一种快速鉴别三聚氰胺毒奶粉蛋白质含量的检测方法

为了建立一种快速检测含三聚氰胺奶粉蛋白质含量的简便方法,本研究分别用考马斯亮蓝法、双缩脲法以及纳氏法测定了三聚氰胺毒奶粉中蛋白质的含量,并对测定结果进行了比较。通过高温变性法、改良三氯乙酸法、Sevage法和透析法考察了去除蛋白氮和非蛋白氮-三聚氰胺的效果。结果表明,考马斯亮蓝和双缩脲不与非蛋白氮三聚氰胺发生反应,采用改良三氯乙酸法可以较好的实现蛋白氮与非蛋白氮三聚氰胺的分离。因此,用考马斯亮蓝法或者双缩脲法可以准确测出含毒奶粉中蛋白氮的含量,通过改良三氯乙酸法配合纳氏法可以检测奶粉中的非蛋白氮-三聚氰胺。

NaHCO_3胁迫下刚毛柽柳叶片蛋白质差异表达谱的建立

【目的】为了研究刚毛柽柳响应盐胁迫的作用机制,本研究以刚毛柽柳叶片为材料,对叶片总蛋白质的提取方法进行优化,探究出适用于双向电泳的刚毛柽柳叶片总蛋白质的提取方法,并建立NaHCO_3胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白质的表达谱。【方法】本研究比较了改良Tris-三氯乙酸,改良Tris-三氯乙酸+PVP40,改良Tris-三氯乙酸+丙酮和植物蛋白提取试剂盒法4种提取植物蛋白质的方法提取刚毛柽柳叶片总蛋白质的差异,并利用蛋白质双向电泳用技术研究NaHCO_3胁迫后刚毛柽柳叶片蛋白质表达变化,建立了盐胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白表达谱。【结果】采用改良Tris-三氯乙酸法提取刚毛柽柳叶片蛋白质,利用该方法可获得高质量的蛋白质样品,所得到的双向电泳凝胶图谱中蛋白质分离效果好、图谱分辨率高,通过Image Master 2D Platinum 7.0凝胶分析软件对NaHCO_3处理0和12 h的双向电泳凝胶图谱进行分析,获得了25个响应盐胁迫的差异表达蛋白质,并分析了差异表达蛋白量的变化。【结论】研究结果表明,利用改良Tris-三氯乙酸法提取刚毛柽柳叶片蛋白质适用于双向电泳体系,该方法可以用于对刚毛柽柳叶片蛋白质组学的研究。本研究建立了NaHCO_3胁迫下刚毛柽柳叶片差异蛋白质的表达谱,为进一步分析刚毛柽柳耐盐分子机制奠定了基础。