搜风祛痰中药对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块自噬相关蛋白beclin1和LC3的影响

目的观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块自噬相关蛋白beclin1和LC3的影响。方法建立Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块模型,并设立空白组、模型组、西药组及稳斑汤低、中、高剂量组。实验周期1个月,麻醉处死小鼠取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用Western blot法检测beclin1及LC3的蛋白表达水平。结果 beclin-1蛋白表达结果显示:与空白对照组比较,模型对照组小鼠腹主动脉组织中beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,中药中剂量组、中药高剂量组、西药组小鼠腹主动脉组织中beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.01);中药高剂量组与西药组无统计学意义(P>0.05)。LC3蛋白表达结果显示:与空白对照组比较,模型对照组小鼠腹主动脉组织中LC3蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,中药各剂量组及西药组小鼠腹主动脉组织中LC3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);中药高剂量组与西药组无统计学意义。结论搜风祛痰法中药复方稳斑汤对于beclin1与LC3的蛋白表达密切相关,即搜风祛痰法中药复方稳斑汤可能通过影响beclin1与LC3的蛋白表达,从而影响动脉粥样硬化斑块的稳定性。

复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块HSP70和PPAR-γ表达的影响

目的探讨搜风祛痰中药复方稳斑汤对Apo E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块HSP70和PPAR-γ表达的影响及其机制。方法 70只6～8周龄Apo E基因敲除小鼠予高质饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为模型组、稳斑汤低剂量组、稳斑汤中剂量组、稳斑汤高剂量组、阿托伐他汀组,每组分别给予相应药物灌胃。正常C57BL/5J小鼠12只设为空白组,给予生理盐水灌胃。相应处理13周后,麻醉处死小鼠、取主动脉组织、HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用免疫组化和RT-PCR技术检测热休克蛋白（HSP70）和过氧化物增殖体及活性受体γ（PPAR-γ）的表达水平。结果各组小鼠主动脉组织中HSP70和PPAR-γ表达水平,稳斑汤组及阿托伐他汀组高于空白组及模型组,稳斑汤高剂量组HSP70和PPAR-γ表达水平与阿托伐他汀组无明显差异。结论捜风祛痰中药复方稳斑汤可通过影响HSP70和PPAR-γ的表达以稳定易损斑块,其机制可能与保护心血管系统及抑制炎症反应相关,且效果与阿托伐他汀无明显差异。

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块自噬相关蛋白Atg5和LC3B的影响

目的:观察搜风祛痰中药稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块自噬相关蛋白Atg5和LC3B的影响。方法:选取6周龄ApoE基因敲除小鼠,采用高脂饲料喂养的方法建立动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块模型,并随机分为模型组,稳斑汤低、中、高剂量组,阿托伐他汀组;另取C57BL/6J小鼠设为空白对照组。模型组和空白对照组均给予0.9%生理盐水灌胃,稳斑汤低、中、高剂量组和阿托伐他汀组分别给予不同剂量的稳斑汤和阿托伐他汀片干预。13周后将小鼠麻醉处死,透射电镜下观察小鼠主动脉自噬小体,然后采用蛋白质印记(Western blot)法检测Atg5和LC3B蛋白表达水平。结果:透射电镜观察显示,空白对照组有少量自噬小体出现,模型组无明显自噬小体出现;与模型组相比,稳斑汤各剂量组和阿托伐他汀组的自噬小体数量均显著增多,其中阿托伐他汀组的数量最多。与空白对照组相比,模型组小鼠腹主动脉组织中Atg5和LC3B蛋白表达水平均降低(P<0.05);与模型组相比,稳斑汤各剂量组和阿托伐他汀组小鼠腹主动脉组织中Atg5和LC3B蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论:搜风祛痰中药稳斑汤可以明显提高ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块自噬相关蛋白Atg5和LC3B的表达水平,这可能是稳斑汤影响动脉粥样硬化斑块稳定性的分子机制之一。

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块形成Bax和Bcl-2 mRNA的影响

目的观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对Apo E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块形成Bax和Bcl-2 mRNA的影响。方法选取6~8周Apo E基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块模型,随机分为模型组,西药组,稳斑汤低、中、高剂量组,另取正常小鼠做空白对照组。空白对照组和模型组分别给予生理盐水灌胃,西药组及稳斑汤低、中、高剂量组分别给予阿托伐他汀及不同剂量稳斑汤干预。取小鼠主动脉组织HE染色进行病理学观察,并采用半定量RT-PCR技术检测Bax和Bcl-2 mRNA表达的变化。结果与空白组比较,模型组Bax mRNA表达水平明显增高(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,稳斑汤各剂量组及西药组Bax mRNA表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达水平明显增高(P<0.05);稳斑汤高剂量组与西药组比较Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平无差异(P>0.05)。光镜下观察稳斑汤各剂量组和西药组斑块面积均小于模型组。结论搜风祛痰法复方中药稳斑汤治疗AS的机制可能与抑制Bax mRNA的表达,促进Bcl-2 mRNA表达有关。

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块HSP70表达的影响

目的观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块HSP70表达的影响。方法 ApoE基因敲除小鼠高质饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块,随机分为模型组、稳斑汤低剂量组、稳斑汤中剂量组、稳斑汤高剂量组、西药组、空白对照组。各组相应处理13周后,取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用免疫组化和RT-PCR技术检测HSP70的表达水平。结果治疗组主动脉组织中HSP70表达水平高于对照组(P<0.05或P<0.01),稳斑汤高剂量组HSP70表达水平与西药组无明显差异(P>0.05)。结论捜风祛痰中药复方稳斑汤可通过影响HSP70以稳定易损斑块,其机制可能与HSP70对心血管系统的保护作用相关。

搜风祛痰中药对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块自噬相关蛋白Beclin-1、Bcl-2、LC3的影响

目的：通过对ApoE基因敲除小鼠喂食搜风祛痰中药复方稳斑汤后观察动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块自噬相关蛋白Beclin-1、Bcl-2、 LC3的改变，探索治疗动脉粥样硬化新思路、新方法。方法将ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块模型随机分成空白组、模型组、稳斑汤低、中、高剂量组、西药组。小鼠麻醉处死取主动脉组织HE染色后进行病理学观察，采用半定量 RT-PCR 技术检测Beclin-1、Bcl-2、LC3蛋白表达变化。结果与空白组比较，模型组小鼠腹主动脉组织中Beclin-1、Bcl-2、LC3蛋白表达水平显著降低（P〈0.01）；与模型组比较，西药组和稳斑汤各剂量组均能提高Beclin-1、Bcl-2、LC3表达水平（P〈0.01）；稳斑汤高剂量组与西药组在Beclin-1、Bcl-2、LC3表达水平上差异无统计学意义（P〉0.05）。结论中药搜风祛痰法稳斑汤可以显著提高Beclin-1、Bcl-2、LC3蛋白表达水平，从而达到稳定动脉硬化斑块、抗动脉硬化效果。