夹层杯集菌离心涂片法与改良罗氏培养法检测抗酸杆菌的比较

目的评价夹层杯集菌离心涂片法（夹层杯法）检测抗酸杆菌的临床诊断价值。方法收集2008年7—12月就诊于湖南省湘潭、湘乡、邵东和耒阳4个县（市）结核病防治部门共1190例肺结核可疑症状者的1782份痰标本（晨痰642份，即时痰1140份），每份标本同时采用夹层杯法与改良罗氏培养法（培养法）平行处理，对其检测结果进行比较。结果对晨痰标本检测的阳性率，培养法为26．64％（171／642），高于夹层杯法的阳性率23．52%（151／642），两者差异有显著性（Х^2=4．56，P=0．04）；对即时痰标本检测的阳性率，培养法为23．33％（266／1140），高于夹层杯法的阳性率18．07％（206／1140），两者差异有高度显著性（Х^2=34．60，P=0．00）。夹层杯法对晨痰的阳性检出率高于即时痰（Х^2=7．62，P=0．01）；培养法对晨痰的阳性检出率与即时痰比较，差异无显著性（Х^2=2．42，P=0．12）。结论夹层杯法检测抗酸杆菌的阳性率低于培养法，但简单、省时，便于进行质量控制，是一种很有推广价值的检测方法；夹层杯法检测晨痰抗酸杆菌的阳性率较高，故应尽量留取晨痰作抗酸杆菌检测。

痰直接厚涂片法和改良罗氏培养法检查结果的比较

目的探讨结核菌细菌学检查方法对肺结核的诊断价值。方法收集荆门市疾病预防控制中心结核病防治所2008年1-5月的30例临床肺结核患者的合格痰标本,对其采用直接厚涂片法(即在薄涂片法的基础上把痰液体积增加1.5-2.0倍量进行涂片),同时将标本接种到改良罗氏培养基上进行分支杆菌分离培养,并对涂片与培养结果进行比较与分析。结果30例肺结核患者的痰标本细菌学报告为:直接厚涂片法15例阳性,15例阴性;改良罗氏培养基法28例阳性,2例阴性。其中15例属涂片阳性培养阳性,13例属涂片阴性培养阳性,2例属涂片阴性培养阴性。结论痰涂片简便、快捷、成本低,是可以直接发现病原菌的检查方法,但其敏感性低;而传统的改良罗氏培养基法敏感性明显高于涂片法,精确可靠且特异性高,不仅能了解分枝结核杆菌有无生长繁殖能力,还为进一步试验(药敏、菌型鉴定)提供了基础。

T-SPOT.TB与分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核诊断中的价值比较

目的比较结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核诊断中的价值。方法选择2017年1月至2018年1月于新蔡县人民医院就诊的80例疑似肺结核患者为研究对象,以分枝杆菌改良罗氏固体培养法为金标准,采用Kappa一致性检验分析T-SPOT.TB检查结果与金标准的一致性。结果 80例疑似肺结核患者中,分枝杆菌改良罗氏固体培养法检测活动性结核病显示41例为阳性,39例为阴性。80例疑似肺结核患者中,T-SPOT.TB检测结核分枝杆菌感染显示46例为阳性,34例为阴性。T-SPOT.TB与分枝杆菌改良罗氏固体培养法的一致性Kappa值为0.763,一致性良好。结论 T-SPOT.TB有助于检测结核分枝杆菌感染,从而辅助指导肺结核的诊断。

最低抑菌浓度法在耐药结核分枝杆菌药敏试验中的应用

目的分析最低抑菌浓度法(MIC法)在耐药结核分枝杆菌药敏试验中的应用价值。方法对129例临床培养阳性的结核分枝杆菌进行抗结核药物敏感性检测,以改良罗氏比例法药敏试验结果为金标准,分析微量MIC法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值及诊断符合率。结果以改良罗氏比例法药敏试验为金标准,MIC法药敏试验对于链霉素(SM)药敏检测的灵敏度为100.0%,特异度为97.1%,阳性预测值为89.6%,阴性预测值为100.0%,诊断符合率为97.7%;对异烟肼(INH)药敏检测的灵敏度为96.3%,特异度为98.0%,阳性预测值为92.8%,阴性预测值为99.0%,诊断符合率为97.7%;对利福平(RFP)药敏检测的灵敏度为95.0%,特异度为99.1%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为99.1%,诊断符合率为98.4%;对乙胺丁醇(EMB)药敏检测的灵敏度为83.3%,特异度为99.1%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为98.3%,诊断符合率为97.7%;对卡那霉素(KAN)药敏检测的灵敏度为38.5%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为93.5%,诊断符合率为93.8%;对氨基水杨酸(PAS)药敏检测的灵敏度为50.0%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为96.8%,诊断符合率为96.9%;对卷曲霉素(CPM)药敏检测的灵敏度为66.6%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为98.4%,诊断符合率为98.4%。结论与改良罗氏比例法药敏试验比较,MIC法药敏试验对于4种一线抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇和3种二线抗结核药物卡那霉素、对氨基水杨酸、卷曲霉素的药物敏感性检测符合率较高,同时也是一种快速、操作方便、定量和准确的方法,结合药物的MIC值可以为临床个体化用药精准治疗提供依据,同时也有利于新药的研究和开发,更好的满足临床需求。

