Galectin-3拮抗剂改良柑橘果胶对肺动脉高压大鼠的作用

目的通过使用Galectin-3特异性配体拮抗剂改良柑橘果胶(modified citrus pectin,MCP)对肺动脉高压(PAH)动物模型进行干预,探讨MCP对PAH的治疗效果。方法SD大鼠随机分为对照组、野百合碱(MCT)组、MCT+生理盐水组(MCT+saline)、MCT+MCP组。MCT组通过皮下注射MCT构建PAH模型,MCT+MCP组在注射MCT后使用MCP溶液灌胃。MCT+saline组在注射MCT后使用生理盐水灌胃。对照组在常规条件下饲养。对各组大鼠进行血流动力学、心脏形态、组织学及蛋白质表达等方面的检测。同时还检测PAH患者与健康对照者血浆中的Galectin-3水平。结果PAH患者血浆Galectin-3水平较健康受试者显著升高(P<0.05)。MCP能显著降低MCT诱导的PAH大鼠的肺动脉平均压、右室收缩压及大鼠右室/(左室+室间隔)重量比。PAH大鼠肺动脉血管重构明显,MCP能显著减轻PAH大鼠肺动脉血管重构,但MCP并不能减轻Galectin-3在肺血管外膜中的表达。MCP能显著减少PAH大鼠肺组织中的collagenⅠ、collagenⅢ蛋白含量,但MCP并不能减轻Galectin-3蛋白在PAH大鼠肺组织中的表达。结论MCP能够减低PAH大鼠的肺动脉压力,显著减轻PAH大鼠的肺动脉血管重构,表明Galectin-3在PAH的发病机制中起重要作用,靶向干预Galectin-3可能为PAH治疗提供新的思路。

半乳糖凝聚素3对心肌纤维化和心室重构的作用

目的通过半乳糖凝聚素3(Gal-3)特异性竞争拮抗剂——改良柑橘果胶(MCP)抑制Gal-3途径,探讨Gal-3在心功能不全心室重构中的作用。方法将30只家兔随机分为假手术组、心功能不全组、MCP组。结扎冠状动脉前降支,制作心肌梗死后心功能不全模型。模型制作成功后,MCP组用生理盐水配置75 g/L MCP,以2 m L/(kg·d)灌胃4周;假手术组及心功能不全组给予生理盐水2 m L/(kg·d)灌胃4周。术前及术后2、4、6周,用心脏超声仪测定各组家兔心功能,ELISA检测血清Gal-3、脑钠肽(BNP)水平。实时荧光定量PCR检测心肌组织Gal-3、胶原蛋白Ⅰ、ⅢmRNA的表达,计算Ⅰ/Ⅲ比值。术后6周,Masson染色观察心肌梗死区域组织病理学情况,Western blot检测Gal-3、胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的蛋白表达。结果给药4周后MCP组心功能较心功能不全组明显好转(P<0.01)。心功能不全组血清Gal-3高于假手术组(P<0.05),MCP组血清Gal-3较心功能不全组明显下降(P<0.05)。相关性分析显示,心功能不全组家兔心功能左心室射血分数与血清Gal-3呈负相关性(r=-0.841,P=0.009),左心室舒张末期内径与血清Gal-3呈正相关(r=0.905,P=0.002)。与心功能不全组相比,MCP组Gal-3、胶原蛋白Ⅰ、ⅢmRNA表达明显减低(P<0.05)。光学显微镜下心功能不全组可见心肌细胞排列紊乱,部分心肌细胞坏死、水肿,胶原大量沉积并伴有炎性细胞浸润;MCP组可见心肌纤维增粗,排列稍整齐。心功能不全组梗死区域心肌组织Gal-3、胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ蛋白表达明显高于MCP组和假手术组;相关性分析显示,心功能不全组梗死区域Gal-3与胶原蛋白Ⅲ呈正相关(r=0.793,P=0.019)。结论 Gal-3在心力衰竭心室重构和心肌纤维化进展中起到关键的作用。

Galectin-3拮抗剂——MCP对缺血性心功能不全的作用

目的:通过galectin-3(gal-3)抑制剂——改良的柑橘果胶(modified citrus pectin,MCP)治疗心肌梗死后心功能不全家兔,探讨MCP对缺血性心功能不全的治疗作用。方法:(1)30只家兔随机分为假手术组、心功能不全组、MCP组;(2)结扎冠状动脉前降支制作家兔心肌梗死后心功能不全模型,心功能不全模型制作成功后,MCP组予75mg/ml MCP(2ml·kg-1·d-1)、假手术组及心功能不全组予0.9%氯化钠溶液(2ml·kg-1·d-1)各灌胃4周;(3)心脏超声仪、ELISA法分别检测家兔术前及术后2、4、6周心功能及血清gal-3表达情况;(4)RT-PCR和WesternBlot分析心肌梗死边缘区gal-3、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白ⅢmRNA和蛋白表达水平,并计算胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ比值;(5)给药4周后取各组心肌梗死边缘区组织,用Masson法胶原染色分析心肌梗死边缘区纤维化。结果:(1)给药2周、4周后MCP组心功能较心功能不全组明显好转(P<0.01);(2)给药2周、4周后心功能不全组血清gal-3浓度远远高于MCP组(P<0.05);(3)给药4周后心功能不全组梗死边缘区gal-3、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ的mRNA表达较MCP组均明显增高(P<0.01);(4)光学显微镜下心功能不全组可见心肌细胞排列紊乱,部分心肌细胞坏死、水肿、肥大,心肌纤维增粗。小血管壁增厚并可见周围有大量蓝绿色胶原纤维增生并包绕分割心肌细胞,心肌间质纤维增生、胶原大量沉积并伴有炎性细胞浸润;(5)心功能不全组中梗死边缘区域心肌组织gal-3、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ蛋白表达明显高于MCP组和假手术组。结论:在心功能不全家兔中,gal-3表达的增加与心脏功能不全、纤维化、心肌胶原蛋白大量沉积有关,但是通过MCP可以阻止gal-3的表达,改善心肌梗死边缘区域的纤维化程度。gal-3在心室重构和其引起的功能障碍中起到关键的作用,gal-3或许可作为治疗心力衰竭新的靶点。