腥掷孢酵母17wy1的分离、鉴定及对小麦白粉病防效初探

采用26S rDNA序列对分离自异常生长小麦白粉菌分生孢子上的菌株17wy1进行鉴定,明确其分类地位;通过孢子萌发抑制试验、室内盆栽和田间小麦白粉病防治试验测定17wy1发酵液对小麦白粉菌分生孢子萌发的影响及对小麦白粉病的生防效果,并通过定量PCR技术分析小麦病程相关蛋白基因PR1、PR2、PR5、TaPAL的表达模式,解析17wy1的拮抗机制,为小麦白粉病的生物防治提供依据。结果表明,菌株17wy1为腥掷孢酵母(Golubevia albescens),其发酵液(5×107个/mL)对小麦白粉菌分生孢子萌发抑制率为85.1%,对室内盆栽麦苗和田间小麦白粉病的防效分别为58.5%和69.8%;喷施酵母17wy1发酵液后,室内显症麦苗体内的病程相关蛋白基因PR1、PR5被诱导显著上调表达。可见,酵母菌17wy1可抑制小麦白粉菌分生孢子萌发,对室内盆栽麦苗和田间小麦白粉病具有较好的防治作用,是小麦白粉病的潜在生防菌。

锁掷孢酵母胞外多糖体外抗氧化和调节糖脂代谢的研究

以近粉红锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus)PFY49为出发菌株,探究近粉红锁掷孢酵母PFY49产胞外多糖(EPS)的体外抗氧化、降血糖和胆汁酸结合能力,以及分析生物活性间的相关性。结果表明,近粉红锁掷孢酵母PFY49 EPS具有很好的持水性、水溶性、乳化性、热稳定性。同时具有良好的抗氧化活性,且呈剂量依赖性,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、羟基自由基及亚硝基(NO2-)最大清除能力分别为(13.62±0.62)%、(66.82±0.61)%、(19.40±0.14)%、(67.45±0.36)%,总还原力(TRP)为0.33±0.01。近粉红锁掷孢酵母PFY49 EPS对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的最大抑制率分别为(51.47±0.84)%和(67.02±1.14)%,并且具有较好的体外胆汁酸结合能力。

掷孢酵母吸附去除铬的性能研究

通过菌种培养、分离与筛选 ,获得一株对铬具有很强还原与吸附性能的掷孢酵母(Sporobolomycetaceaesp ) .该菌株适宜的吸附pH值是 6— 9,1g培养 60h的菌体在 2 0mlpH 7的 1 5mg·l- 1 铬液中 ,吸附 8h后 ,对铬的去除率最高达到 1 0 0 % .在浓度分别为 1 5 ,30 ,5 0 ,1 0 0 ,30 0mg·l- 1 的铬液中 ,每克菌体对铬的吸附量与对数曲线y=1 72 5 8ln(x) - 2 0 9 49相吻合 ,相关系数为 0 9889,对吸附后菌体破壁测得细胞质内含铬量最高 ,达 65 5 % .通过扫描电子显微镜发现 ,处理 1 5mg·l- 1 铬液 8h后 。

掷孢酵母类胡萝卜素的提取与鉴定

将一株从草莓果实上分离得到的能够积累类胡萝卜素的掷孢酵母利用二甲基亚砜法进行色素提取,经过薄层层析法(thin layer chromatography,TLC)、分光光度计法及高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测,与粘红酵母标准菌株R.glutinis NBRC 1125~T、掷孢酵母标准菌株S.pararoseus CBS0376~T及β胡萝卜素标准品进行对比,结果表明:掷孢酵母野生型NGR主要积累3种色素,分别为红酵母红素、圆酵母素和β-胡萝卜素,其中圆酵母素和β-胡萝卜素及其异构体(推测为13-顺式-β-胡萝卜素)含量最多(分别约为653.22μg/g和635.10μg/g),红酵母红素积累量较少,约为150.37μg/g。野生型NGR的紫外诱变突变株Y9为高产β-胡萝卜素突变株,β-胡萝卜素积累量可占总类胡萝卜素比例的54%,W1为不产β-胡萝卜素,红酵母红素和圆酵母素积累量减少的粉色突变株,W4为不产色素的白化突变株。在常规酵母培养基培养下,野生型NGR积累总色素含量可达1438.69μg/g。