荧光PCR熔解曲线法快速检测耐多药结核菌的临床应用

目的评价荧光PCR熔解曲线法快速检测耐多药结核菌的临床应用价值。方法选取157例结核病患者痰标本,培养阳性标本同时采取改良罗氏比例法、MGIT960液体培养法和荧光PCR熔解曲线法检测利福平和异烟肼的药物敏感性。结果三种方法对同一菌株的药物敏感性比较,差异无统计学意义(P均>0.05);荧光PCR熔解曲线法检测耐多药与MGIT960液体培养法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论荧光PCR熔解曲线法可用于耐多药结核菌的快速检测,为临床早期诊断、治疗提供依据。

噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的药物敏感性应用价值

目的探讨噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定结核分枝杆菌对异烟肼(INH)和利福平(RFP)的药物敏感性在临床应用价值。方法选择初治肺结核病患者留痰后培养获得的结核分枝杆菌菌株69株和复治患者留痰后培养获得的结核分枝杆菌菌株98株。均经改良罗氏培养基培养并进行菌型鉴定,证实为结核分枝杆菌(MTB)。分别采用PhaB法和改良罗氏比例法检测其对INH和RFP的耐药性,将2种方法的结果进行敏感度、特异度和符合率比较。结果(1)初治结核分枝杆菌69株中,与改良罗氏比例法比较,PhaB法检测INH的敏感度、特异度和符合率分别为80%(4/5)、90.6%(58/64)和89.9%(62/69);PhaB法检测RFP的敏感度、特异度和符合率分别为100%(3/3)、95.5%(63/66)和95.7%(66/69)。(2)复治结核分枝杆菌98株中,与改良罗氏比例法比较,PhaB法检测INH的敏感度、特异度和符合率分别为89.7%(35/39)、88.1%(52/59)和88.7%(87/98);PhaB法检测RFP的敏感度、特异度和符合率分别为97.1%(34/35)、93.7%(59/63)和94.9%(93/98)。结论噬菌体生物扩增法同改良罗氏比例法比较有较高的敏感度、特异度和符合率,可快速、准确地检测结核分枝杆菌对INH和RFP的耐药性。

两种方法在结核分枝杆菌培养中的比对研究

目的比较MGIT960系统液体培养法与改良罗氏(L-J)培养法在结核分枝杆菌培养中的效果。方法选择2015年1月至2017年12月到该所就诊的活动性肺结核患者3 685例,对每份病例标本分别进行痰涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检、改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法,并分别计算抗酸染色镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率;统计改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性率、污染率及培养时间。结果痰涂片镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率分别为94.21%(114/121)和82.64%(100/121)。改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法结果符合率为93.70%(3 197/3 412),所需的培养时间分别为28.0(25.0~31.0)d和16.5(14.0~19.0)d。结论MGIT960系统液体培养法阳性率与传统的改良罗氏(L-J)培养法基本一致,报告时间平均缩短至16.5 d,比改良罗氏(L-J)培养法提前10.0 d以上,为临床早诊断、早治疗提供了可靠依据,而且为后续进行的药敏试验提供了菌株。

