钝顶螺旋藻C-藻蓝蛋白和多管藻R-藻红蛋白的分离纯化及摩尔消光系数的测定

１９９３年１１月～１９９４年１月用简单的羟基磷灰石柱层析法从多管藻中分 离纯化了Ｒ－藻红蛋白和从钝顶螺旋藻中纯化了Ｃ－藻蓝蛋白，它们的纯度（指可见 光部分的最大吸收与 ２８０ｎｍ处吸收值之比）可分别达到 ６（Ｒ－藻红蛋白）和 ５． ５（Ｃ－ 藻蓝蛋白）。由于不同藻种的同种藻胆蛋白的摩尔消光系数不同，所以应用凯氏定 氮法并结合可见光的吸收值测定了上述两种藻胆蛋白的摩尔消光系数，钝顶螺旋 藻Ｃ－藻蓝蛋白为１．８５３ × １０６ｍｏｌ－１ｃｍ－１（６２０ｎｍ），多管藻Ｒ－藻红蛋白为１．７９６ × １０６ｍｏｌ－１ｃｍ－１（４９８ｎｍ），为藻胆蛋白的浓度测定提供了方便。

Fe^(3+)离子标准溶液摩尔消光系数的测定

本文论讨了 Fe^(3+)离子标准溶液的两种制备方法,给出了两种方法测出的ε_m 值,其统计平均值为216.67m^2·mol^(-1);Fe^(3+)离子标准溶液两个吸收峰处ε_m 值的比值为0.485±0.0008(日立∪-3200型);等精度测量的偏差为0.2%(平均值相对标准偏差,95%置信度)。

25℃时水溶液中[Bi(SCN)n]^(3-n)配合物的稳定性和摩尔消光系数

本文用平衡移动法在25℃水溶液中研究了硫氰酸铋(Ⅲ)配合物的组成。用改善了的guuMHpcun立方法测定了硫氰酸铋(Ⅲ)各级配合物的稳定常数和摩尔消光系数及其之间的关系。并用文献[6]的方法计算了溶液中各级配合物的组成百分数和配位体浓度的关系,考虑了各级配离子的百分组成的变化对摩尔消光系数的贡献。

采用摩尔消光系数法测定纤维蛋白的方法学评价

血浆纤维蛋白原是血液流变学中一个重要指标,在心脑血管疾病诊断中日益引起重视。目前在测定方法中,当属免疫消浊比浊法,但由于其价格昂贵,操作繁琐,故难以推广应用。笔者等引用路西春等所改进的Macart的方法,在生化仪器上采用摩尔消光系数法并与免疫法对照,认为满意。

NADH摩尔消光系数校正在工作中的应用

<正> 随着全自动、半自动生化仪的使用,ALT/GPT等多种酶速率法的实验,均要采用NADH摩尔消光系数(ε)进行计算设置参数。NADHε的理论值为6.22×10~3,但实际上每台生化分析仪的ε是不同的。实际工作中我们也发现室间质控中凡用NADHε测定的项目,回报结果均低于靶值。为了室内、室间质量控制工作的需要,我们参考NADH摩尔消光系数校正的重要性及ALT计算因子(F值)的葡萄糖已糖激酶法来设定两篇文章,对我室全自动、半自动生化仪的NADHε进行了测定与校正,现报告如下。

间接水解法测定含甲氧基黄酮UGT代谢物的摩尔消光系数转化因子

目的:建立测定含甲氧基黄酮尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)代谢物转化为相应苷元的摩尔消光系数转化因子(K)的方法,实现对无对照品代谢物的准确定量。方法:以间接水解法测定含甲氧基黄酮汉黄芩素、杨芽黄素、泽兰黄素及5-羟基-7,8-二甲氧基黄酮的UGT代谢物K值;且因汉黄芩素及其UGT代谢物汉黄芩苷均有对照品,采用两对照品直接测定汉黄芩苷K值以验证间接水解法的准确性。结果:间接水解法测得上述含甲氧基黄酮UGT代谢物的K值分别为(1.05±0.03)、(1.47±0.09)、(1.04±0.04)、(1.25±0.09),直接测定汉黄芩苷的K值为(1.03±0.02),与间接法所测K值相近。结论:采用间接水解法测定K值可准确对无对照品黄酮化合物UGT代谢物进行定量。

