拉萨地区制作改良罗氏培养基的条件探讨

目的:利用蒸汽凝固器在拉萨地区制作改良罗氏培养基的温度和时间设定值,探索适合拉萨地区改良罗氏培养基制作的条件。方法:利用标准配制改良罗氏培养基液,以推荐的85℃的温度50 min的时间为基础,设置不同的温度和时间进行比对,同时通过无菌试验和标准结核菌株、试验结核菌株生长试验得出适合拉萨地区的温度和时间。结果:标准配制的改良罗氏培养基液,蒸汽凝固器采用三次凝固,梯度提高温度的方法。第一次凝固:72℃50 min 4℃冰箱放置24 h;第二次凝固:78℃30 min 4℃冰箱放置24 h;第三次凝固:82℃50 min,为适合拉萨地区制作改良罗氏培养基的温度和时间。结论:应用蒸汽凝固器采用三次凝固,梯度提高温度的方法将温度设定为72℃~82℃之间耗时72 h制作的改良罗氏培养基无菌试验合格,标准结核菌株及试验结核菌株生长旺盛,适合拉萨地区制作改良罗氏培养基,有实验应用价值。

新型改良罗氏培养基与罗氏酸基检测结核分枝杆菌比较

目的研究一种快速、简单、廉价可靠的新型培养基,缩短结核分枝杆菌的培养时间,提高阳性率,以便广泛普及到基层单位。方法在改良酸性L-J培养基的成分上,试用猪肺肉汤替代蒸馏水加植物血凝素(PHA)、小牛血清、维生素E等混合物制成的固体培养基(简称新型改良罗氏培养基),对10例标准菌株及73例患者涂片阳性的标本进行培养,同时与改良罗氏酸性培养基作比较。结果 73例患者的结核分枝杆菌在新型改良罗氏培养基上实验组和对照组生长7～27 d,平均(13.9±4.4)d,实验组菌落粗大明显,对照组菌落细小变化不大。在改良罗氏酸性培养基上生长9～30 d,平均(23.1±5.1)d,菌落细小变化不大。结核分枝杆菌在不同培养基上生长时间差异有统计学意义(P<0.01)。10例标准菌株在改良罗氏酸性培养基生长时间平均7 d,形成针尖状菌落,新型罗氏酸性培养基实验组和对照组生长时间均为4 d,形成点状菌落,实验组放置7 d粗大"菜花"状菌落更明显。结论新型改良罗氏培养基不仅能缩短结核分枝杆菌的生长时间,而且使结核分枝杆菌生长旺盛,能及早做出药敏结果,为临床及早诊断和用药提供科学的数据。

应用BACTEC960系统与改良罗氏培养基从肺外标本分离培养分枝杆菌的效果比较

目的:比较BACTEC 960系统与改良罗氏培养基对肺外标本中分枝杆菌的分离培养效果。方法:应用上述两种方法,分别对382份肺外标本进行分离培养。结果:两种方法的总阳性率为7.33%。BACTEC 960系统培养阳性率为6.54%,平均报告时间14.3 d,污染率4.95%;改良罗氏培养基培养阳性率为3.93%,平均报告时间26.8 d,污染率2.12%。结论:对肺外标本中分枝杆菌的分离培养,BACTEC 960系统较改良罗氏培养基更为高效,但污染率略高。

高原制作改良罗氏培养基的条件探讨

目的利用蒸汽凝固器在高原制作改良罗氏培养基的温度和时间设定值,探索适合高原改良罗氏培养基制作的条件。方法利用标准配制改良罗氏培养基液,以推荐的85℃的温度、50 min的时间为基础,设置不同的温度、时间进行比对,同时通过无菌试验、H37RV标准结核菌株生长实验得出适合高原地区的温度、时间。结果标准配制的改良罗氏培养基液,蒸汽凝固器78℃、50 min为适合高原地区制作改良罗氏培养基的温度和时间。结论应用蒸汽凝固器时将温度设定为78℃,耗时50 min制作的改良罗氏培养基无菌试验合格、H37RV标准结核菌株生长旺盛,适合高原地区制作改良罗氏培养基,有推广应用价值。

痰直接厚涂片法和改良罗氏培养法检查结果的比较

目的探讨结核菌细菌学检查方法对肺结核的诊断价值。方法收集荆门市疾病预防控制中心结核病防治所2008年1-5月的30例临床肺结核患者的合格痰标本,对其采用直接厚涂片法(即在薄涂片法的基础上把痰液体积增加1.5-2.0倍量进行涂片),同时将标本接种到改良罗氏培养基上进行分支杆菌分离培养,并对涂片与培养结果进行比较与分析。结果30例肺结核患者的痰标本细菌学报告为:直接厚涂片法15例阳性,15例阴性;改良罗氏培养基法28例阳性,2例阴性。其中15例属涂片阳性培养阳性,13例属涂片阴性培养阳性,2例属涂片阴性培养阴性。结论痰涂片简便、快捷、成本低,是可以直接发现病原菌的检查方法,但其敏感性低;而传统的改良罗氏培养基法敏感性明显高于涂片法,精确可靠且特异性高,不仅能了解分枝结核杆菌有无生长繁殖能力,还为进一步试验(药敏、菌型鉴定)提供了基础。

