体视学定量法评估氧控制性再灌注对犬体外循环肺缺血再灌注早期损伤的保护作用

利用体视学定量法,评估氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤的保护作用。14只健康犬随机分为缺血再灌注组(IR,n=7)和氧控制性再灌注组(OCR,n=7)。IR组全程FiO2 80%;OCR组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放25 min(T2)、主动脉开放90 min(T3),留取肺组织标本进行HE染色。每张切片随机取10个视野,用Image-Pro图像分析软件,分别测试肺泡间隔中性粒细胞(PMN)计数、肺泡间隔面积密度(PASAD)、肺泡腔体积密度和肺实质红细胞体积密度,检测肺组织湿干重比(W/D)。两组肺组织各参数在T1差异无显著性(P>0.05),OCR组肺泡间隔中性粒细胞计数、肺泡间隔面积密度和红细胞体积密度在T2和T3时点较IR组降低(P<0.05),OCR组肺泡腔体积密度在T2和T3时点较IR组明显增大(P<0.05)。OCR组肺组织湿干重比(W/D)在T2和T3时点较IR组明显降低(P<0.05)。采用体视学定量法,提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有保护作用。

氧控制性再灌注抗犬体外循环肺缺血再灌注早期损伤

【目的】探讨氧控制性再灌注(OCR)对体外循环肺缺血再灌注(I/R)早期损伤的作用。【方法】14只健康犬随机分为对照组(I/R,n=7)和实验组(OCR,n=7)。对照组全程FiO2 80%;实验组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%。检测动脉血气,观察两组犬在麻醉后、主动脉开放前、开放后5、10、15、20、25 min以及停机前动脉血氧分压的变化。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放25 min(T2)、主动脉开放90 min(T3)分别留取血液标本及肺标本。酶联免疫吸附法检测血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量;检测肺组织干湿重比;比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性、丙二醛含量;Western Blot检测肺组织核因子kappa B蛋白含量;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化。【结果】实验组动脉血氧分压在主动脉开放后5、10、15、20 min均明显低于对照组(P<0.05)。两组相比,实验组血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05)。实验组肺组织干湿重比、髓过氧化物酶活性、丙二醛含量和核因子kappa B蛋白表达在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05)。实验组肺损伤评分在T2和T3时点低于对照组(P<0.05)。【结论】氧控制性再灌注可抑制体外循环肺缺血再灌注早期炎性细胞浸润,抑制核因子kappaB蛋白表达。提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有一定的保护作用。

控制性再灌注防治心肌缺血再灌损伤的实验及临床研究

控制性再灌注(简称控灌)具有降低心肌再灌损伤,保护心肌的优良作用,应用自体温氧合血停跳液行控制性再灌注,经106例及采用本法前105例比较结果显示:该法自动复跳率高,术后循环恢复满意,极少应用升压药支持,几乎无严重心律失常,死亡率明显降低。动物实验证实:复跳后实验组心功能明显优于对照组,超微结构破坏轻微。本文对控灌防治心肌缺血再灌注损伤的机理进行了探讨,提出控灌条件及措施。

心肌缺血后控制性再灌注时间对再灌注损害的影响

家兔８０只，分成４组，每组１０只供心兔，１０只供血兔，采用在体循环灌注离体心脏模型，对心肌缺血后不同控制性再灌注（控灌）时间对再灌注损害的影响进行了研究。结果显示：５、１５和３０ｍｉｎ的控灌对心肌肌酸磷酸激酶的同工酶（ＣＰＫ－ＭＢ）、含水量（ＭＷＣ）、丙二醛（ＭＤＡ）含量以及超微结构的影响明显优于未经控灌的实验组（Ｐ＜０．０５），５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ控灌组差异不显著（Ｐ＞０．０５），１５ｍｉｎ控灌组其各项指标又明显优于５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ控灌组。结果提示：控灌有预防缺血再灌注损伤的作用，且以１５ｍｉｎ控灌疗效最佳。

心肌控制性再灌注超微结构观察

本文建立了体外循环家兔动物模型，采用透射电镜技术对心脏外科手术中再灌注及控制性再灌注对心肌超微结构的影响进行了观察。采用不同的控制性再灌注时间来防止或减少再灌注损伤。该实验表明：１５ｍｉｎ的控制性再灌注时间既能满足缺血心肌修复所需要的时间，防止再灌注损伤的发生，又不致于影响心肌的有效灌注，是较为理想的控制性灌注时间，对心肌起到了保护作用。

