实验动物支气管鲍特杆菌检测能力验证结果与分析

目的开展2017年能力验证活动,评价国内实验动物检测实验室对支气管鲍特杆菌的检测能力。方法依据CNAS相关文件,中国食品药品检定研究院作为能力验证提供者,制备含有支气管鲍特杆菌及产气巴斯德杆菌和大肠杆菌为干扰菌的比对样品,提供给参加实验室,要求在规定时限内反馈检测结果及报告。结果所制备三种样品的平均含菌量均大于1×10~8CFU/mL,37℃加速稳定性时间不少于20 d,符合比对要求。全国共有18个省市的25个实验动物检测实验室参加,均按时反馈结果和报告,满意率88%。结论本次能力验证为实验动物呼吸道细菌比对项目的进一步开展奠定了基础。大部分参加实验室具备一致可靠的支气管鲍特杆菌检测能力。

一起实验兔感染支气管鲍特杆菌病的病例分析

调查一起实验兔在饲养过程中陆续发病、死亡的流行原因。通过现场调查,了解饲养管理过程、发病症状、解剖症状和进行细菌学检验。确认为支气管鲍特杆菌病。同时从加强饲养管理、完善卫生消毒措施、改善通风换气条件等管理角度出发加以分析。

实验动物四种呼吸道病原菌实验室检测能力验证结果分析

目的通过实施实验动物支气管鲍特杆菌、嗜肺巴斯德杆菌、多杀巴斯德杆菌和鼠棒状杆菌检测能力验证活动,达到评估实验动物检测机构的检验能力,提高实验动物质量检测水平的目的。方法2021年和2022年按照中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)相关准则设立NIFDC-PT-309和NIFDC-PT-363两个项目(分别检测实验动物样品中呼吸道病原菌支气管鲍特杆菌/嗜肺巴斯德杆菌、鼠棒状杆菌/多杀巴斯德杆菌),开展能力验证活动。制备4种实验动物呼吸道病原菌和阴性对照大肠埃希菌的冷冻干燥样品;均匀性和稳定性检验合格后,随机分组编号,将样品发放给参加单位,要求在规定时限提交检验报告和原始记录。反馈的结果与样品设置一致的判定为满意结果,不一致或未按时提交的判定为不满意结果。结果2021年共有29家实验室参加了NIFDC-PT-309项目,获得满意结果的实验室为27个,满意率为93.1%。2022年共有30家实验室参加了NIFDC-PT-363项目,满意率为100%。结论国内大多数实验动物质量检测机构具备较强的呼吸道病原菌检测能力,并且通过开展能力验证活动这一检测能力正在稳步提升。

实验动物四种病原体多重PCR方法的建立与应用

目的建立快速检测多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的多重PCR方法。方法根据Gen Bank基因设计出特异性引物;经过多重PCR的优化,特异性和敏感性的检测,建立多重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染样本和实验动物的气管分泌物,并与传统方法做对比。结果多重PCR扩增出多杀巴氏杆菌(356 bp)、支气管鲍特杆菌(237 bp)、支原体(266 bp)和肺炎克雷伯杆菌(142 bp)的目的条带。肺炎克雷伯杆菌敏感性为10 pg,多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体敏感性为1 pg,特异性检测未从其他病原菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测人工感染样本的不同组合,45只实验动物气管检测出15只多杀巴氏杆菌阳性,9只肺支原体阳性,但传统培养方法和血清学方法未检测出阳性标本。结论本文建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的快速检测。