生殖支原体MgPa原核载体的构建

【目的】构建生殖支原体（Mg）黏附蛋白MgPa优势表位基因（MgPa′,1075-1364aa）的原核表达载体。【方法】通过生物信息学分析,筛选并挑选MgPa基因优势抗原表位,以MgG-37标准株基因组DNA为模板,高保真聚合酶链反应扩增目的片段,将其亚克隆到原核表达载体PET-30a（＋）中,构建重组质粒PET-30a（＋）/MgPa＇。【结果】PCR扩增得到大小约为870bp的目的片段;构建的重组质粒经酶切鉴定和测序鉴定证明其中插入片段为MgPa＇目的基因,测序结果与Genbank上登录序列完全一致。【结论】采用上述方法可成功构建生殖支原体MgPa原核载体。