是近年来备受关注的一类病原体识别受体,能选择性地识别侵入机体的病原微生物所携带的病原相关分子模式(PAMPs),继而激活信号级联放大,产生免疫应答。目前研究发现,TLR识别相应配体后,由一类包含TLR结构域的接头蛋白MYD88、MAL、TRIF、TRAM和SARM通过MYD88依赖途径或MYD88非依赖/TRIF途径进行信号传导。

针刺对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脊髓钙离子接头蛋白-1、环氧合酶-2及血清肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的观察针刺对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脊髓钙离子接头蛋白-1(IBA-1)、环氧合酶-2(COX-2)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响,探讨其可能的作用机制。方法将36只C57BL/6小鼠随机分为4组,正常组小鼠不予处理,其余小鼠均制作EAE模型。造模后第14日开始,正常组和模型组小鼠每日抓取1次,激素组小鼠给予醋酸泼尼松灌胃,针刺组小鼠针刺双侧"肾俞""足三里""大椎"。造模后28 d取材,检测小鼠血清TNF-α含量及脊髓COX-2、IBA-1阳性表达。结果与正常组比较,模型组小鼠神经功能评分及TNF-α、COX-2、IBA-1水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组和激素组小鼠神经功能评分和TNF-α、COX-2、IBA-1水平均明显降低(P<0.01);与针刺组比较,激素组小鼠神经功能评分和COX-2、IBA-1水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论针刺可降低EAE小鼠炎症反应,减轻脊髓神经损伤,其机制可能与降低血清TNF-α含量,减少脊髓COX-2、IBA-1阳性表达有关。

跨膜接头蛋白CBP对皮肤鳞癌细胞A431生长增殖的负调控作用研究

背景与目的:跨膜接头蛋白(Csk-binding protein,CBP)是新发现的Src家族成员,与多种肿瘤的发生有关。该研究旨在观察CBP基因过表达对皮肤鳞癌细胞系A431增殖及细胞凋亡的影响,探讨其相关的分子机制。方法:构建CBP-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合蛋白的慢病毒过表达载体,采用反转录病毒转染的方法建立CBP过表达的A431细胞株。实验分为亲本细胞组(未进行基因转染的A431细胞)、对照组(A431细胞转染仅含EGFP阴性对照病毒)和实验组(A431细胞转染CBP-EGFP病毒)。在激光共聚焦显微镜下观察细胞转染率,验证转染成功与否;CCK-8法检测CBP过表达对A431细胞增殖能力的影响,并采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测对细胞凋亡的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Lck、Csk和Fyn三种上游信号转导分子分别在m RNA和蛋白中的表达水平变化。结果:建立了稳定过表达CBP的A431细胞株;CCK-8法结果提示,CBP过表达明显抑制细胞生长,第2~6天的组间差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测显示,实验组细胞凋亡率显著增加,与亲本细胞组及对照组相比差异有统计学意义(P<0.001);RTFQ-PCR结果显示,实验组A431细胞Lck m RNA的相对表达水平显著下调(P<0.001),实验组细胞Csk和Fyn m RNA的表达分别约为亲本细胞组的1.6倍和3.8倍,表达显著上调(P<0.001);Western blot结果表明,实验组Lck蛋白的相对表达水平明显下降(P<0.001),实验组细胞Csk和Fyn蛋白与亲本细胞组和对照组相比表达明显增加(P<0.001)。结论:CBP过表达可抑制皮肤鳞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡及坏死。CBP通过调节上游信号转导通路中的蛋白酪氨酸激酶Lck、Csk和Fyn来调控细胞的增殖活性。

TLR接头蛋白SARM研究进展

SARM是最后一个发现的TLR接头蛋白,也是唯一具有抑制作用的接头蛋白,SARM的功能在不同物种和不同研究体系中结果差异较大,本文综述了人和小鼠中SARM的基因定位、基因结构和表达情况,并综述了线虫、鲎、文昌鱼、斑马鱼、小鼠和人等不同物种中SARM功能研究的最新进展。

接头蛋白Gab1结构、功能及与肿瘤的关系

肿瘤的发生、侵袭、转移是一个涉及多种基因及其产物的复杂过程,异常的酪氨酸磷酸化在其中发挥了重要作用,研究表明接头蛋白Gab（Grb2-associated binder,Grb2相关结合蛋白）家族正是通过参与异常的酪氨酸磷酸化参与肿瘤过程。

