不同液体培养基质与模式对星孢寄生菇生长发育的影响

为探究星孢寄生菇的生长发育过程及其与基质的关系,采用液体摇瓶与静置发酵的方法,分析了12种发酵基质对该菇个体发育的影响。结果表明,木屑基质上该菇在摇瓶培养中菌丝萌发和菌球形成的时间长且经静置培养后所有子实体上布满厚垣孢子的周期最短(14 d),而鸡粪基质上周期最长,棉籽壳、黑豆、香菇以及灰肉红菇基质上子实体发育最为正常。发酵液pH从菌丝生长期至厚垣孢子形成期逐渐增加,其体积逐渐减小且在不同基质上因发育时期的不同差异较大。菇类与黑豆有利于该菇摇瓶发酵阶段生物量的积累,棉籽壳与菌糠可以促进静置发酵阶段的生物量,木屑、灵芝及菌糠有利于提高其绝对生物学效率与菌球形成率。综上所述,营养因子的变化直接影响星孢寄生菇的形态发生、菌体转化、厚垣孢子形成等生长发育过程,研究结果可为加快其他珍稀菇类的开发利用进程提供理论参考。

无血清摇动悬浮培养富集乳腺癌干细胞

目的探讨不同培养条件下乳腺癌MCF-7细胞的分裂特点,建立快速、有效的乳腺癌干细胞富集方法。方法将MCF-7细胞分别采用完全培养基静置培养(A组)、完全培养基摇动培养(B组)、细胞因子静置培养(C组)和细胞因子摇动培养(D组)12、24、36 h,倒置相差显微镜下观察各组细胞分裂情况,计算克隆形成率,采用流式细胞术检测CD44+/CD24-/low细胞亚群的比例变化。结果 B组和C组培养12 h,棒状分裂细胞约占30%;24 h后分别约占50%和60%;36 h后形成大的细胞克隆。D组培养12 h,棒状分裂细胞约占50%;24 h后约占80%,可见多个细胞克隆;36 h后克隆细胞数减少。D组培养12 h,CD44+/CD24-/low细胞亚群比例(8.05%)为B组(0.99%)的8倍,C组(3.80%)的2.1倍;培养24 h,D组(15.24%)为B组(4.83%)的3倍,C组(2.30%)的6倍;培养36 h,D组CD44+/CD24-/low细胞亚群比例降至9.68%,约为B组(0.95%)和C组(1.03%)的9倍。结论在细胞因子摇动培养条件下,MCF-7细胞分裂加快,分裂象增多,细胞系中CD44+/CD24-/low亚群比例增加较快,干细胞池增加明显,表明无血清摇动悬浮培养为富集乳腺癌干细胞的快速、有效的方法。