摇晃蛋白(Reelin)的剪切蛋白预测

【目的】探索生物信息学方法在Reelin剪切蛋白查找中的应用,并筛选大脑皮质中可能对Reelin有剪切作用的蛋白。【方法】以ADAMTS-4蛋白为基准,利用生物信息学方法,以功能域查找相似功能蛋白,并结合同源性比对方法从中筛选出剪切Reelin的候选蛋白,并对候选蛋白的理化性质、亚细胞定位、功能域、二级结构和组织定位进行分析。【结果】ADAMTS-2、ADAMTS-3、ADAMTS-10、ADAMTS-16与ADAMTS-4有相似的理化性质,且均属于分泌蛋白,在大脑皮质中可能有分布。ADAMTS-2、ADAMTS-3、ADAMTS-10、ADAMTS-16包含ADAMTS-4的功能域,且功能域内的二级结构相似。【结论】筛选到了可能对Reelin有剪切作用的蛋白ADAMTS-2、ADAMTS-3、ADAMTS-10和ADAMTS-16。

摇晃蛋白引起神经元分枝并促进树突发育

目的:研究摇晃蛋白与神经元迁移和发育的关系。方法:通过子宫内电击转染质粒pCAG-GFP到胚胎小鼠大脑皮质,标记迁移中的单个神经元。通过免疫组化染色,观察位于大脑皮质不同层中迁移和分化神经元的形态,统计分析神经元顶突起长度与神经元分枝的关系。结果:摇晃蛋白局限性分布于发育中大脑皮质的边缘带。当神经元顶突起接触到含摇晃蛋白的边缘带后,神经元顶突起缩短并开始出现分枝,而且,神经元的剩余顶突起的长度与总的分枝长度呈极显著负相关,且与分枝点的数目呈极显著负相关。结论:摇晃蛋白促进神经元顶突起的分枝并与树突的发育有关。

成年摇晃小鼠海马组织中小清蛋白的表达

为探讨小清蛋白(PV)在成年摇晃小鼠海马中的表达情况,用免疫荧光组织化学法对野生型小鼠(R^(+/+))、杂合子摇晃小鼠(R^(+/-))、纯合子摇晃小鼠(R^(-/-))海马CA1区、CA3区、齿状回中PV的分布和表达进行研究。结果表明,PV在摇晃小鼠海马CA1区、CA3区和齿状回中均有分布,主要表达于CA1区和CA3区的锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层。与野生型相比,杂合子摇晃小鼠CA1区PV阳性细胞数显著降低(P<0.01),而纯合子摇晃小鼠增加;CA3区和齿状回中的PV阳性细胞数均降低,但纯合子摇晃小鼠高于杂合子摇晃小鼠。提示摇晃蛋白(Reelin)影响PV的表达,且PV的表达异常可能与摇晃小鼠的表现型有关。

摇晃蛋白对小鼠海马MFS发育影响的双光子显微成像研究

为了掌握小鼠大脑发育过程中摇晃蛋白(reelin)与颗粒细胞苔藓纤维出芽(mossy fiber sprouting,MFS)的关系,通过双光子显微镜扫描转基因小鼠Thy1-GFP和Reln-Thy1-GFP的脑片,观察位于海马分子层的颗粒细胞苔藓纤维的出芽和发育情况,统计分析野生型小鼠和摇晃小鼠脑片在不同培养时期苔藓纤维出芽的数量和体积。结果显示,Thy1-GFP转基因小鼠的海马脑片是观察颗粒细胞苔藓出芽和发育的良好材料;野生型小鼠和摇晃小鼠海马苔藓纤维出芽的数量和体积随发育时间的延长有明显的动态变化。结果表明,摇晃蛋白能够促进颗粒细胞苔藓纤维出芽并参与轴突的发育。

左归丸母代干预对先天肾虚仔鼠脑皮质层发育及ADAMTS-4、Reelin、Fyn调控因子的影响

目的 研究左归丸干预Reelin信号通路上下游相关因子在脑皮质层发育过程的作用及机制。方法 观察第21日龄仔鼠的一般情况、测量体重、体长和脑重量;观察脑皮质层发育状况;检测ADAMTS-4、Reelin和Fyn蛋白和mRNA的表达。结果 空白对照组仔鼠各方面情况较好,模型组皮肤颜色偏暗,易惊恐、小便次数增多、大便稀软,补肾组皮肤颜色、二便正常。与空白对照组比较,模型组体重、体长及脑重量减少趋势;与模型组相比,补肾组呈有所好转。与对照组比较,模型组ADAMTS-4蛋白和mRNA表达量明显升高,Reelin、Fyn蛋白和mRNA表达量明显降低;与模型组比较,补肾组ADAMTS-4蛋白和mRNA表达量降低,Reelin、Fyn蛋白和mRNA表达量升高。结论 先天肾虚仔鼠幼儿期学习记忆能力下降、生长发育迟缓,左归丸填补母鼠肾精,能抑制脑皮质层ADAMTS-4表达,增强Reelin表达和活性,激活Fyn下游通路,促进脑皮质发育。