改进和优化黑果枸杞及其制品中花青素测定的pH示差法

建立一种基于美国官方分析化学师协会(Association of Official Analytical Chemists,AOAC)方法检测黑果枸杞及其制品中花青素含量的改进pH示差法。考察了黑果枸杞及其制品中花青素的最佳提取和检测条件,通过液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别出黑果枸杞中花青素的具体化学结构,并计算出混合花青素的平均摩尔质量。通过分光光度法测得混合花青素的平均摩尔消光系数,对改进后的pH示差法进行方法学验证和花青素的含量测定。结果显示,最佳提取和检测条件如下:黑果枸杞花青素提取溶剂为盐酸-80%(体积分数)乙醇(3∶97,体积比),料液比为1∶100(g∶mL),提取温度为50℃,提取时间为30 min,缓冲溶液稀释5倍后静置平衡20 min。液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别黑果枸杞中主要以矮牵牛素类花青素为主(占97.96%),黑果枸杞特有的混合花青素平均摩尔质量为912.7 g/mol,平均摩尔消光系数为29591 L/(mol·cm)。pH示差法改进后能够满足方法学验证要求,固体样品和液体样品最低检出限分别为28.2 mg/100 g、0.282 mg/100 mL。方法改进后花青素提取增长率均大于20%,静置平衡20 min后单次检测结果精密度小于0.3%。以矮牵牛素类花青素代替矢车菊素-3-O-葡萄糖苷计算花青素含量平均提高了2.41倍,能真实地反映黑果枸杞及其制品中花青素的含量。

含硝基一代光致变色液晶树枝状大分子的光化学研究

研究了树外围含12个硝基偶氮苯基元新型一代碳硅烷光致变色液晶树枝状大分子G1和基元小分子M1在溶液中的最大吸收波长、摩尔消光系数、反-顺光化学异构化反应速率常数、热回复异构化反应速率常数、光化学回复异构化反应平衡常数及速率常数.G1的光致变色反应速率常数的数量级为10-1s-1,而含偶氮基元液晶聚硅氧烷的光致变色反应速率常数的数量级为10-8s-1,因此液晶树枝状大分子的光响应速率比后者快107倍.G1的光回复异构化反应平衡常数kt/kc为1.76～1.77,有作为光控开关材料的应用前景.

条斑紫菜高纯度藻红蛋白规模制备及光学性质研究

旨在大量制备条斑紫菜高纯度藻红蛋白并研究其光学性质。以江苏吕泗条斑紫菜为原料,采用"溶胀+组织捣碎"法破碎2 kg冻干条斑紫菜叶状体细胞,经多次硫酸铵盐析和一次羟基磷灰石层析后获得纯度>3.20的藻红蛋白的产率为0.184%,再经一次同样层析可获得纯度>4.50的藻红蛋白的产率为0.109%。蛋白纯度已通过吸收/荧光激发光谱,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)/非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)的考马斯亮蓝/醋酸锌双染验证。该蛋白摩尔消光系数经Folin-酚法和Bradford法测定分别为1.79 mL/(mg.cm)和1.73 mL/(mg.cm),20℃时在505 nm处的荧光量子产率为0.90,在日光灯、发光二极管、碘钨灯和激光4种光源下的光漂白效果以激光最显著,240μg/mL藻红蛋白10 min可接近碘钨灯辐照240min的光漂白率。

^（60）Coγ辐照装置增源后剂量测定

在增源１．２２ｐＢｑ６０Ｃｏγ辐照装置启用前，准确测量了源到辐照位置重复性和辐射场空间剂量率，以及产品箱中吸收剂量的不均匀度。对岛津ＵＶ－２２０１紫外分光光度计进行了校准并测定了该仪器摩尔消光系数。在实验条件下使硫酸亚铁剂量计标准化，剂量测试结果与国家计量院比对具有较好的一致性。

