应用PCR检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒

设计合成了 1对引物 ,建立用于检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒的PCR方法。结果表明 ,PCR对羊接触传染性脓疱性皮炎病毒细胞培养毒的检测与细胞培养CPE、电镜检测的结果相一致。经对扩增产物进行序列分析 ,与已报道NZ 2株的核苷酸序列同源性高达 97%。用此PCR方法扩增羊痘病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病病毒 ,结果均为阴性。此方法用于检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒是可行的。

羊接触传染性脓疱性皮炎病毒核酸及蛋白类型分析

对从中国不同地区采集的１１株羊接触传染性脓疱性皮炎病毒（ｃｏｎｔａｇｉｏｕｓｅｃｔｈｙｍａｖｉｒｕｓ，ＣＥＶ；ｏｒｆｖｉｒｕｓ）的痂块毒ＤＮＡ进行提取，用ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ、ＨｐａⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＫｐｎⅠ酶切，琼脂糖凝胶电泳，确定了各毒株的核酸及分子量。结果表明，各毒株的核酸酶切片段在８～１５个之间，病毒基因组大小有１０～２５ｋｂ的差异。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析了经ＮＰ－４０和２－巯基乙醇裂解蔗糖密度梯度离心纯化的各病毒株的囊膜蛋白，结果显示，各毒株可分离出１８～３３个不同的蛋白区带，毒株间的差异主要集中在３６４００～８００００区带之间。结合２次交互免疫试验结果，将以上１１株羊接触传染性脓疱性皮炎病毒分为４大类。

光敏生物素标记IgG检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒囊膜蛋白及重组表达蛋白

用光敏生物素标记从兔抗羊接触传染性脓疱性皮炎病毒超免疫血清中提取纯化的IgG ,把从蔗糖密度梯度离心纯化的病毒用 2 ME和NP4 0裂解后与重组转化菌 pGRL 4A和pGRH 3A一起进行SDS PAGE ,并进行转移电泳。对用光敏生物素标记的IgG进行Western blot ting印迹杂交检测。结果 ,检测到产生IgG的病毒囊膜蛋白有 5条 ,分子量分别为 12 5 .0、96 .0、83.0、5 6 .3和 4 2 .0ku ;检测到重组菌 pGRL 4A和 pGRH 3A可表达分泌其中的 3条囊膜蛋白 ,其分子量分别为 83.0、5 6 .3和 4 2 .0ku ;pGRL 4A的表达较强 ,对 4 2 .0ku蛋白的分泌量最高。所重组的病毒DNAHindⅢ

接触传染性脓疱皮炎病毒B2L基因的克隆和序列分析

参照文献和 Gen Bank发表的接触传染性脓疱皮炎病毒 (CPDV ) NZ- 2株的 Bam H / B片段的基因序列 ,设计并合成 1对引物 ,通过 PCR扩增出国内 CPDV疫苗株和 3个分离株的 B2 L 基因 ,目的片段长约 1.13kb。将目的片段克隆到 p MD18- T载体后进行序列测定 ,并用 DNAStar软件比较分析国内的 CPDV株与 NZ- 2株的核苷酸序列和推导的氨基酸序列的同源性。结果表明 ,国内疫苗株和 3株分离株的核苷酸序列同源性分别为 99.7%、96 .9%和 97.4 % ,与国外 NZ- 2株的同源性为 96 .1%。国内 CPDV株与 NZ- 2株的氨基酸序列同源性分别为 92 .0 %～ 96 .0 % ,表明CPDV Bam H / B2 L基因变异的幅度小。

羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR检测方法建立及初步应用

以Gen Bank上羊接触传染性脓疱皮炎病毒(ORFV)B2L基因序列,用Primer premier 5.0软件设计1对引物并合成,经PCR条件优化,确定了最佳的PCR反应条件,建立了羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR检测方法。结果显示,设计的引物能扩增出的PCR产物为540bp左右,与预期大小一致;同时检测山羊痘病毒,结果均为阴性;该方法能检出羊接触传染性脓疱皮炎病毒最低量为5pg。经证实,建立起羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床病料检测。

羊传染性脓疱皮炎病毒的细胞培养

在确定内蒙古白音锡勒牧场羊传染性脓疱皮炎的基础上,我们利用犊牛睾丸细胞培养白音锡勒牧场传染性脓疱皮炎病毒(Orf virus)获得成功,现将培养方法介绍如下。

一例人感染羊接触传染性脓疱皮炎的确诊

2013年6月6日,云南省江川县动物疫病预防与控制中心的一名兽医在保定可疑羊接触传染性脓疱皮炎发病羊时不慎被羊咬伤手指,10 d后在伤口愈合处形成丘疹,随后发展为水疱,最后形成结痂。随着痂皮的逐渐脱落,直至丘疹出现后1个多月感染病灶才完全愈合。经过对发病羊口唇痂垢及人手指丘疹、水疱液样品进行PCR、Real-time PCR及序列比对分析,2份样品均扩增出1225 bp的预期大小片段,Real-time PCR也扩增出标准S形曲线和Rn指数增长峰,2份病料测定出的序列(1133 bp)完全一致,与NCBI GenBank中的羊口疮病毒参考毒株NC-005336.1(1133/1133)对应序列的相似性达到100%,与AY386264.1(1115/1133)、AY386263.1(1114/1133)、HM133903.1(1113/1133)、KF837136.1(1110/1133)及普洱毒株PUER/YN/CHIA/2011(1113/1133)对应序列相似性达到98%,与DQ184476.1(1104/1133)对应序列相似性达到97%,与NCBI GenBank中同为副痘病毒属成员的伪牛痘参考毒株GQ329669.1(1052/1140)、GQ329670.1(1051/1140)对应序列的相似性达到92%,与牛丘疹性口炎病毒参考毒株AY386265.1(905/1130)的对应序列的相似性仅达到80%。由此,确诊此次病例为人感染羊传染性脓疱病毒。

