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分蘖洋葱叶片RNA提取方法的比较和分析 被引量:5
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作者 黄钰 李旭双 +1 位作者 陈典 王勇 《北方园艺》 CAS 北大核心 2011年第14期111-113,共3页
以新鲜的分蘖洋葱叶片为材料,比较了Trizol法、Triz01改进法、SDS法、SDS改进法以及柱式植物RNA提取法提取总RNA的效果。结果表明:Trizol法和Trizol改进法所提取的RNA得率很低,且不能有效除去叶片中的多糖成分;SDS改进法能够有效的... 以新鲜的分蘖洋葱叶片为材料,比较了Trizol法、Triz01改进法、SDS法、SDS改进法以及柱式植物RNA提取法提取总RNA的效果。结果表明:Trizol法和Trizol改进法所提取的RNA得率很低,且不能有效除去叶片中的多糖成分;SDS改进法能够有效的去除分蘖洋葱叶片中的多糖,提取的RNA中28S RNA亮度约为18SRNA的2倍,OD260/OD280值介于1.7~2.2之间,但RNA的得率偏低,约为56.32/μg/g;柱式植物RNA提取法提取的RNA28S、18S、5S条带清晰,完整性好,RNA的得率最高,为123,58/2μg/g,完全适合于分蘖洋葱进一步的分子生物学研究。 展开更多
关键词 RNA 分蘖洋葱 SDS改进 式植物RNA提取
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磁珠法在120例丙型肝炎病毒核酸定量检测中的应用效果观察 被引量:2
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作者 张英哲 宋英兰 《延边大学医学学报》 CAS 2020年第3期205-207,共3页
[目的]观察磁珠法在丙型肝炎病毒核酸定量检测中的应用效果.[方法]选择自2018年1月至2020年1月间采集的120例丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒(HCV)血清标本,其中低病毒载量22例,中病毒载量64例,高病毒载量34例,采用提取柱法与磁珠法核酸定... [目的]观察磁珠法在丙型肝炎病毒核酸定量检测中的应用效果.[方法]选择自2018年1月至2020年1月间采集的120例丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒(HCV)血清标本,其中低病毒载量22例,中病毒载量64例,高病毒载量34例,采用提取柱法与磁珠法核酸定量检测,根据浓度1×10^(8)样本梯度稀释结果比较2种核酸定量检测方法的灵敏度和线性范围.[结果]磁珠法HCV核酸定量检测阳性率为70.0%,与提取柱法的66.7%比较差异无统计学意义(P>0.05);22例低病毒载量的HCV血清标本磁珠法检测阳性率为40.9%,明显高于提取柱法的9.1%(χ^(2)=5.9394,P=0.0148);磁珠法灵敏度和线性范围分别为39 U/mL和3.9×(10^(1)~10^(8)),与提取柱法比较差异有统计学意义(P<0.05).[结论]磁珠法与提取柱法在中、高病毒载量的检测中一致性较好,在低病毒载量的检测中磁珠法较提取柱法核酸定量检测的灵敏度更高,线性范围更广. 展开更多
关键词 丙型肝炎 病毒感染 核酸定量检测 磁珠 提取柱法
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磁珠法在HCVRNA定量检测中的临床应用 被引量:6
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作者 吴斌 李彩东 +3 位作者 段正军 刘学梅 李惠军 李鑫 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第15期2090-2092,2092,共3页
目的探讨国产丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的临床应用价值,评价其灵敏度、线性范围。方法收集288例慢性丙型肝炎患者血清,分别采用磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂和目前国内主流的柱提取试剂测定HCV RNA病毒载量、应用贝克曼AU-68... 目的探讨国产丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的临床应用价值,评价其灵敏度、线性范围。方法收集288例慢性丙型肝炎患者血清,分别采用磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂和目前国内主流的柱提取试剂测定HCV RNA病毒载量、应用贝克曼AU-680全自动生化分析仪测定血清ALT水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗-HCV。结果在288例抗-HCV阳性样本中,柱提取法的阳性率为40.63%(117/288);磁珠法的阳性率为41.67%(120/288);ALT水平与HCV RNA载量无相关性(P>0.05),但ALT异常率与HCV RNA载量呈正相关。在低病毒载量组中,柱提取法有3例未检出,而磁珠法检测这3例丙型肝炎患者标本为阳性。结论两种核酸提取试剂试剂在中、高病毒载量组中,具有较好的一致性,但在低病毒载量组中,磁珠法灵敏度更高,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 磁珠 提取 灵敏度
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4-羟基苯基卟吩的合成和分离方法改进
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作者 欧阳玉祝 彭清静 邹晓勇 《吉首大学学报》 2000年第1期78-81,共4页
