PAMAM树状大分子对阿霉素在HepG 2细胞中的摄取动力学的影响

目的利用聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)树枝状大分子包裹抗癌药物阿霉素,建立细胞内测定阿霉素浓度的HPLC检测方法,研究PAMAM对阿霉素在HepG 2细胞内的摄取行为的影响。方法将盐酸阿霉素脱去盐酸后利用疏水作用进入PAMAM内腔制备载药胶束,以柔红霉素为内标,粉碎细胞后提取细胞内的阿霉素进行浓度测定。测定细胞摄取、外排期间的药物浓度,绘制时间-浓度曲线,并计算动力学参数。结果 PAMAM包裹脱盐酸阿霉素后得到阿霉素的质量浓度为1.034g·L-1的溶液,成功建立胞内阿霉素的含量测定方法。细胞摄取动力学结果显示PAMAM使得阿霉素胞内达峰时间为1h,胞内浓度明显增高;消除动力学结果显示,k减小为原来的0.347倍,t1/2延长为原来的2.878倍,MRT增加为原来的2倍。结论经PAMAM包裹后阿霉素能够在HepG 2细胞内快速达峰,胞内浓度增加,消除速率减慢,滞留时间延长,有利于药物药效的发挥。

索拉非尼在HepG2与LO2细胞的摄取动力学

目的探讨索拉非尼在肝癌细胞(HepG2)与正常肝细胞(LO2)的摄取动力学特性。方法取正常培养的处于对数期的HepG2与LO2细胞株,加入含索拉非尼系列浓度的培养液,孵育后处理细胞,检测索拉非尼及细胞蛋白浓度,分析摄取动力学参数。结果HepG2与LO2细胞对索拉非尼的摄取随着浓度的增加而趋于饱和,但与LO2细胞相比较,HepG2细胞对索拉非尼的摄取量明显增加。当加入10 mol·L^(-1)的索拉非尼,HepG2与LO2细胞对索拉非尼的摄取随着时间的增加而增加,均在20 min时趋于饱和。HepG2细胞的摄取动力参数V_(max)为(684.14±78.19)pmol·mg protein^(-1)·min^(-1),K_(m)为(93.3±17.56)μmol·L^(-1);LO2细胞的摄取动力参数V_(max)为(335.61±69.73)pmol·mg protein^(-1)·min^(-1),K_(m)为(135.68±29.34)μmol·L^(-1);结果显示HepG2细胞对索拉非尼的摄取速率明显高于LO2细胞。结论索拉非尼在肝癌细胞中摄取量及摄取速率明显高于正常肝细胞,对肝癌细胞具有一定的靶向性。

2种粒径PLGA纳米粒细胞摄取动力学的比较

目的:比较包载有荧光香豆素-6(coumarin-6,C6)的2种粒径聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plylactic acid-glycolic acid copolymer,PLGA)纳米粒,经肿瘤细胞的摄取动力学的差异。方法:以生物可降解材料PLGA为载体,采用乳化溶剂挥发法制备2种不同粒径的载有C6的PLGA纳米粒,以黑色素肿瘤细胞(B16)和脑胶质瘤细胞(U87)为细胞模型,分别与2种粒径的纳米粒孵育0.5,1,4,6和17 h,用荧光光度计检测细胞裂解液中C6的荧光值,计算得出2种细胞摄入的载药PLGA纳米粒的量(以C6的量表示),绘制入胞动力学曲线。应用Graph Pad Prism程序处理2种细胞得出的数据,并应用T检验法分析各组数据之间的差异。结果:孵育0.5 h后,2种粒径纳米粒在2种细胞中的摄取量均表现出显著差异;且随着时间延长,该差异加大。细胞摄取时间在6~17 h时,粒径约为150 nm的PLGA纳米粒的入胞速率明显变缓。结论:在相同的给药浓度下,小粒径纳米粒入胞速率要快于较大粒径的纳米粒。大粒径的纳米粒比小粒径纳米粒的入胞量到达平衡快,且总的入胞量要少。

不同粒径胶体金纳米粒子的制备及在A549细胞中的摄取效率及动力学过程

目的:探讨粒径因素对金纳米粒子在人肺泡基底上皮细胞(A549细胞)中的摄取效率及摄取动力学的影响。方法:采用Frens法及种子生长法分别制备了粒径为15,30 nm的水溶性金纳米粒子;利用金纳米粒子特有的多光子吸收诱导冷光性质,采用一种新颖的"多光子共聚焦图像分析法"对两种粒径的金纳米粒子的入胞摄取效率及摄取动力学进行了定量考察。结果:A549细胞对金纳米粒子的摄取量随孵育时间的延长而递增,并在24 h达到最大值,未发现摄取平台期或摄取饱和现象;24 h内,30 nm的金纳米粒子的细胞摄取总量大于15 nm金纳米粒子,后者在前12 h的入胞速率显著快于前者。结论:金纳米粒子的细胞摄取行为呈粒径、时间依赖性,不同粒径的纳米粒子具有不同的摄取效率及摄取动力学。