掷孢酵母对含铬废水的生物吸附

研究了掷孢酵母(Sporobolomycetaceaesp.)对含铬电镀废水的生物吸附性能.结果表明,废水的pH值和菌体的培养时间是影响该废水生物吸附的重要因素,适宜的pH为3 5～5 3;培养时间为55～72h.活性污泥的联合使用能有效地促进铬的生物吸附效果.当污泥质量(湿)浓度为10g/L时,25g/L菌体对34 4mg/L总Cr的去除与33 0mg/LCr6+的还原分别高达87 3%、91 9%.对吸附机理和毒性的初步探讨结果表明,菌体对铬的吸附由表面吸附、跨壁膜运输和体内积累组成,其中体内积累对吸附的贡献值最大,达到总吸附量的70 6%;细胞壁对铬毒性的抗性理想,300mg/L铬不会对细胞壁产生0 1nm以上的形态破坏;活性污泥的联合使用有助于铬的还原.

掷孢酵母曝气吸附处理重金属铬

研究了掷孢酵母与活性污泥曝气处理含铬废水的生物吸附作用。结果表明,适当的菌体浓度(4g/L)和污泥浓度(10g/L)有利于铬的还原与去除;水样的pH值是影响铬吸附的重要因素,铬的生物还原与去除率随着pH值的上升而下降,当pH=3时对铬的去除效果最佳;投加葡萄糖与尿素均有利于铬的生物还原,处理24h后对铬的还原率高达100%。

以掷孢酵母作为伴生菌产生VC前体KGA的研究

以掷孢酵母作为伴生菌与氧化葡萄糖酸杆菌组成新混菌体系 ,通过测定生长代谢曲线 ,对其产酸性能和特点进行了研究。结果显示 :相同条件下 ,新菌系产酸能力高于现有菌系 ,酸量增加 5 - 7mg/ml,发酵周期缩短 6 - 8h,酸转化率提高 3- 4 % ,最高产酸点pH值下降约 0 5个单位 ,表现出较大的产酸潜力和可修饰性。

拟粉红锁掷孢酵母降解展青霉素的机制

展青霉素(PAT)是一类主要由曲霉属和青霉属等真菌产生的有毒次级代谢产物,主要污染水果及其制品,严重威胁着人类的健康。为了寻找一种安全高效的PAT脱毒方法,近年来采用生物法清除PAT已成为主要的研究方向。作者研究了拟粉红锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus)对PAT降解的影响及其降解机制。结果显示,S.pararoseus可以显著降低苹果伤口处PAT的积累量,体外实验发现S.pararoseus与PAT(5μg/mL)共同培养18 h,PAT可以被S.pararoseus完全降解。S.pararoseus对PAT的降解作用既不是酵母细胞壁的吸附作用,也不是细胞的吸收作用,而是细胞正常代谢下产生的胞内酶对PAT具有降解作用。本研究有助于了解S.pararoseus降解PAT的作用机制,为真菌毒素的生物降解提供了新的理论依据。

拟粉红锁掷孢酵母降解展青霉素的蛋白质组学

展青霉素(PAT)又称棒曲霉素,是一种主要由曲霉属、青霉属等产生的有毒的真菌次级代谢产物,主要污染水果及其制品,具有细胞毒性、致畸性及遗传毒性等,严重威胁人类的健康。近年来,生物防治因其安全、绿色、高效等优点成为一种具有良好发展前景的控制水果真菌毒素产生的方法。有研究表明,部分酵母菌可以直接抑制PAT的产生,有的甚至可以降解PAT,但具体的降解机制尚不明确。作者所在实验室前期研究发现,拟粉红锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus Y16)能够在体外降解PAT,但具体的降解机制尚未明确,作者利用蛋白质组学技术对S. pararoseus Y16降解PAT的机制进行了初步研究,可以为真菌毒素的生物降解提供新的理论依据。