6-羟多巴损伤黑质导致室旁核离子钙接头蛋白表达变化

目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质损伤后下丘脑室旁核(paraventricular nucleus of hypothalamus,PVN)中离子钙接头蛋白1(ionized calcium binding adapter molecule-1,Iba1)的含量变化。方法 30只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组各15只。6-OHDA大鼠组双侧黑质内注射6-羟多巴,对照组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射等体积的生理盐水。6周后断头取脑,Nissl染色、免疫组化、免疫印迹方法鉴定成模,免疫组化、免疫印迹和RT-PCR检测室旁核Iba1的表达。结果与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经细胞数量从(58±5)个减少到(10±2)个(P<0.05),蛋白表达水平从(0.71±0.12)降低至(0.28±0.12)(P<0.05),室旁核中Iba1阳性细胞数量从(7±2)个增加到(14±3)个(P<0.05),蛋白表达水平从(0.1±0.08)增加到(0.19±0.06)(P<0.05)。结论 6-OHDA大鼠PVN中Iba1的表达变化有可能与帕金森病患者的胃肠功能障碍存在一定的联系。

MAP4K1与其接头蛋白的相互作用

有丝分裂原激活蛋白激激激激酶1(MAP4K1,又名定向造血干细胞激酶1,即HPK1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶。作为MAP4K家族的成员,它与许多接头蛋白,如CARD11,HSI,HIP-55,GRB2家族,LAT,SLP-76家族,CRK家族,BAM32等相联系,参与了各种免疫反应,包括调控细胞增殖与凋亡、抑制TCR/BCR信号和T/B/树突状细胞介导的免疫反应等,进而在自身免疫性疾病、肿瘤和炎症反应中发挥重要作用。

BICD货物接头蛋白1基因作为胶质瘤级别进展分子标志物的研究

目的检测BICD货物接头蛋白1(BICD1)基因在中国人群各级别胶质瘤样本中的表达水平,并探讨其在低级别胶质瘤向高级别胶质瘤进展过程中的潜在作用。方法从中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)的全转录组表达谱芯片数据库和全转录组测序数据库中收集BICD1的mRNA表达数据,结合胶质瘤的世界卫生组织(WHO)级别、分子亚型、患者无进展生存期和总生存期及经典分子标志物的表达与突变数据,分析BICD1表达与胶质瘤的级别进展及恶性程度的相关性。收集WHOⅡ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤组织各10例,提取RNA并反转录为c DNA进行实时荧光定量PCR(qPCR),分析各级别胶质瘤样本中BICD1在转录水平上的表达差异。结果 CGGA全转录组表达谱芯片和全转录组测序数据库中提取的表达数据显示,BICD1的表达水平随着胶质瘤的级别升高而升高(WHOⅢ及Ⅳ级vs WHOⅡ级:t=7.901,P<0.01)。qPCR结果显示较高级别的胶质瘤组织中BICD1的表达水平更高(WHOⅢ级vs WHOⅡ级:t=3.514,P<0.01;WHOⅣ级vsⅢ级:t=2.128,P=0.037 6)。BICD1高表达与胶质瘤患者更短的无进展生存期和总生存期均有关(P均<0.01)。BICD1在前神经元型、神经元型、经典型和间质型胶质瘤样本中的表达水平不同(F=21.8,P<0.01),其中间质型胶质瘤样本中BICD1表达水平最高,前神经元型胶质瘤样本中表达水平最低。BICD1的表达水平与异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变、染色体1p19q联合缺失、人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)突变等指示胶质瘤恶性程度的经典分子标志物相关,其中IDH1突变胶质瘤样本中BICD1的表达水平低于野生型样本(t=7.769,P<0.01)。结论 BICD1可能是指示低级别胶质瘤发生级别进展和恶性进展的潜在分子标志物。

信号转导接头蛋白2和输入蛋白5表达对骨骼肌蛋白质周转的影响

目的探讨信号转导接头蛋白2(STAP2)和输入蛋白5(Ipo5)表达对骨骼肌蛋白质周转的影响。方法 12只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入对照组(n=6)和模型组(n=6)。对照组不处理,模型组采用阻血诱导大鼠骨骼肌肥大。体外培养两组比目鱼肌细胞,模型组细胞用sh RNA慢病毒感染细胞,先后实现基因STAP2、Ipo5沉默、过表达和功能挽救。Western blotting检测两组细胞STAP2、Ipo5和myostatin蛋白表达。结果模型组较对照组STAP2表达显著上升(t=-11.786,P<0.001),Ipo5和myostatin表达下降(t>14.039,P<0.001);在对照组、模型组、沉默组、过表达组、挽救组中,myostatin表达随STAP2表达降低而升高,随Ipo5表达升高而升高。结论 STAP2表达上调和Ipo5表达下降可促进蛋白质合成。