三种方法检测结核分枝杆菌复合群的比较分析

目的初步研究恒温扩增法(Isothermal amplification)、环介导恒温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、改良罗氏培养基培养法在诊断结核分枝杆菌(Mtuberculosis,Mtb)复合群的临床验证和应用,评估这三种方法检测Mtb复合群的效能。方法选取肇庆市8县区的结核病防治机构2015年1月-2016年8月1496份痰标本,取587例痰培养阳性的培养物,同时进行恒温扩增法、LAMP、改良罗氏培养法检测Mtb复合群。结果罗氏培养法Mtb复合群阳性587例,阳性率39.2%(95%CI:36.7%-41.7%),以此作金标准。恒温扩增法检测Mtb复合群阳性570例,阳性率38.1%(95%CI:35.6%-40.6%),其灵敏度93.1%(95%CI:90.8%-95.1%),特异度97.4%(95%CI:96.2%-98.4%),阳性预期值95.9%(95%CI:94.0%-97.4%),阴性预期值95.6%(95%CI:94.1%-96.9%);LAMP检测Mtb复合群阳性578例,阳性率38.6%(95%CI:36.1%-41.2%),灵敏度93.1%(95%CI:90.8%-95.1%),特异度96.5%(95%CI:95.2%-97.7%),阳性预期值94.6%(95%CI:92.5%-96.3%),阴性预期值95.6%(95%CI:94.1%-96.9%)。结论改良罗氏培养基培养法诊断Mtb复合群具有高度的准确度和特异性,恒温扩增法和LAMP具有等同效能,而LAMP实操比更优,更适合基层结核病实验室应用。

结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法的研究

目的评价结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法在肺结核诊治中的应用价值,建立一种经济、快速的结核分枝杆菌培养方法。方法将能与结核菌代谢产物-烟酸发生颜色反应的物质加入结核分枝杆菌液体培养基中,对128例患者痰标本进行抗酸菌培养,同时以改良罗氏培养法作为对照,对两种方法所用时间进行比较。结果快速烟酸测定法比改良罗氏培养法提前10 d左右。结论快速烟酸测定法比常规结核分枝杆菌培养方法所用时间短,经济、实用、快速,适合在各级结核病医院推广应用。

痰涂片法与痰培养法检测抗酸杆菌结果比较

为评价痰标本直接厚涂片法和改良罗氏培养法检测抗酸杆菌对肺结核的诊断价值，笔者对377例肺结核患者同时应用这两种方法进行抗酸杆菌检测。现将结果报道如下：

PCR-荧光探针法与RNA恒温扩增法对肺结核诊断的价值

目的探讨RNA恒温扩增法和PCR-荧光探针法在肺结核临床诊断中的价值及意义。方法以403例临床病原学确诊的肺结核病人为观察组,50例无肺部疾病病人为对照组,分别采用齐-尼痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、PCR-荧光探针法和RNA恒温扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌,并将检测结果进行对比分析。结果齐-尼痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、PCR-荧光探针法和RNA恒温扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌的灵敏度分别为37.5%、65.2%、68.7%、60.8%;特异度分别为100%、100%、98%、100%。结论PCR-荧光探针法与RNA恒温扩增法检测结核分枝杆菌快速、敏感、可靠,适合作为肺结核实验室辅助临床诊断的有效检测方法,可为肺结核的早期诊断和早期治疗提供重要依据。

BACTEC460—TB自动快速检测结核菌的临床应用及评价

目的 评价BACTEC460-TB自动快速检测系统检查结核菌的临床应用价值。方法 应用BACTEC460检测系统。对2296份临床标本进行检测，并与改良罗氏法进行比较分析。结果 BACTEC法的阳性率为38.9%，分离培养、药敏试验，菌型鉴定所需平均时间分别为10.8天，6.5天，3.5天，均与改良罗氏法（阳性率为29.7%；平均时间分别为28.5天、21.2天，21.2天）有着显著的差异（P<0.01）。结论 BACTEC460系统快速检测分枝杆菌与常规法相比具有初代分离率高、快速、简要、易于操作及质控等特点，是一种比较理想的快速检测结核菌的方法。

脊柱结核不同技术与病理标本结核分枝杆菌培养及药敏试验对比

目的比较研究脊柱结核Bac T/ALERT3D法、改良罗氏培养法等不同技术与病理标本脓液、病灶壁等结核分枝杆菌培养及药敏试验结果,探讨应用价值较高的技术和标本。方法 2016年2月—2018年2月期间,方便选择该院脊柱结核患者的病理标本作为资料,共96例,包含脓液、病灶壁,并进行结核分枝杆菌培养,分别采用Bac T/ALERT3D法、改良罗氏培养法,并针对培养阳性细菌进行药敏试验,分析不同培养方法、不同病理组织标本的阳性率,并进行比较。结果在BacT/ALERT3D法中,病理标本病灶壁培养结果阳性率45.09%显著高于脓液阳性率28.98%(χ2=16.41,P<0.05),在改良罗氏培养法中,病理标本病灶壁培养结果阳性率31.27%显著高于脓液阳性率16.24%(χ2=18.55,P<0.05),即不同病理标本培养结果均存在差异,且均以病灶壁阳性率最高(P<0.05)。结论与改良罗氏培养法相比,Bac T/ALERT3D法检出率更高,利于结核病的早期诊治,其中病灶壁标本培养阳性率更高,应用价值相对更高,值得推广应用。