对单羟基苯基卟吩 [5 - (4-羟基苯基 ) - 10 ,15 ,2 0 -三苯基 - 2 1H ,2 3H -卟吩 (H2 TPPOH) ]和多羟基苯基卟吩[5 ,10 -二 (4-羟基苯基 ) - 15 ,2 0 -二苯基 - 2 1H ,2 3H -卟吩 (H2 TPP(OH) 2 )、5 -苯基 - 10 ,15 ,2 0 -三 (4-羟... 对单羟基苯基卟吩 [5 - (4-羟基苯基 ) - 10 ,15 ,2 0 -三苯基 - 2 1H ,2 3H -卟吩 (H2 TPPOH) ]和多羟基苯基卟吩[5 ,10 -二 (4-羟基苯基 ) - 15 ,2 0 -二苯基 - 2 1H ,2 3H -卟吩 (H2 TPP(OH) 2 )、5 -苯基 - 10 ,15 ,2 0 -三 (4-羟基苯基 ) - 2 1H ,2 3H -卟吩 (H2 TPP(OH) 3 ) ]的分离方法作了改进 实验表明 ,分离各种羟基苯基卟吩 ,产物纯度高 ,分离效果好 ,并可节省大量洗脱剂 ,缩短了柱分离时间 同时 ,还考察了配料比 ,吡咯溶液的滴加速度和操作方式对合成各种羟基苯基卟吩产率的影响 采用 3∶1.0 5∶4(苯甲醛 :对羟基苯甲醛 :吡咯 ,摩尔比 ) ,3min滴完吡咯溶液 ,强烈的电动搅拌 ,可提高H2 展开更多
关键词 4-羟基苯基卟吩 合成 分离 分离洗脱-Soxhlet提取 配料比 产率
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磁珠提取法和离心柱提取法在实时荧光定量聚合酶链反应中幽门螺杆菌核酸提取效果的对比研究 被引量:2
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作者 彭贤慧 周丽雅 +2 位作者 何利华 宋志强 张建中 《实用心脑肺血管病杂志》 2017年第4期51-55,共5页
目的比较磁珠提取法和离心柱提取法在实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)中幽门螺杆菌(HP)核酸提取效果、重复性及临床标本检测能力。方法将100~10-6系列梯度稀释的HP标准菌株作为模板,分别采用磁珠提取法和离心柱提取法平行提取HP核酸,比... 目的比较磁珠提取法和离心柱提取法在实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)中幽门螺杆菌(HP)核酸提取效果、重复性及临床标本检测能力。方法将100~10-6系列梯度稀释的HP标准菌株作为模板,分别采用磁珠提取法和离心柱提取法平行提取HP核酸,比较两种提取方法的核酸提取效果、变异系数(CV);将35份胃液标本作为模板,分别采用磁珠提取法和离心柱提取法平行提取HP核酸,比较两种提取方法对临床标本的检测能力。结果两种核酸提取方法提取100、10-5浓度HP标准菌株核酸的CT值比较,差异无统计学意义(P>0.05);离心柱提取法提取10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-6)浓度HP标准菌株核酸的CT值低于磁珠提取法(P<0.05)。两种提取方法提取HP标准菌株核酸的CV比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两种提取方法提取胃液HP核酸的CT值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论磁珠提取法在实时荧光定量PCR中的HP核酸提取效果优于离心柱提取法,而其重复性及临床样本检测能力与离心柱提取法相当。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 幽门螺杆菌 磁珠提取 离心提取
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祛痘化妆品中3种致病菌的同步快速检测研究
6
作者 朱庆丽 徐加兵 +1 位作者 马若群 李倚云 《日用化学品科学》 CAS 2022年第8期23-26,64,共5页
采用荧光定量PCR技术,建立祛痘化妆品中3种致病菌同步快速检验方法,提高检测效率。采用人工染菌方式,离心柱法提取混合模板DNA,设计特异性引物和探针,在同一扩增条件下,完成3种菌同步检测。建立3种菌同时检测荧光定量PCR方法,检测可在2... 采用荧光定量PCR技术,建立祛痘化妆品中3种致病菌同步快速检验方法,提高检测效率。采用人工染菌方式,离心柱法提取混合模板DNA,设计特异性引物和探针,在同一扩增条件下,完成3种菌同步检测。建立3种菌同时检测荧光定量PCR方法,检测可在24 h内完成,检出限分别为金黄色葡萄球菌1.1×10 CFU/mL,铜绿假单胞菌为1.3×10 CFU/mL,肺炎克雷伯菌为1.3×10 CFU/mL。研究建立的方法灵敏度高、特异性强,可以提高检测效率,建议在祛痘化妆品微生物检测现有标准的基础上作为有效的补充。 展开更多
关键词 祛痘化妆品 人工染菌 离心提取DNA 荧光定量PCR
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3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的制备及其对HeLa细胞的抗增殖活性研究 被引量:3
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作者 施琦渊 吴家琪 +4 位作者 於佳露 张心怡 李钦 褚建波 施菁 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1738-1742,共5页
目的制备高纯度3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸,并评价其对人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖活性。方法采用柱色谱提取法和中压液相色谱法从奇蒿花中分离、纯化得到高纯度的3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。采用MTT法评价该化合物对人宫颈癌HeLa细胞的体外抗... 目的制备高纯度3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸,并评价其对人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖活性。方法采用柱色谱提取法和中压液相色谱法从奇蒿花中分离、纯化得到高纯度的3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。采用MTT法评价该化合物对人宫颈癌HeLa细胞的体外抗增殖活性。结果柱色谱提取的提取率和中压液相色谱法的回收率分别为99.0%,61.2%,总回收率为54.0%。随着3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸浓度升高,HeLa细胞存活率下降,细胞形态损伤增加,受试药物的IC50值为26.5μg·mL-1。结论本研究提供了一种简单、高效、节能的3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸制备方法。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸对HeLa细胞具有一定的体外抗增殖活性。 展开更多