控制性再灌注技术的临床应用

本文报告了在心内直视手术中，采用自体温血配制控制性再灌注液，进行控制性再灌注的初步应用效果：自动复跳率高（９４％），术后并发症少，循环功能恢复迅速、稳定。作者对应用控制性再灌注方法预防心肌缺血－再灌注损伤的机理进行了讨论。

辅酶Q_(10)、高压氧及控制性再灌注时间对牛心肌再灌注损害的影响

阻断牛心脏前降支动脉45分钟作为缺血心肌模型。通过正交试验及超微定量分析,探讨辅酶Q_(10)、高压氧及控制性再灌注时间对缺血心肌再灌注损害的影响。结果表明,控制性再灌注中应用辅酶Q_(10)或高压氧能更有效地减轻心肌超微结构的损害,两者合用疗效更佳。控制性再灌注时间的作用不明显。

控制性再灌注在缺血再灌注损伤中的应用进展

目前再灌注治疗策略已被广泛应用于心肌梗死和缺血性卒中等缺血性疾病的临床治疗中,但是大量的实验和临床证据表明,再灌注治疗会对缺血组织器官造成额外的再灌注损伤。控制性再灌注可在一定程度上减轻缺血再灌注损伤,为缺血性疾病的治疗提供了新思路。目前,该方向的研究主要集中于缺氧后处理、控制性高氧再灌注、流量控制再灌注、压力控制再灌注、控制性酸化再灌注和离子控制再灌注等方面。

控制性再灌注防止肺再灌注损伤的研究

目的 探讨控制性再灌注在预防肺缺血再灌注 (I/R)损伤中的作用及其机制。方法将猪分为 2组 ,10只猪切取左肺作供体 ,4℃改良的E C液灌洗和保存 ,4h后进行左肺移植。对照组常规操作 ,实验组采用控制性再灌注 :灌注液 (去白细胞血 :改良Buckberg液 =4∶1) ;灌注压 2 0mmHg ;灌注时间 10min。 0 .5、1和 2h后测血氧分压、肺血管阻力、肺顺应性、一氧化氮 (NO)含量、丙二醛 (MDA)含量、肺干 /湿重比。结果 实验组的左肺氧合功能 ,肺顺应性明显好于对照组 ,肺循环阻力、MDA值及肺含水量均低于对照组 (P <0 .0 1) ;实验组肺中NO含量较对照组明显升高 (P <0 .0 1)。结论 控制性再灌注能明显降低肺I/R损伤 ,起到了较好的移植肺保护效果。

低氧分压控制性再灌注与紫绀缺氧未成熟心肌保护

目的 研究低氧分压控制性再灌注对紫绀缺氧幼兔心肌缺血 /再灌注损伤的保护作用。方法 缺氧幼兔 2 4只 ,随机分为初始低氧分压控制性再灌注、常氧分压再灌注和高氧分压再灌注 3组。在Langendoff离体心脏模型上 ,从分子生物学和超微结构角度 ,观察不同氧分压再灌注对紫绀缺氧心肌再灌注损伤程度的影响 ,并探讨其机制。结果 低氧分压控制性再灌注组灌注末氧自由基产物明显下降 ,心肌ATP含量显著升高 ,再灌注后心肌收缩力和冠脉灌注流量明显改善 ,心肌水肿程度降低 ,超微结构损伤程度减轻。结论 初始低氧分压控制性再灌注 ,有效地减少氧自由基损害 ,改善心肌能量代谢 ,减轻细胞结构破坏 ,促进缺血后心功能恢复。