6-氨基己酸及2-氨基乙磺酸C_(60)加成物的合成及溶解性

水溶性Fullerenes(C60)衍生物的制备对于C60的生物学研究具有十分重要的意义.氨基酸与C60的胺化反应可得到水溶性的氨基酸C60衍生物.以C60与过量6-氨基己酸或2-氨基乙磺酸(摩尔比为1∶10)于80℃搅拌反应24h,分别得到加成度为5和4的氨基酸C60主产物,产率按加入的C60计算分别为30%,28%.氨基酸碳链的长度及加成产物在反应体系中能否及时沉淀析出影响和控制着加成度的大小.C60[NH(CH2)5COOH]5H5(3a),?C60(NHCH2CH2SO3H)4H4(6a)用柱层析进一步纯化,其结构组成经元素分析,1HNMR,13CNMR,IR所证实.6a的水溶性受溶液pH的影响较小,3a在不同pH缓冲溶液中的溶解性用光谱法测定,分别为:pH=10.25时为71.81mg?mL-1,pH=7时为23.68mg?mL-1,pH=3.36时为10.12mg?mL-1.在波长273nm处,3a的摩尔消光系数为ε=3.43×104L?mol-1?cm-1.

改进pH示差法检测不同植物源性食品中花青素的方法

以23种含花青素的植物源性食品为研究对象,首先对pH示差法进行改进:通过液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别出不同植物源性食品中花青素种类和具体化学结构,并计算出混合花青素的平均摩尔质量;通过分光光度法测得混合花青素的平均摩尔消光系数。然后对pH示差法改进前后的检测结果进行差异比较分析。结果表明,提子和蓝莓中花青素的种类最多,蓝莓和黑玉米中花青素数量最多。不同植物源性食品的混合花青素的平均摩尔质量为449.2~784.8 g/mol,平均摩尔消光系数为17 807~37 150 L/(mol·cm)。当不同植物源性食品中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷低于所含总花青素物质的量分数的80%时,pH示差法改进前后的检测结果之间相比具有显著性差异(P<0.05)。该研究表明,对于矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量远低于其他花青素的植物源性食品而言,以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷计算总花青素含量必然造成很大误差。改进后的pH示差法检测花青素的结果更准确,直接利用已确定的针对不同植物源性食品中特有混合花青素的平均摩尔质量和平均摩尔消光系数即可求得总花青素,该法可为天然食用花青素的质量控制、开发利用与加工提供数据支撑。

用微分分光光度法测定硝酸溶液中U（Ⅵ）和Pu（Ⅳ）

使用λ＿（１９）分光光度计研究ＨＮＯ＿３介质中Ｕ（Ⅵ）和Ｐｕ（Ⅳ）的吸收光谱、四次微分谱以及共存的杂质离子对微分谱的影响，并分别采用微分谱上４１５ｎｍ处峰零值和４７２．５－４７９．５ｎｍ间的峰面积值计算Ｕ（Ⅵ）和Ｐｕ（Ⅳ）的含量。结果表明：当体系ＮＯ或ＨＮＯ＿３浓度处在１．５－３．０ｍｏｌ／ｌ之间时，用微分法测定Ｕ（Ⅵ）不必预先测定体系中的ＮＯ或ＨＮＯ＿３浓度，相对偏差＜５．５％；对于Ｐｕ（Ⅳ）的测定，相对偏差＜５．０％；对于Ｕ（Ⅵ）和Ｐｕ（Ⅳ）混合体系，当Ｕ／Ｐｕ比达到２００时，采用微分法仍可鉴定Ｐｕ（Ⅳ）的存在，这时，Ｐｕ（Ⅳ）测定的相对偏差＜６．０％。Ｐｕ（Ⅳ）的检测下限为５×ｌ０￣（－４）ｍｏｌ／ｌ。

硫酸亚铁剂量计吸收剂量基准改造后的剂量学性能研究

本文论述了技术改造后硫酸亚铁吸收剂量基准测量系统测量水吸收剂量的工作原理及特点,分析了其不确定度。精确测定了Cary-4G紫外可见分光光度计的Fe3+离子摩尔消光系数,完善了玻璃安瓿剂量计的制备方法和工艺,提高了硫酸亚铁吸收剂量基准测量系统测量Co60γ射线的水吸收剂量的剂量学性能。结果表明:技术改造后的基准测量系统在40~400Gy范围内,测量重复性好于±0.5%,测量扩展不确定度为1.9%(k=2),达到了原硫酸亚铁吸收剂量基准测量系统测量Co60γ射线的水吸收剂量高剂量学的剂量性能标准。该基准在1998年参加了B IPM组织的国际比对,在5 kGy、15kGy和35kGy三个剂量水平的测量值与参加比对的6个国家的整体平均值的一致性均在0.5%以内。