接头蛋白c-Crk的结构和功能

接头蛋白c Crk是原癌基因c Crk表达的产物 ,参与了受体酪氨酸激酶和整合蛋白等多种分子的信号转导。C Crk是最初发现于禽类病毒中的v Crk在组织细胞中的同源物 ,通过mRNA选择性剪接产生两种形式的蛋白质c CrkI和c CrkII,在各种组织中广泛表达。C Crk分子在N端包含有一个SH2结构域 ,在C端两个SH3结构域。CrkL是Crk家族的另一个成员 ,但由不同的基因编码 ,其结构与c CrkII十分相似。C Crk蛋白质本身不具备任何酶活性 ,它通过SH2和SH3结构域连接蛋白质 ,使得不能直接相互作用的信号分子发生相互作用。c CrkII的SH2结构域可以与含有磷酸化酪氨酸YXXP模体的蛋白质结合 ,如桩蛋白 (paxillin)、Cas、c Cbl和自身磷酸化的酪氨酸蛋白激酶受体等。SH3结构域与蛋白质中富含脯氨酸的PXLPXK模体结合 ,如C3G和DOCK180等信号分子。由于c Crk能够同众多的蛋白质信号分子结合 ,使得c

胞内接头蛋白TRAFs家族

肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)受体相关因子(receptor-associated factor,TRAF)家族是一类胞内接头蛋白,能介导TNF受体和Toll-like/IL-1受体超家族成员与多种下游信号通路包括NF-κB (nuclear factorκB)和JNK(Jun N-terminal kinase)的信号传导。TRAF蛋白家族参与调控细胞增殖、分化乃至凋亡等生理过程。由于其在信号通路中的关键作用,TRAFs蛋白的失调与多种疾病的发生相关。本文结合最新的研究进展对TRAFs蛋白家族在信号传导通路中的地位进行介绍,并探讨了TRAFs及其相关蛋白在临床上可能的应用前景。

死亡受体接头蛋白在细胞凋亡中的作用研究进展

死亡受体凋亡通路是细胞凋亡的主要途径之一,其中接头蛋白发挥着重要作用.主要综述了死亡受体接头蛋白FADD、TRADD、DAXX、RIP1、ASK1及TRAF2在细胞凋亡中作用效果的研究现状.

新型接头蛋白XB130在恶性肿瘤中的研究进展

目前XB130作为一种新发现的接头蛋白，参与了细胞内多条信号转导通路，例如黏着斑激酶（FAK）／SRC信号通路、P13K／Akt信号通路和MEK-ERK信号通路等。而且最近在多种肿瘤细胞中均发现XB130高表达，例如甲状腺癌、骨肉瘤、胃癌、食管癌和乳腺癌等，其在恶性肿瘤中的作用机制也日益引起重视。XB130是新发现的肿瘤癌基因，具有促进肿瘤细胞增殖、存活及致肿瘤形成的作用。本文就新型接头蛋白XB130在恶性肿瘤中的研究现状做一综述。

一氧化氮合酶-1接头蛋白基因多态性和阿尔茨海默病的关联研究

目的：探讨中国汉族人群一氧化氮合酶-1接头蛋白（NOS1AP）基因多态性与阿尔茨海默病（AD）的相关性。方法：采用Taq Man探针基因分型技术对300例AD患者（病例组）及716名正常对照者（正常对照组）进行NOS1AP基因多态性（rs1415263、rs4145621、rs12742393、rs348624）分型,应用SHEsisplus和SNPstats在线软件比较两组间的等位基因频率、基因型频率、单体型频率分布。结果：rs4145621、rs12742393和rs348624等位基因频率（χ^2=2.78,P=0.095;χ^2=2.489,P=0.115;χ^2=0.002,P=0.964）两组间分布差异无统计学意义;基因型频率在5种遗传模式下（经年龄、性别校正后P均〉0.05）两组间分布差异无统计学意义;单体型CC（rs4145621-rs12742393）正常对照组的频率低于病例组（0.011 vs 0.028;χ^2=6.103,P=0.013）,经性别、年龄校正后差异无统计学意义（P=0.52）,其余CA、TC、TA单体型在两组中分布差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：在中国汉族人群中,NOS1AP基因可能不是AD的易感基因。

接头蛋白c-Crk单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备接头蛋白c-Crk单克隆抗体。方法以c-Crk为抗原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗c-CrkmcAb的杂交瘤细胞,用ELISA,western-blot等鉴定其生物活性。结果获得两株能稳定分泌c-CrkmcAb的杂交瘤细胞(3C7、3G11),亚类均为IgG1;腹水效价为1∶105;western-blot、免疫组织化学分析和ELISA检测证实两株mcAb均与c-Crk有较高的特异性。结论本实验成功制备了两株抗c-Crk特异性的mcAb,可用于c-Crk免疫检测方法的建立。