支气管上皮间质转化在哮喘气道重塑中的作用及糖皮质激素对其影响

目的在BALB／c小鼠哮喘气道重塑模型中，探讨支气管上皮间质转化（ epithelial-mesenchymal transformation, EMT）是否参与哮喘气道重塑，以及吸入型糖皮质激素治疗对其的影响。方法选取30只BALB／c小鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德（Budesondine，BUD）组；通过检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中白细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比来评价气道炎症及血OVA-sIgE含量，评价过敏状态来验证BALB／c小鼠哮喘模型；通过测量HE染色、Masson染色监测气道重塑程度；通过ELISA检测BALF中转化生长因子（transforming growth factor，TGF）-β蛋白含量，免疫组织化学检测观察成纤维细胞特异性蛋白1（fibroblast specific protein-1，FSP-1）在肺组织中表达区域，蛋白免疫印迹及实时定量PCR法检测E-钙黏蛋白（E-Caderin）、FSP-1、波形蛋白（Vimentin）蛋白及mRNA表达趋势来评价肺组织支气管EMT。结果哮喘组与对照组相比，BALF中白细胞总数增加，嗜酸性粒细胞百分比明显增加，血浆OVA-sIgE明显升高，支气管壁增厚及胶原沉积面积增多（P〈0．01），BUD组上述指标低于哮喘组（P〈0．01）；哮喘组BALF中TGF-β表达增多，在支气管上皮区域出现FSP-1的表达，实时定量PCR及蛋白质免疫印迹结果均显示，与对照组相比，哮喘组肺组织中E-Caderin表达减少，FSP-1及Vimentin表达增多。而BUD组与哮喘组相比，E-Caderin表达增多，TGF-β及Vimentin的表达略减少，而FSP-1表达量与哮喘组无差别。结论哮喘气道重塑的肺组织中出现了EMT现象，发生早期EMT的部位为支气管上皮区域；传统的雾化吸入BUD治疗不能完全抑制哮喘早期支气管EMT的发生。