改构体aFGF对颈动脉窦损伤的保护作用

目的 探讨损伤大白鼠颈动脉窦压力感受器神经末梢后 ,改构体aFGF的保护作用。方法 将Wistar大鼠随机分成对照组、改构体aFGF1组、改构体aFGF2 组、改构体aFGF3 每组各 10只。改构体组分别经静脉注射 0 14 μg/ml、0 4 3μg/ml、1 30 μg/ml的改构体aFGF(1ml/ 10 0g) ,而对照组注射同剂量的生理盐水。 2 0min后 ,用蘸有 80 %乙醇的棉球轻轻擦拭右颈动脉窦区 ,损伤颈动脉窦压力感受器神经末梢 ,并放置 5min。观察记录各组损伤前后夹闭颈总动脉血压即 :收缩压 (SP)、舒张压(DP)、平均动脉压 (MP)和心率 (HR)的变化。结果 (1)损伤右颈动脉窦前 ,夹闭右颈总动脉 ,实验组和对照组血压均升高 ,夹闭前后相比差异均有统计学意义 (P <0 0 1) ;(2 )损伤右颈动脉窦后 ,夹闭右颈总动脉 ,改构体aFGF1组、对照组血压不变 ,夹闭前后相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;改构体aFGF2 组、改构体aFGF3 组血压升高 ,夹闭前后相比差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,夹闭前后两组的血压差分别与对照组的差值相比有统计学意义 (P <0 0 5 )。在本实验中 ,HR均无明显变化。结论 改构体aFGF对颈动脉窦损伤有保护作用 。

抗菌肽CM与haFGF改构体融合基因的构建与表达

构建重组改构体aFGF28-154和抗菌肽CM基因的融合基因,使其在大肠杆菌系统中融合表达,以期获得具有靶向FGFR高表达肿瘤细胞的抗肿瘤融合蛋白。利用PCR引物延伸的方法拼接得到带有G4S铰链的天蚕素—蜂毒素杂合肽CM与aFGF28-154的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET20b中,构建表达质粒pET-CM-aFGF28-154,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),氨苄青霉素抗性筛选重组转化子。IPTG诱导4 h后,菌液经超声破碎,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的18%。将包涵体溶解并通过差速离心除去部分杂蛋白,透析复性并用Heparin Sepharose CL-6B亲和层析,目的蛋白得到初步纯化,为进一步研究蛋白的生物学活性奠定了基础。