一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法

利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。

急性淋巴细胞性白血病微小残留病与中枢神经系统白血病的相关分析

目的 探讨急性淋巴细胞性白血病 (简称急淋 )缓解时和缓解期微小残留病 (MRD)的水平和变化以及与发生中枢神经系统白血病 (CNSL)的关系。方法 用改良一步煮沸法提取脑脊液DNA ,酚 /氯方法提取骨髓DNA ,巢式聚合酶链反应 (PCR)法和极限稀释定量PCR法追踪检测微小残留病 ,数据处理用Kaplan Meier方法及COX回归模型等。结果 46例急淋患儿缓解时骨髓MRD定量值与中枢神经系统白血病的发生呈正相关 (COX回归模型 ,γ =0 3496 ,P <0 0 5) ,脑脊液MRD阳性可预示发生CNSL的相对危险度 (P <0 0 5) ;缓解期脑脊液MRD持续阳性或由阴性转为阳性 ,发生中枢神经系统白血病的相对危险度明显增高 (P <0 0 5)。结论 缓解时骨髓MRD定量值和脑脊液MRD定性结果以及缓解期间脑脊液MRD的变化可以预示CNSL的危险度 。