小鼠精原细胞移植技术的改进

目的对现有小鼠精原细胞移植技术进行改进,建立更具操作性,易于推广的新方法。方法分离含绿色荧光蛋白(GFP)的rC57BL6/tg14(act-EGFO-OsbY01)小鼠精原细胞作为供体细胞,应用自制的显微注射器将其从睾丸的精子输出管处,以锥虫蓝作为指示剂直接注入野生型预处理C57BL6小鼠精细管内完成移植。应用荧光显微镜观察移植效果并进行组织学分析。结果移植后受体小鼠睾丸出现绿色荧光信号,组织学检查发现精细管中荧光信号显著高于周围组织,移植的供体小鼠(GFP)的睾丸细胞在受体小鼠睾丸中形成克隆和形成精子,而预处理的野生型小鼠睾丸精细管未发现。结论含GFP蛋白的rC57BL6/tg14小鼠精原细胞在受体小鼠体内移植成功,此改进方法在简化精原细胞移植技术的同时可保证移植质量。