盐藻中耐盐碳酸酐酶Dca的纯化及其消光系数测定

本研究将碳酸酐酶Dca片段插入原核表达载体pET21b中并转化大肠杆菌OrigamiB(DE3)pLysS,由IPTG诱导表达带有组氨酸标签的融合蛋白,并经镍柱亲和层析方法获得纯化的Dca,通过p-Nitrophenyl Acetate测活(pNPA)结果显示具有活性,为Dca结构与功能的研究提供了足量的蛋白质保证.纯化出的蛋白质利用Edelhoch方法测定其摩尔消光系数(molar absorbance coefficient)e,结果显示比预测的摩尔消光系数值偏小.

硫酸亚铁剂量计应用研究

文中测得 Fe^(+3)摩尔消光系数ε(25℃)/(Fe^(+3))=2181.5±12.0,对影响 FeSO_4剂量计的主要因素进行研究,准确性、重复性,响应线性较好。在3×10~4Ci 辐照场测量,适应剂量范围28—440Gy。总不确定度<±3.0%。

海水亚硝酸盐和硝酸盐测定方法的优化

从精简方法流程提高工作效率角度,对国标《海洋监测规范(海水分析)》GB17378.4-2007中,海水亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法进行了实验室系列条件优化。将磺胺和盐酸萘乙二胺配制成一定比例的混合溶液一次性加入待测样品中显色10min测定,比国标法减少了一步操作,共节省时间10min,提高工作效率30%以上。

2-[2-羟基-4-(2-羟基-3-烷氧基)丙氧基苯基]-(5-氯-)2H-苯并三唑紫外线吸收剂的合成及表征

以环氧氯丙烷为原料，分别与正丁醇、异辛醇、正十二醇，在三氟化硼乙醚催化作用下，反应制备了3个（2．羟基-3-氯）丙基烷基醚（Ia，Ib，Ic）。再分别以2-（2，4-二羟基苯基）—2m苯并三唑，2-（2，4-二羟基苯基）-5．氯-2H-苯并三唑为原料，在弱碱性条件下，分别与上述合成的3个开环产物进行烷基化反应，制备了6个间苯二酚衍生物类型苯并三唑化合物：2-[2-羟基4-（2-羟基-3．烷氧基）丙氧基苯基]-（5-氯-）2H．苯并三唑（Ⅱa，Ⅱb，Ⅱc，Ⅲa，Ⅲb，Ⅲc），收率分别为83％，79％，78％，85％，74％，77％。对目标产物进行了FTIR和MS表征，并测定了紫外吸收光谱，该6个化合物在250～400nm内均有吸收范围宽，强度大的吸收峰，最大摩尔消光系数ε分另4为23190．1L／（mol·cm）（λmax=338．5nm），22018．4L／（mol·cm）（λmax=341．5nm），23895．1L／（mol·cm）（λmax=339nm），24368．0L／（mol·cm）（λmax=346．5nm），22522．6L／（mol·cm）（λmax=346．5nm），25104．5L／（mol·cm）（λmax=347nm），与传统的市售商品紫外线吸收剂UV—P[εmax=16177．7L／（mol·cm），λmax=338．5nm]相比，是-类更为高效的紫外线吸收剂。

酶法测定胆固醇氧化酶方法的比较及优化

目的:结合目前使用的检测方法,改良简化酶法检测胆固醇氧化酶的方法。方法:采用有机溶剂加表面活性剂的方法来溶解胆固醇;利用Trinder反应原理,选用灵敏度更高的Toos作为色原物质检测酶活性;通过检测同一标准品,确定Toyobo方法与改良后方法的系数关系及线性范围。结果:选用乙醇作为有机溶剂,Triton X100作为表面活性剂,将胆固醇溶于无水乙醇,质量浓度为0.5%,Triton含量为15%;用改良后方法检测活性是Toyobo原方法的1.5倍,确定检测线性范围为0.1-0.2U/m L。结论:结合了Toyobo和季文明等人使用的方法的优势,采用乙醇加Triton配制胆固醇溶液,配制方法简便,试剂无毒害,结合Toos作为显色物质,检测灵敏度更高,提高了方法的简便性和安全性。