锁掷孢酵母菌粉挂面的研制

锁掷孢酵母菌(Sporidiobolus pararoseus y7)菌粉富含胡萝卜素,其中β-胡萝卜素可作为VA营养强化剂添加到挂面中,以研制富含类胡萝卜素营养强化挂面。以花色挂面感官品质为指标,通过添加辅料食盐和面粉改良剂葡萄糖氧化酶、海藻酸钠、复合磷酸盐来提高锁掷孢酵母菌菌粉挂面品质。经过单因素和正交试验得出最佳富含胡萝卜素挂面配方:面粉100%、菌粉2%、食盐2%、海藻酸钠0.09%、葡萄糖氧化酶0.9×10-4%、复合磷酸盐0.4%。该胡萝卜素挂面配方感官品质评分为90.58,理化指标达到花色挂面的标准要求。

紫外线诱变锁掷孢酵母发酵产γ-癸内酯的初探

对2株锁掷孢酵母生产γ-癸内酯的情况进行了初步研究,确定了发酵最佳条件。由于产量过低,确定以鲑色锁掷孢酵母为出发菌株,利用紫外线诱变技术,达到明显提高γ-癸内酯的目的。出发菌株γ-癸内酯的产量仅为0.097g/L,诱变后γ-癸内酯产量提高到6.009g/L。

锁掷孢酵母固态发酵产β-胡萝卜素的工艺优化

以近玫色锁掷孢酵母S3-1为发酵菌株,研究固态发酵的培养基成分和发酵条件对β-胡萝卜素产量的影响。通过设计单因素及响应面试验对其发酵工艺进行优化,优化后的最佳发酵条件为啤酒糟与豆粕质量比3∶7、装料量22.80 g/250 mL、蛋白胨添加量0.5 g/L、接种量13.07 mL/100 g干基、初始pH 5.0、培养基含水质量分数55.0%、发酵温度30.0℃、发酵时间84 h。在此发酵条件下,β-胡萝卜素产量为2.71 mg/kg干基,比优化前提高了70%。

锁掷孢酵母菌粉对面粉品质的影响研究

锁掷孢酵母菌菌粉富含β-胡萝卜素，可作为维生素A营养强化剂添加到面粉中，制作富含β-胡萝卜素营养强化面食品。通过面粉粉质和拉伸试验发现，锁掷孢酵母菌菌粉对粉质具有恶化作用，向面粉中添加质量分数为0％-3％锁掷孢酵母菌菌粉制作面条，发现对面条的品质影响较小。因此，虽然锁掷孢酵母菌菌粉对面粉品质具有恶化作用，但少量添加则对面食品质影响较小，同时能起到维生素A营养强化作用。

掷孢酵母发酵红薯淀粉酶解液产油脂的发酵条件

利用红薯粗淀粉酶解液为碳源进行发酵试验,采用单因素和均匀设计试验法对掷孢酵母(Sporobolomyces reseus)As.2.618产油脂发酵培养基进行优化,考察了二价金属离子及氧载体正十二烷对油脂积累的影响,以期降低微生物油脂的成本.通过DPS软件对均匀设计结果进行二次逐步回归分析,给出最优培养基组成(ρ/gL-1)为:还原糖103、酵母粉11.5、磷酸二氢钾0.3、硫酸镁0.15.在此基础上添加30mgL-1硫酸锌.在发酵条件为初始pH6.0,发酵温度27℃,转速200r/min,装液量30mL/500mL三角瓶,接种量5%,发酵24h后添加2gL-1CaCO3和2%(V/V)正十二烷,振荡培养至168h,菌体生物量高达35.05gL-1,油脂产量也达到11.98gL-1.

锁掷孢酵母产胞外多糖发酵条件优化

为进一步提高酵母菌产酵母胞外多糖(EPS)的能力,该研究以近粉红锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus)PFY-Z1为出发菌株,筛选出其最适产糖发酵培养基,并以此为基础,联合应用单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验和中心组合设计(CCD)试验,优化菌株产EPS的最佳发酵条件。结果表明,菌株最佳培养基配方为葡萄糖15 g/L,硫酸铵15 g/L,硫酸镁1.8 g/L,氯化钙0.28 g/L,磷酸氢二钾0.24 g/L,氯化钠0.6 g/L。菌株最佳培养条件为培养温度28℃、摇床转速210 r/min、接种量5%、装液量100 mL/250 mL、培养时间6 d,培养基初始pH值5.10条件下,EPS含量最高,为(4.60±0.13)g/L,是优化前的1.40倍。该研究为今后利用S.pararoseus PFY-Z1产胞外多糖奠定了基础,同时也为酵母菌EPS的工业化制备和生产提供了理论依据。

