牛肝菌摇瓶发酵条件优化研究

在Plackett Burman实验结果基础上 ,采用响应曲面法 (responsesurfacemethodology ,RSM )对影响牛肝菌 (Boletussp )ACCC 5 0 3 2 8发酵产糖与生长的关键工艺参数 ,发酵温度、发酵时间和装液量的最佳水平范围进行了研究和探讨。通过对胞外多糖曲面方程以及菌丝干重二次多项回归方程求解得知 ,在自变量发酵温度 ,发酵时间和装液量分别为 2 4 2 3℃、1 0 7d和 5 0 0mL时 ,牛肝菌ACCC 5 0 3 2 8菌株发酵胞外多糖的最大预测值为 1 0 5 3 99μg/mL发酵醪 ;在 2 6 77℃、1 0 9d和 64 90mL时 ,该菌干菌丝浓度可达 4 2 2mg/mL发酵醪。欲同时获得最大量的胞外多糖和菌丝浓度 ,则发酵温度 ,发酵时间和装液量须为 2 6 2 3℃、1 0 5d和 5 8 70mL ,在此条件下 ,每毫升发酵醪中的胞外多糖含量和菌丝浓度分别为 992 2 6μg与 4 1 6mg。上述预测值不仅被统计学方法所验证 。

放射型根瘤菌WSH2601生产辅酶Q_(10)的摇瓶发酵条件

以放射型根瘤菌 (Rhizobusradiobacterium ,WSH2 6 0 1)作为辅酶Q10 的生产菌株 ,研究了氮源、碳源、接种量、溶氧、初始 pH、发酵温度及添加物等因素对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响 .结果表明 :玉米浆和酵母膏是较好的氮源 ,葡萄糖与蔗糖是辅酶Q10 发酵的较好的碳源 ,接种量对辅酶Q10 发酵的影响不大 ,为 4 % .适宜的初始 pH值为 7,番茄汁能较好地促进细胞的生长 ;添加玉米浆、L 甲硫氨酸、番茄汁和异戊醇有利于产辅酶Q10 ;溶氧对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响较显著 .通过正交试验初步确定了发酵条件 :碳源为 1.5 g/dL葡萄糖和 2 .5 g/dL蔗糖混合物 ,酵母膏 0 .8g/dL ,初始pH 7,每 5 0 0mL装液量为 5 0mL .最后经综合优化条件 ,在摇瓶发酵条件下 :菌体生长量 (以干重计 )为 13.8g/L ,发酵液中辅酶Q10 产量达到 2 2 .7mg/L ,比优化前分别提高 34%和 5 3% .

β-葡萄糖苷酶产生菌摇瓶发酵条件的研究

本实验对产β-葡萄糖苷酶融菌株的摇瓶发酵条件进行了研究。采用正交交互试验对融合菌株发酵生产β-葡萄糖苷酶的摇瓶发酵条件进行优化。结果表明,最优摇瓶发酵条件:装液量20ml/250ml,接种量12%,发酵温度27℃,摇床转速180r/min,发酵时间7d。此条件下,β-葡萄糖苷酶活力为5.312U/ml。

L-丝氨酸摇瓶条件的优化

以基因工程菌株Brevibacterium flavmC-11A为L-丝氨酸产生菌,研究L-丝氨酸的摇瓶发酵条件,确定了菌体活化方式,并通过单因素确定了摇瓶发酵条件为:酵母膏浓度为14 g/L,缓冲剂为KH2PO4,碳氮比为10∶3。

大肠杆菌高密度发酵表达rBovIEAM的发酵条件研究

大肠杆菌表达系统是目前最常用的外源蛋白表达系统[1-2],具有遗传背景清楚、代谢调控技术成熟、目的基因表达水平高、培养成本低、生长周期短等特点,在重组蛋白质外源基因表达系统中占据主导地位[3-4]。采用高密度发酵技术能有效提高重组大肠杆菌的菌体密度,增加重组蛋白的表达量,是非常经济高效的生产工艺。