羊传染性脓疱皮炎病毒弱毒株的培育研究

羊传染性脓疱皮炎(Contagious Pustulaz dermatitis)是羊的一种急性病毒性传染病,在全国养羊区普遍流行,危害严重。1980年开始,我们首先确定了病原,并在犊牛睾丸细胞上培养成功。在此基础上,对毒力强、免疫原性好的HCE毒株通过犊牛睾丸细胞连续继代,毒力出现不同程度的减弱。

羊接触传染性脓疱性皮炎弱毒疫苗的免疫攻毒试验

为保证羊接触传染性脓疱性皮炎弱毒疫苗的质量,检测成品疫苗的免疫保护率,进行了羊接触传染性脓疱性皮炎弱毒疫苗的免疫攻毒试验。先用羊接触传染性脓疱性皮炎弱毒疫苗免疫实验动物,然后用强毒攻击实验动物。结果表明:成品疫苗均达到了相关标准。

羊传染性脓疱病毒的分离与鉴定

对采自松原市的疑似羊接触传染性脓疱性皮炎的羔羊病料,用犊牛睾丸原代细胞进行病毒分离培养,观察细胞病变;将出现病变的病毒细胞培养液接种家免和羔羊后,出现典型羊接触传染性脓疱性皮炎的临床症状;对病毒细胞培养液的电镜观察,发现了副痘病毒,证明确为羊传染性脓疤性病毒。

山羊传染性脓疱病毒和坏死杆菌混合感染症的诊治

羊传染性脓疱也叫传染性脓疱性皮炎，俗称羊口疮，是由传染性脓疱病毒所引起的急性、接触性传染病。本病的特征为在口腔内外，皮肤和黏膜发生红斑、丘疹、水疱、脓疱、溃疡及痂块。本病世界各地都有发生，对成年羊危害轻，对羔羊危害重，死亡率在1％～15％之间。羊坏死杆菌病是坏死杆菌引起的畜禽共患的慢性传染病，因患病部位和组织的不同而有不同的病名，本病主要通过损伤的皮肤和黏膜而感染，呈散发性或地方性流行。羊传染性脓疱病常发生坏死杆菌的继发感染。

一起山羊传染性脓疱的诊治

羊传染性脓疱又称羊传染性脓疱性皮炎,俗称羊口疮,是一种由痘病毒科副痘病毒属传染性脓疱病毒引起绵羊、山羊的急性、接触传染性、嗜上皮性传染病。该病不会造成严重的死亡现象,但由于口腔黏膜受到损伤,使得羊只采食困难,引起机体消瘦,生产性能显著下降[1],一旦治疗不及时,羊只会因抵抗力降低而继发感染其他疾病,从而加大该病的发病率和死亡率,给养殖户带来更大的经济损失。

羊传染性脓疱病毒PCR检测方法的建立与初步应用

根据羊传染性脓疱病毒(CPDV)B2L基因序列,设计合成一对引物,建立了检测羊传染性脓疱病毒DNA的PCR检测方法。特异性、敏感性试验表明,该方法可以检测2 pg DNA;并能与羊痘病毒、口蹄疫病毒进行鉴别区分;结果表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可对临床组织病料中的CPDV进行快速检测。

羊接触传染性脓疱皮炎诊断及防控

羊接触传染性脓疱皮炎又被称为羊口疮,是由接触性传染性脓疱皮炎病毒感染引发的以绵羊山羊口唇、舌鼻、乳房出现丘疹、水泡、脓疱、疣状结痂为主要特征的人畜共患病。当体表皮肤的创面较大时,还很容易继发感染多种细菌性疾病,如金黄色葡萄球菌病,使患病羊临床症状进一步加重,给疾病诊断工作带来巨大难度。由于该类传染性疾病是一种人畜共患病,如果防治人员没有做好防护工作,病毒会通过各种途径进入机体,引发人类发病,威胁兽医工作人员身体健康和公共共卫生安全。该文主要分析羊接触性传染性脓疱性皮炎的流行特点、临床症状、诊断方法和防治措施。

甘肃东部地区羊接触传染性脓包皮炎PCR方法的检测和应用

参照GenBank收录的ORFV全基因序列中较保守的B2L设计引物,建立PCR诊断技术进行羊接触传染性脓包皮炎病毒(ORFV)基因的检测,旨在确定该诊断技术在临床快速检测的可行性。结果表明本研究中建立的PCR诊断技术可准确、快速检测本病,以检测结果为依据,能够及时隔离、淘汰病羊,降低羊群发病率。

羊传染性脓疱病毒ORF 120:可正向调控NF-κB信号通路的毒力基因

羊传染性脓疱病毒(ORFV)具有高度的嗜上皮性,是引起"羊口疮"的病原,发病羊的临床特征以口、唇、舌、鼻、乳房等部位皮肤与黏膜形成水疱、脓疱、溃疡和疣状结痂为主。除羔羊易感外,也见于猫、骆驼、鹿和其他反刍动物等,人可因接触病羊而感染,因此ORFV具有一定的公共卫生学意义。

羊传染性脓疱和溃疡性皮炎诊治

羊传染性脓包病和羊溃疡性皮炎病是临床上两类羊常患的传染病,并且二者发病部位与症状大致相同,在进行诊治中要仔细辨别。本文试从发病原因、临床表现、防治手段3个方面,分别对2种病症进行探讨,重点在于2种疾病的患病症状与对应的治疗方法并给出有关预防方面的建议。