两种不同固体培养基对结核分枝杆菌培养阳性率的影响

目的:了解和分析丙酮酸钠培养基与改良罗氏培养基对分枝杆菌培养阳性率的影响,为实验室提高分枝杆菌培养阳性率提供科学依据。方法:714份临床送检标本按常规进行有关前处理后同时接种于丙酮酸钠培养基与改良罗氏培养基,前两周每3天观察1次,以后每周观察1次,并记录出现阳性的时间,8周后未见生长者记录为阴性结果。结果:丙酮酸钠培养基与改良罗氏培养基总阳性率分别是24.09%和22.97%,两者比较差异无统计学意义。其中复治组病例阳性率分别是23.76%和19.80%,两者差异有显著性意义;出现阳性平均天数分别是25.33、31.29天。结论:丙酮酸钠培养基能提高分枝杆菌尤其是复治病例的培养阳性率,而且能比改良罗氏培养基平均提前6天得出阳性结果。

新型液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究

目的以新鲜椰子汁和马血清为基础成分,研制一种快速培养结核分枝杆菌的新型液体培养基。方法将300份肺结核患者痰液标本进行直接涂片镜检,按涂阳和涂阴标本配对接种在新型液体培养基和改良罗氏培养基上,比较两种培养基培养的阳性率和阳性结果出现的时间。结果在新型液体培养基与改良罗氏培养基上结核分枝杆菌培养总阳性率分别为36.0%、37.0%,直接涂片镜检阳性痰液标本在新型液体培养基与改良罗氏培养基培养阳性率分别为94.55%、96.36%,直接涂片镜检阴性的培养阳性率分别为2.1%、2.6%,组组各自比较差异均无显著性(P均>0.05);新型液体培养基平均(9.66±3.14)d出现阳性结果,而改良罗氏培养基平均(27.56±7.74)d出现阳性结果,两者差异有显著性(P<0.01)。结论新型液体培养基能快速培养出结核分枝杆菌,其制作方便,价格低廉,操作简单,适合于广大基层医疗机构使用。

结核分支杆菌生长因子培养基的临床应用

目的通过观察痰标本在结核分支杆菌生长因子培养基中生长情况,探讨结核分支杆菌生长因子培养基的特点。方法将痰标本进行中和处理,分别接种在结核生长因子、传统罗氏、BACTEC460培养仪上观察。结果141例痰标本平均初生长时间:生长因子培养基(6.98±0.68)d、BACTEC460培养仪(8.4±0.18)d、改良罗氏培养基(29.3±5.21)d。阳性率和污染率情况:生长因子培养基阳性率56.7%、污染率3.5%,BACTEC460培养仪阳性率56.0%、污染率5.0%,罗氏培养基阳性率49.6%、污染率3.5%。结论结核分支杆菌生长因子培养基具有培养速度快、阳性率较高,可以克服罗氏培养基培养时间长,BACTEC460培养仪成本昂贵等缺点。

结核分枝杆菌在两种培养基上生长情况的观察比较

目的:探讨结核分枝杆菌在改良罗氏培养基和丙酮酸钠培养基上阳性分离培养情况及形成菌落天数情况。方法:对100例新登记肺结核患者的痰液标本经去污染处理,接种在自制改良罗氏、丙酮酸钠培养基上。接种后在37℃孵箱内培养8周,每周观察一次记录菌落生长情况及污染情况。每份标本用改良罗氏培养基2支,丙酮酸钠培养基2支。结果:结核分枝杆菌在改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基上均生长20例,在改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基上均不生长70例。结核分枝杆菌在改良罗氏培养基上生长而在丙酮酸钠培养基上不生长6例,在丙酮酸钠培养基上生长,而在改良罗氏培养基上不生长4例。结核分枝杆菌改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基在形成典型菌落数上无差异(t=0.57,P>0.01)。结论:分枝杆菌分离培养检查法,是结核病确诊最可靠的方法。