关键词 3 5-O-二咖啡酰基奎宁酸 奇蒿 色谱提取 中压液相色谱 抗增殖活性
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HCV RNA定量检测试剂的临床应用 被引量:4
8
作者 徐丹 吴小宁 《湖南师范大学学报(医学版)》 2012年第2期83-87,共5页
目的:探讨HCV RNA定量检测试剂的临床应用效果。方法:通过和市场上广泛使用的柱提取试剂比实验,对一种丙型肝炎病毒磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂的临床使用进行评估。结果:①浓度在5.00E+03~5.00E+06 IU/mL的样本,两种试剂的定... 目的:探讨HCV RNA定量检测试剂的临床应用效果。方法:通过和市场上广泛使用的柱提取试剂比实验,对一种丙型肝炎病毒磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂的临床使用进行评估。结果:①浓度在5.00E+03~5.00E+06 IU/mL的样本,两种试剂的定量结果与理论靶值均具有很好的对应性,具有较好的重复性和精密度;对于1.00E+03IU/mL以下的样本,磁珠法的定量结果重复性好,定量准确;而柱提取法大部分均未能检出。②对于2种方法检测的339例临床样本,中高病毒载量组柱提取法检测>5.00E+02IU/mL有147例,两种试剂定量结果基本一致,相关性r为0.9413。3 339例临床血清样本中5例样本磁珠法检测为阳性,而柱提取法检测为阴性,P<0.01,二者有显著性差异。这5例样本,丙肝肝炎抗体检测均为阳性。结论:①对于中高病毒载量的样本,两种试剂均具有良好的检测效果;②磁珠法对比柱提取法在低病毒载量区域,灵敏度更高,同时操作相对简单,不易出现污染与脱靶,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 荧光定量PCR 磁珠 提取
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Comparative studies of two methods for miRNA isolation from milk whey 被引量:1
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作者 Xiao-lu JIN Zi-hai WEI +2 位作者 Lan LIU Hong-yun LIU Jian-xin LIU 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2015年第6期533-540,共8页
Micro RNAs(mi RNAs) from milk whey have been considered for their potential as noninvasive biomarkers for milk quality control and disease diagnosis. However, standard protocols for mi RNA isolation and quantificati... Micro RNAs(mi RNAs) from milk whey have been considered for their potential as noninvasive biomarkers for milk quality control and disease diagnosis. However, standard protocols for mi RNA isolation and quantification from milk whey are not well established. The objective of this study was to compare two methods for the isolation of mi RNAs from milk whey. These two methods were modified phenol-based technique(Trizol LS followed by phenol precipitation, the TP method) and combined phenol and column-based approach(Trizol LS followed by cleanup using the mi RNeasy kit, the TM method). Yield and quality of RNA were rigorously measured using a Nano Drop ND-1000 spectrophotometer and then the distribution of RNA was precisely detected in a Bioanalyzer 2100 instrument by microchip gel electrophoresis. Several endogenous mi RNAs(bta-mi R-141, bta-mi R-146 a, bta-mi R-148 a, bta-mi R-200 c, bta-mi R-362, and bta-mi R-375) and an exogenous spike-in synthetic control mi RNA(cel-mi