中波紫外线诱导的提前衰老成纤维细胞中环状RNA的表达及分析

目的:对于中波紫外线诱导的提前衰老的人类真皮成纤维细胞(UVB stress induced premature senescence,UVB-SIPS),笔者使用基因芯片筛选了其中环状RNA的表达谱。方法:构建UVB-SIPS模型;采用β-gal染色、细胞周期、CCK8(cell counting kit)检测衰老成纤维细胞;基因芯片技术筛选差异表达的环状RNA;聚合酶链式反应验证相关环状RNA;利用Clusterprofiler r package,对上下调基因分别进行KEGG和GO的富集分析。结果:与对照组比较(差异表达倍数≥1.5,P<0.05),共有472个差异表达的环状RNA,其中228个环状RNA上调,244个环状RNA下调。在472个差异表达的环状RNA中随机选择了8个环状RNA进行聚合酶链式反应。其中有5个环状RNA(hsa_circ RNA_100797,hsa_circ RNA_100686,hsa_circ RNA_400036,hsa_circ RNA_101755,hsa_circ RNA_003794)与基因芯片的结果一致。GO分析显示,UVB-SIPS组细胞中差异表达的环状RNA亲本基因与细胞对紫外线辐射的反应、DNA修复复合物、有丝分裂、微管蛋白结合等注释条目有关;KEGG分析显示,UVB-SIPS组细胞与未处理组细胞相比,差异表达的环状RNA的亲本基因可能参与与衰老相关的细胞周期、p53信号通路、PPAR信号通路等的调节。结论:本研究初步揭示了提前衰老的人类真皮成纤维细胞中环状RNA的表达,可为未来研究光老化发生机制奠定基础。

子痫前期氧化应激致胎盘提前衰老的研究进展

子痫前期(PE)发病机制复杂,与氧化应激导致胎盘提前衰老有关。胎盘提前衰老引起的胎盘功能减退主要由合体滋养层提前衰老导致,可由端粒缩短、DNA损伤、线粒体功能障碍、衰老相关β半乳糖苷酶分泌增多、沉默信息调节因子-1抑制和羰基化蛋白积累等各种衰老模式引起。氧化应激在PE的发病机制中已较为明确。氧化应激可导致沉默信息调节因子-1表达下调,4-羟基壬烯醛及羰基化蛋白积累等。本文作者就PE中氧化应激导致胎盘提前衰老的研究进展进行综述,以便更好地了解PE的病理生理学原因。

p21小干扰RNA对低浓度过氧化氢诱导的黑素细胞提前衰老和黑素传递的影响

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制p21表达对低浓度过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞提前衰老的影响,以及黑素细胞提前衰老与黑素传递功能间的关系。方法:p21 siRNA序列转染黑素细胞,采用荧光显微镜、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及western blot检测抑制效率。将正常人黑素细胞分为对照组(阴性siRNA转染处理)、p21 siRNA组(p21 siRNA转染处理)、阴性siRNA+H2O2组(阴性siRNA转染24 h后加入400μmol/L H2O2处理)及p21 siRNA+H2O2组(p21 siRNA转染24 h后加入400μmol/L H2O2处理)。采用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;EdU细胞增殖检测细胞增殖能力;western blot检测各组p21和树突调节蛋白[RhoA、Rac1及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)]表达;免疫荧光检测细胞骨架蛋白和黑素小体分布。结果:p21siRNA转染黑素细胞后明显抑制p21 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。与阴性siRNA+H2O2组比较,p21 siRNA+H2O2组β-半乳糖苷酶染色阳性率降低、细胞增殖能力增加及p21蛋白表达降低(P<0.05)。与对照组比较,阴性siRNA+H2O2组树突负性调节因子Rho A蛋白表达升高,而正性调节因子Rac1及Cdc42蛋白表达均降低,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均降低(P<0.05)。经p21siRNA预处理后,p21 siRNA+H2O2组较阴性siRNA+H2O2组Rho A蛋白表达降低,Rac1和Cdc42蛋白表达均增高,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均增高(P<0.05)。结论:低浓度H2O2诱导提前衰老的黑素细胞存在黑素传递功能障碍,p21 siRNA可改善低浓度H2O2诱导的黑素细胞提前衰老以及受损的黑素传递功能。

p53相关的细胞周期调控在UVB诱导的皮肤成纤维细胞早衰中的作用

目的探讨中波紫外线(UVB)诱导皮肤成纤维细胞(HSF)应激诱导的早衰(SIPS)后细胞周期调控的变化。探讨p53相关的生长停滞、细胞凋亡相关基因表达在UVB诱导的SIPS中的变化情况。方法对UVB诱导发生SIPS的HSF,流式细胞仪检测细胞周期;Western blot法检测衰老信号通路中p53,p21,p16的表达;实时荧光定量PCR芯片检测与p53相关的生长停滞(p53,p21,p16,p19)、凋亡(bax,bcl-2)基因的mRNA表达水平。结果流式细胞仪对UVB诱导的SIPS模型进行细胞周期检测发现,大部分细胞发生了G1期阻滞;衰老通路中p53,p21和p16的表达都明显增加;实时荧光定量PCR芯片检测发现,与生长停滞相关的抑癌基因p53,p21,p16,p19的表达均上调;p53下游的凋亡相关基因中的抑凋亡基因bcl-2表达稍上调,而凋亡基因bax表达下调。结论G1期阻滞和衰老信号通路蛋白表达增加进一步印证了UVB诱导HSF发生的SIPS。p53信号通路相关基因的表达变化提示UVB诱导的SIPS可能具有与p53相关的抗凋亡作用,但其中p53信号通路所起的作用还需更进一步的实验探索。

胃肠再生复原技术对胃肠器官生命的影响

目的回顾性总结、分析胃肠再生复原技术对胃肠器官生命的影响。方法给予胃肠道疾病患者和胃肠器官衰老者,规范服用胃肠胶囊并执行生物钟饮食计划,观察其胃肠道黏膜形态、胃肠功能、胃肠道症状的改变,分析胃肠胶囊对胃肠器官以及人体生命活力的影响。结果胃肠的良性疾病(溃疡、炎症)实现了生理性复原,衰老胃肠恢复了年轻状态,所有受试者胃肠器官的生命活力均增强。结论胃肠再生复原技术不仅能够使胃肠内的成体细胞转化为干细胞,保障胃肠器官生理结构的完整和功能的正常,而且还可以实现胃肠器官的"二重生命",在加强和保障胃肠器官基本生命的同时,激活胃肠器官再生生命活力,是胃肠疾病及胃肠衰老首选的养护方法。