基于STAT1信号通路探讨疏风通络方对支气管哮喘小鼠Th1/Th2失衡的影响

目的:探讨疏风通络方调控STAT1信号通路对支气管哮喘小鼠模型Th1/Th2失衡的影响。方法:实验级小鼠30只,随机分为对照组、模型组、IL-27组、疏风通络方组和疏风通络方+STAT1抑制剂组,每组6只。观察5组小鼠一般情况;记录各组小鼠咳嗽情况;比较血清及灌洗液中IL-4及IFN-γ表达;流式细胞术检测Th1/Th2;HE染色观察小鼠肺组织炎症情况;Western blot检测pSTAT1及STAT1蛋白表达水平。结果:对照组小鼠呼吸平稳、无喘息,精神状况正常,运动良好,毛发颜色正常;模型组呼吸困难伴喘息,精神萎靡,蜷缩不动,毛发暗淡;IL-27组、疏风通络方组造模后同模型组,用药后呼吸逐渐恢复,喘息减少,精神状态好转,开始活动;疏风通络方+STAT1抑制剂组造模后同模型组,用药后未见明显改变。模型组(12.55±3.21)咳嗽次数较对照组(1.31±0.26)增加;IL-27组(5.89±1.27)和疏风通络方组(4.76±1.33)咳嗽次数较模型组减少,疏风通络方+STAT1抑制剂组(9.13±1.25)咳嗽次数较疏风通络方组增加。模型组血清(29.98±6.35)及灌洗液(16.59±4.49)IL-4水平较对照组(10.12±0.91、1.35±0.67)升高,IFN-γ水平降低(12.39±4.31、14.36±3.96 vs 21.35±4.73、32.56±4.51);IL-27组(11.23±2.56、1.15±0.52)和疏风通络方组(12.96±2.58、2.21±1.61)血清及灌洗液IL-4较模型组降低,IFN-γ水平升高(17.09±2.35、20.15±2.29vs 18.63±1.35、26.56±3.39);疏风通络方+STAT1抑制剂组血清(20.56±4.32)及灌洗液(12.68±3.56)IL-4较疏风通络方组升高,IFN-γ水平降低(13.55±2.91、17.84±4.42)。模型组(0.20±0.03)小鼠Th1/Th2较对照组(1.15±0.18)降低;IL-27组(0.62±0.04)和疏风通络方组(0.67±0.02)小鼠Th1/Th2较模型组升高;疏风通络方+STAT1抑制剂组(0.32±0.01)小鼠Th1/Th2较疏风通络方组降低。对照组小鼠肺泡、支气管结构正常;模型组肺泡间隙变大,出现明显炎症反应,支气管上皮细胞脱落;IL-27组和疏风通络方组较模型组炎症反应缓解,脱落减少;疏风通络方+STAT1抑制剂组较疏风通络方组炎症反应加重,脱落细胞增多。模型组(0.19±0.04)pSTAT1蛋白表达较对照组(1.25±0.47)降低;IL-27组(0.47±0.08)和疏风通络方组(0.63±0.11)pSTAT1蛋白表达较模型组增加;疏风通络方+STAT1抑制剂组(0.17±0.03)pSTAT1蛋白水平降低。结论:疏风通络方对支气管哮喘小鼠Th1/Th2失衡具有改善作用,可能与pSTAT1蛋白水平上调,STAT1通路磷酸化增加有关。

小青龙汤联合肺肠同治法对支气管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影响

目的探讨小青龙汤联合肺肠同治法对支气管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影响。方法选取2018年12月—2019年12月满6周龄的健康雌性BALB/c小鼠60只,采用致敏和雾化激发的方法建立支气管哮喘小鼠模型,通过随机数字表法分为对照组和观察组各30只,对照组接受小青龙汤治疗,观察组接受小青龙汤联合肺肠同治法治疗,比较2组小鼠治疗前后的细胞学、IL-4和IFN-γ水平。结果治疗前2组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平比较,差异均不具有统计学意义(P>0.05);治疗后观察组小鼠的细胞总数、淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、IL-4和IL-4/IFN-γ水平均低于对照组小鼠(P<0.05),观察组小鼠的IFN-γ水平高于对照组小鼠(P<0.05)。结论小青龙汤联合肺肠同治法能够有效降低支气管哮喘小鼠的细胞学和IL-4水平,提高IFN-γ水平。

玉簪花提取物对RAW264.7细胞炎症及哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 研究玉簪花提取物对RAW264.7巨噬细胞炎症模型和BALB/c小鼠支气管哮喘模型的影响。方法 建立脂多糖与人干扰素-γ诱导的RAW264.7细胞炎症模型,用玉簪花提取物预处理模型细胞,测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。将BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、玉簪花提取物高、低剂量组。采用卵清蛋白致敏和激发哮喘,末次给药24 h后,分析小鼠全血中淋巴细胞、单核细胞、粒细胞的数量,吉姆萨染色观察嗜酸性粒细胞的数目;ELISA法检测小鼠血清中总免疫球蛋白E(IgE)的水平、NO的含量、支气管肺泡灌洗液中IL-6与TNF-α的水平以及肺组织细胞黏附因子-1(ICAM-1)的水平;HE染色观察小鼠肺组织炎症及病理变化。结果 玉簪花提取物可显著抑制炎症细胞因子的表达;显著降低卵清蛋白模小鼠炎症细胞和嗜酸粒的数量,减少NO生成,降低IgE的含量,显著降低肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α的水平以及肺组织中ICAM-1的表达。结论 玉簪花提取物对细胞炎症模型和哮喘气道炎症模型有较好的抑制作用,可为其治疗哮喘的研究提供参考。