R-39) were quantified by real-time polymerase chain reaction(PCR) to examine the apparent recovery efficiency of milk whey mi RNAs. Both methods could successfully isolate sufficient small RNA(200 nt) from milk whey, and their yields were quite similar. However, the quantification results show that the total mi RNA recovery efficiency by the TM method is superior to that by the TP method. The TM method performed better than the TP for recovery of milk whey mi RNA due to its consistency and good repeatability in endogenous and spike-in mi RNA recovery. Additionally, quantitative recovery analysis of a spike-in mi RNA may be more accurate to reflect the milk whey mi RNA recovery efficiency than using traditional RNA quality analysis instruments(Nano Drop or Bioanalyzer 2100). 展开更多
关键词 Method Milk whey mi RNA Spike-in miRNA
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Intrinsic mode characteristic analysis and extraction in underwater cylindrical shell acoustic radiation 被引量:4
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作者 LIU QingYu FANG ShiLiang +3 位作者 CHENG Qiang CAO Jin AN Liang LUO XinWei 《Science China(Physics,Mechanics & Astronomy)》 SCIE EI CAS 2013年第7期1339-1345,共7页
Target dimension is important information in underwater target classification. An intrinsic mode characteristic extraction method in underwater cylindrical shell acoustic radiation was studied in this paper based on t... Target dimension is important information in underwater target classification. An intrinsic mode characteristic extraction method in underwater cylindrical shell acoustic radiation was studied in this paper based on the mechanism of shell vibration to gain the information about its dimension instead of accurate inversion processing. The underwater cylindrical shell vibration and acoustic radiation were first analyzed using mode decomposition to solve the wave equation. The characteristic of acoustic radiation was studied with different cylindrical shell lengths, radii, thickness, excitation points and fine structures. Simulation results show that the intrinsic mode in acoustic radiation spectrum correlates closely with the geometry dimensions of cylindrical shells. Through multifaceted analysis, the strongest intrinsic mode characteristic extracted from underwater shell acoustic radiated signal was most likely relevant to the radiated source radius. Then, partial information about unknown source dimension could be gained from intrinsic mode characteristic in passive sonar applications for underwater target classification. Experimental data processing results verified the effectiveness of the method in this paper. 展开更多
关键词 cylindrical shell mode decomposition acoustic radiation characteristic
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