两种复合诱变方法选育掷孢酵母高产油脂菌株

以掷孢酵母(Sporobolomyces reseus)As.2.618为原始菌株,进行紫外-亚硝基胍和紫外-硫酸二乙酯两种复合诱变筛选,以获得高产油脂菌株。采用紫外-亚硝基胍复合诱变及马来酰肼初筛,突变株UV-NTG-2经摇瓶发酵复筛,生物量、油脂含量、油脂产量分别为39.01 g/L、19.83%、7.74 g/L,较原始菌株分别提高了42.42%、52.30%、116.81%。采用紫外-硫酸二乙酯复合诱变,经浅蓝菌素初筛及摇瓶复筛,突变株UV-DES-2的生物量、油脂含量、油脂产量分别为38.96g/L、20.80%、8.10 g/L,较原始菌株分别提高了42.24%、59.75%、126.89%。诱变菌株的油脂脂肪酸组成中C18∶1的相对含量较原始菌株分别提高了11.88个百分点和6.69个百分点,且C20∶1的含量降低,说明突变菌株油脂的流动性较原始菌株有所提高。经5次连续传代表明,诱变菌株遗传性状稳定。

掷孢酵母及其应用研究进展

掷孢酵母是一类能够弹射孢子(称为掷孢子)的酵母菌,主要由Bullera属、Sporobolomyces属和Sporidiobolus属组成,该类酵母分布广泛。在实验室培养过程中多以芽殖、掷孢子以及菌丝状生长,Sporidiobolus属的菌株经配对能够形成有性孢子。分子生物学手段的开展使掷孢酵母各类群间的系统发育关系更加明确。本文结合本实验室的研究结果,阐述了掷孢酵母存在的细胞分化现象,并且推测细胞分化有助于菌体抵抗逆境。因此,掷孢酵母可以作为一种潜在的模式生物对抗逆机制进行探究。在食品和环境问题备受瞩目的今天,掷孢酵母以其可自身积累酯类、色素、酶类等有益代谢产物的特点,及治理污染物特性越来越受到人们的关注。

掷孢菌科的研究——Ⅲ.不同掷孢酵母属产掷孢子的能力及担子菌酵母形成特大厚垣孢子的规律

本文以分离自中国的大量掷孢酵母为材料,研究了不同属的掷孢酵母生掷孢子的能力,以及此能力的持久性,发现属间差异很大。此外还报道了142株不同酵母的产厚垣孢子的情况,发现与担子菌有关的4属酵母在接近致死温度时,都会出现特大厚垣孢子如红掷孢酵母(Sporobolomyces),布勒掷孢酵母(Bullera),红酵母(Rhodotorula)与隐球酵母(cryptococcus),而属于子囊菌的酵母属(Saccharomyces)则无此现象,从而对某些接近担子菌的酵母又增加了新的认识。

一株嗜甲醇的甲基营养型酵母的筛选与鉴定

从东经119°2′16″、北纬33°32′47″的湖泊岸边土壤中筛选到一株理想的甲基营养型酵母。该菌呈长圆形,直径3μm,长可以达到5μm,经18SrDNA分析鉴定其为赭色掷孢酵母(Sporobolomyces carnicolor);该菌除可利用甲烷外,亦可利用甲醇、乙醇、葡萄糖、甘油、淀粉等,甲醇是其最佳碳源,最佳浓度为2.0%;采用甲醇-甲烷两段法培养,该菌的OD600值可达到2.1。

维生素C二步发酵的新组合菌系

以掷孢酵母作为伴生菌与氧化葡萄糖酸杆菌组成新混菌体系 ,对其产酸性能和特点进行了研究。实验室摇瓶结果显示 :新菌系混菌状态不同 ,产酸不同 ,以KGA含量为 4 8,小菌 /掷孢酵母为 31∶1种液接种时 ,最有利于产酸 ,增加接种生物量可提高产酸速度 ,缩短发酵周期 ,但不影响最终产酸量。相同条件下 ,新菌系产酸能力高于现有菌系 ,酸量增加 5mg/ml～ 7mg/ml,发酵周期缩短 6h～ 8h ,酸转化率提高 3%～ 4 % ,最高产酸点pH值下降约 0 5。