偏酸性含血停搏液终末控制性再灌注对未成熟心肌的保护作用

目的 研究终末控制性再灌注含血停搏液 pH值与时间的关系 ,探讨对未成熟心肌保护的临床意义。方法 3～ 4周龄健康长耳白兔 ,按含血停搏液终末控制性再灌 pH值 (6.6、7.0、7.4和 7.8)和再灌时程 (1、3、5和 7min)组合随机分为 16组 ,每组 10只 ,建立Langendorff离体心脏灌注模型。运用温血停搏液诱导停搏 ,低温保护 ,终末温血停搏液控制性再灌注技术。观察指标 :血流动力学指标 ;心肌肌酸激酶 (CK)漏出率 ;心肌细胞内Na+ 、Ca2 + 含量 ;心肌组织ATP含量 ;心肌超微结构。结果 轻度偏酸 (pH 7.0 )含血停搏液终末再灌注 3min各指标优于其余各组。结论 对于未成熟心肌 ,采用偏酸性含血停搏液终末控制性再灌的适宜 pH值为 7.0 ,时程为终末再灌开始 3min以内。过度偏酸或偏酸性再灌注时间过长均对未成熟心肌保护产生不利影响。

控制性再灌注对缺血心肌的保护作用

控制性再灌注(Controlled Reperfusion,CR)是针对心肌缺血发生的病理生理改变,人为地控制复灌早期的条件和复灌液的成分,尽可能地减少缺血后再灌注损伤(Ischemia Reperfusion Injury,IRI)的综合措施.

再灌注治疗中缺血心肌的保护策略

心肌缺血/再灌注中存在着不同程度的心肌损伤,并且理论上难以避免。如何减少缺血/再灌注心肌损伤已成为心肌保护的研究热点之一。目前保护缺血损伤心肌的研究大量涌出,主要方法有缺血预处理、缺血后处理、控制性再灌注等,旨在提高再灌注疗效,改善患者预后。该文就心肌缺血/再灌注损伤的机制、保护缺血心肌免受损伤的两种主要方法及其现状进行综述,并进一步阐述它们的应用前景。

控制性灌注血必净注射液对兔后肢缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨控制性灌注血必净注射液对后肢缺血再灌注损伤的保护作用,为临床通过灌注血必净防治肢体缺血后再灌注损伤提供理论依据。方法制备兔后肢缺血再灌注模型(缺血2 h,再灌注4 h),将30只健康大耳白兔应用随机数字表完全随机化分为3组:1血必净灌注组(n=10),再灌注前给予血必净;2盐水对照组(n=10),手术方式同1组,再灌注前给予生理盐水灌注;3假手术组(n=10):手术方式同1组,不予缺血及再灌注。检测各组血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化以及后肢CT灌注参数——血流量比值(r BF)和血容量比值(r BV)的变化。结果 1假手术组术前及术后血清中SOD活性、MDA含量未见明显变化(P>0.05);盐水对照组再灌注后血清中SOD活性较术前略升高(P>0.05),MDA含量较术前明显升高(P<0.01);血必净灌注组再灌注后血清中SOD活性较术前明显升高(P<0.01),MDA含量较术前明显降低(P<0.01)。与假手术组比较,血必净灌注组及盐水对照组再灌注后血清中SOD活性明显提高(P<0.01),MDA含量血必净灌注组明显降低(P<0.01),盐水对照组明显升高(P<0.01);与盐水对照组比较,血必净灌注组灌注后血清中SOD活性明显提高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01)。2与假手术组比较,盐水对照组及血必净灌注组的r BF及r BV均明显下降(P<0.05);与盐水对照组比较,血必净灌注组r BF及r BV均明显升高(P<0.05)。结论控制性灌注血必净注射液可提高兔血清中SOD活性,降低MDA含量,对兔后肢缺血再灌注损伤有保护作用,并且能有效改善后肢灌注量。

心肌保护新方法—持续灌注温血心停跳液技术

心肌保护仍是目前需要进一步研究的课题。传统心肌保护研究的焦点集中在如何减轻心脏停搏时的缺血损伤或复灌后的再灌注损伤,研究结果也表明,化学性停搏加局部低温,以及复灌早期的控制性再灌注只能减轻心肌缺血再灌注损伤的程度,并不能完全消除缺血再灌注损伤。因为这些方法没有从根本上解决心脏停搏期间氧的供需矛盾,心肌缺血缺氧不可避免,对于需长时间停搏的心脏和高危病例,传统的心肌保护方法无法提供满意的心肌保护效果。近年来,心肌保护的方法有很大的发展,尤其是新近提出的持续灌注温血心脏停跳液技术。