双向培养基快速分离培养结核分支杆菌

目的建立一种快速、经济、准确培养分离结核分支杆菌的方法。方法用双向培养基培养不同稀释度标准结核分支杆菌H37Rv,记录出现阳性结果的时间,并与改良罗氏培养基配对比较;将200份肺结核患者痰液标本直接涂片镜检,按涂阳和涂阴标本配对接种于双向培养基和改良罗氏培养基上,比较其阳性率。结果标准结核分支杆菌H37Rv在双向培养基上(10.3±5.2)d出现阳性,而改良罗氏培养基(26.0±11.5)d出现阳性,两者差异有显著性(P<0.01);在双向培养基、改良罗氏培养基上结核分支杆菌总阳性率分别为37.5%和36.0%,涂阳标本在双向培养基、改良罗氏培养基上阳性率分别为97.14%和95.71%,涂阴标本在2种培养基上阳性率分别为5.38%和3.84%,组组各自比较差异均无显著性(P>0.05)。结论双向培养基能快速分离培养出结核分支杆菌,结果可靠,操作简单,价格低廉,适合广大基层医疗单位推广应用。

发展中国家使用固体和液体培养基进行结核分枝杆菌培养的费用和成本效益研究

背景:发展中国家已经提出通过开展结核分枝杆菌(以下简称结核分枝杆菌)培养来加强结核病(TB)控制工作。目的:研究赞比亚国家结核病参比实验室自制的和商业生产的改良罗氏培养基(HLJ和CLJ),以及自动和手工的液体培养基(AMGIT和MMGIT)费用和成本效益。方法:费用是从供应商的角度根据每月平均结核分枝杆菌培养标本量来进行估算的。成本效益的估计是建立在研究期间收益。结果:4种培养方法,每个标本培养成本相当(均在28～32美元之间)。发现1个结核分枝杆菌阳性样本,使用手动液体培养MMGIT、自动液体培养AMGIT、商业生产的改良罗氏培养CLJ和实验室自制的改良罗氏培养HLJ,成本分别为197美元,202美元,312美元和340美元。4种培养方法,当培养标本量达到最大时,发现1个结核分枝杆菌阳性样本成本均高于95美元。当仅对涂片阴性的样本进行检测时,应用手动液体培养MMGIT确定1个额外的结核分枝杆菌阳性样本需要487美元,其他方法价格更高。结论:基于成本效益的理由,液体培养基相比传统的固体培养基更好,特别是液体培养基的产量大大高于传统罗氏培养基。结果表明:总体上,结核分枝杆菌培养成本较高,将培养扩展到标本量较低的基层防治机构可能会导致更高的成本。

一种新型结核杆菌快速培养促生长剂的研制

目的以改良罗氏培养基为基础成分，研制一种快速培养结核杆菌的新型快速促生长剂。方法将结核杆菌H37Rv株和20株结核杆菌临床分离株，分别接种于含促生长剂的改良罗氏培养基和改良罗氏培养基上，观察两者的生长效果。结果结核杆菌H37Rv株在含促生长剂的罗氏培养基上5～7d可形成肉眼可见的米粒状菌落，而在改良罗氏培养基上14d才形成肉眼可见的米粒状菌落；采用结核杆菌临床分离株分别进行20组实验，在含促生长剂的罗氏培养基上的平均生长时间为7d，而在不含促生长剂的培养基上的平均生长时间为14．7d（P〈0．01）。结论新型结核杆菌促生长剂能使结核杆菌标准株和临床分离株在7d内快速培养出，此快速促生长剂的研制为结核杆菌的快速培养及结核病的诊断、化疗效果观察、流行病学调查、抗结核药物作用研究等有效的手段。

疑似支气管扩张的非结核分枝杆菌病10例临床分析

目的:分析极易与支气管扩张相混淆的非结核分枝杆菌病的临床特征,寻求两者鉴别诊断的依据。方法:对1998年6月至2004年3月间收治的10例肺泡灌洗诊断的非结核分枝杆菌病的患者进行回顾性分析。结果:非结核分枝杆菌病的病史、临床表现、胸片与支气管扩张没有明显的特征性区别。10例患者肺泡灌洗液涂片抗酸菌染色均为阳性,改良罗氏培养基培养:Ⅰ型堪萨斯分枝杆菌2例,偶发分枝杆菌1例,鸟复合分枝杆菌7例。痰普通细菌培养:绿脓杆菌2例,分枝杆菌30例次仅2例次阳性(2/30)。结论:支气管扩张与非结核分枝杆菌病鉴别诊断极为困难,病灶部位高分辨CT可提供诊断线索,支气管镜检查所提供的细菌学结果有鉴别诊断意义。

帕司烟肼对结核分枝杆菌的体外抑菌作用

帕司烟肼(Dipasic,DIP)是以特殊方法将异烟肼(INH)与对氨基水杨酸(PAS)分子化合而成,作为一种抗结核新药在临床上广泛应用.我们自2000年1月～2002年3月对临床分离的1 068株结核分枝杆菌分别进行了DIP的体外抑菌试验,并与INH和PAS的耐药情况进行比较分析,现将结果报告如下.