缺血预处理减轻缺血再灌注损伤作用机制的研究进展

缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，I／R损伤）是一个十分常见的病理过程，在血管外科、骨科及心胸外科都会经常发生，针对I／R损伤，人们探索了不同的减轻损伤的方法，如使用氧自由基清除剂、白细胞清除剂、低温麻醉和控制性再灌注等。Mully等1986年在实验中使犬心缺血5min再灌注5min，共四个周期，再持续缺血40min后再灌注，发现这样处理后心肌梗死面积比对照组减少了70％，他将这种现象定义为“缺血预处理（ischemia preconditioning，IP）”。此后，IP效应在不同的动物以及不同的组织器官中都得到了证实。现将近年来IP减轻组织器官I／R损伤的作用机制研究进展作一综述。

血停搏液与心肌保护的研究进展

良好的心肌保护是体外循环心脏直视手术的支柱，亦是当今心脏移植手术供心心肌保护亟待解决的重大难题。随着对心肌缺血再灌注的病理变化认识的加深，心肌保护在不断变迁和发展。血停搏液、控制性再灌注及缺血预适应对心肌的保护，已成为心脏外科心肌保护中一个诱人的研究领域。小动物外科作为实验医学的重要组成部分，针对当今医学临床心脏手术中心肌保护存在的突出问题，探讨血停搏液对犬低温体外循环下心肌保护的最佳效应，为小动物临床开展体外循环心脏直视手术提供切实可行的心肌保护措施，同时为医学心脏外科临床及心脏移植的应用研究提供可靠的试验依据，具有重要的理论价值。

深度血液稀释体外循环心肌保护的探讨

深度血液稀释体外循环心肌保护的探讨赵文增，杨栋，徐敬，张明堪，郅兴义，赵松，乔晨晖，胡伟（河南医科大学第一附属医院胸心外科郑州４５００５２）关键词深度血液稀释；体外循环；心肌保护；控制性再灌注在深度血液稀释体外循环下使用何种心肌保护方法更合理，是心外...

硝普钠在预防肺缺血再灌注损伤中的作用及机制

目的探讨硝普钠在预防肺缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法将14头猪随机平均分为对照组和实验组。对照组:在去除肺动脉阻断,恢复自体血流前,给予控制性再灌注[用35℃-37℃再灌注液(去白细胞:改良Buckberg液=4:1),灌注压18 mm Hg,灌注时间10min]。实验组:在去除肺动脉阻断,恢复自体血流前,给予控制性再灌注;后经肺动脉注入硝普钠1.0μg·kg-1·min-1 ×10min。0.5、1和2 h后测两组的血氧分压、肺血管阻力、肺顺应性及肺氧合功能变化;实验结束后,取肺组织测一氧化氮(NO)含量、丙二醛(MDA)含量及肺含水量。结果实验组的左肺氧合功能和肺顺应性明显好于对照组(P<0.05)。肺循环阻力、MDA含量及肺含水量均低于对照组(P <0.01)。实验组和对照组肺组织中NO含量分别为:(114.41±6.77)μmol/L和(56.67±7.42) μmol/L,实验组较对照组明显升高(P<0.01)。结论硝普钠可使肺组织中NO含量显著升高,有效的预防了肺缺血再灌注损伤。

Mipu1蛋白在脑星形细胞瘤中的亚细胞定位

目的Mipu1是在脑缺血预处理时表达上调的基因,本研究拟通过观察Mipu1蛋白在脑星形细胞瘤中的亚细胞定位,为进一步探讨其功能提供线索和思路。方法通过加端PCR扩增1.8 kb的Mipu1开放阅读框插入绿色荧光蛋白编码区的3’末端,构建Mipu1与绿色荧光蛋白GFP的融合表达质粒,并通过脂质体将重组质粒导入脑星形细胞瘤中,通过荧光显微镜观察Mipu1蛋白在正常和H2O2刺激时的亚细胞分布。结果成功构建了Mipu1与GFP的融合表达质粒Mipu1-pEGFP-N1,并观察到Mipu1蛋白在正常和H2O2刺激时均定位于细胞核内。结论Mipu1为一核蛋白,结合其蛋白质结构特征,推测其可能为一核转录因子。