阿克苏地区噬菌体快速检测结核分支杆菌的临床应用及研究

结核分枝杆菌是结核病的病原菌。据中国防痨协会报道，我国结核病的发病率目前呈逐年上升趋势，而阿克苏地区亦不例外，是新疆结核病的高发区。寻求一种新的检测方法迅速提高结核菌的阳性检出率，对我区结核病的防控和治疗均有重要意义。我们用涂片法、噬菌体裂解法、改良罗氏培养法进行了对比试验，现将结果报告如下：

肺结核临床诊断中应用LAMP技术的价值分析

目的:探讨环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核诊断中的潜在应用。方法:回顾性分析305例2020年6月~2023年6月保定市第二中心医院收治的疑似肺结核患者的临床资料,以病理结果为依据,纳入非肺结核病组(123例)和肺结核组(182例)。分析不同性状痰标本中,应用改良罗氏培养法、涂片抗酸染色法、LAMP检测结核分枝杆菌的阳性情况、诊断结果以及价值。结果:较涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法,LAMP各种样本性状的检查阳性率均相对较高,其中相较于其他样本性状,各项检查对样本性状为干酪痰的检查阳性率均相对较高。涂片抗酸染色法检查结果显示,阳性80例,阴性119例,误诊4例,漏诊102例;改良罗氏培养法检查结果显示,阳性104例,阴性120例,误诊3例,漏诊78例;LAMP检查结果显示,阳性135例,阴性121例,误诊2例,漏诊47例。与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法检查进行比较,LAMP检查诊断结核分枝杆菌的敏感度、阴性预测值、准确度及曲线下面积(AUC)值均相对较高,其中涂片抗酸染色法敏感度、准确度及AUC值均低于改良罗氏培养法(P<0.05)。结论:LAMP技术有利于鉴别各种性状样本的结核分枝杆菌,并且对痰液样本中的结核分支杆菌具有较高的检测诊断敏感度、阴性预测值和准确度,对肺结核的诊断价值更高。

夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌及影响检出率的因素分析

目的探讨夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用价值以及了解影响痰液抗酸杆菌检出率的因素。方法收集735例确诊肺结核住院患者的痰标本,每例患者分别留取晨痰、夜间痰、即时痰各一份,每份标本同时采用夹层杯法与改良罗氏培养法平行处理,比较两种方法的阳性检出率以及不同性质和不同时段痰标本的抗酸杆菌阳性检出率。结果夹层杯法和改良罗氏培养法检测2 205份痰标本的阳性率分别为28.9%和32.1%,二者相比较差异有统计学意义(χ2=54.744,P<0.001);以培养法为标准,夹层杯法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为89.39%、99.53%、98.90%和95.21%;夹层杯法检测抗酸杆菌的阳性率脓性痰和血痰高达53.3%和48.5%,黏液痰和唾液痰只有9.9%和3.7%,培养法亦以脓性痰阳性率最高,达到54.8%,血痰次之,阳性率为51.3%,黏液痰阳性率为13.5%,唾液痰阳性率最低,仅为8.8%;对于不同时段的痰标本,两种方法检测抗酸杆菌的阳性率均以晨痰最高。结论夹层离心集菌涂片法是一种简单、省时、阳性检出率高,更利于标准化的抗酸杆菌检验方法,且与改良罗氏培养法相比有较好的符合率,可能是一种具有推广价值的检测方法;晨痰、脓性痰、血痰阳性检出率高,应强调收集晨痰、脓性痰、血痰送检。

三种检测技术在涂阴肺结核快速诊断中的应用

目的 探讨三种检测技术在涂阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法 选取2017年12月-2019年12月于东方市人民医院收治疑似肺结核患者116例,根据临床诊断作为确诊涂阴肺结核标准,将116例患者分为肺结核组73例和非肺结核组43例。纳入患者均给予利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Gene Xpert MTB/RIF)、基因芯片技术和改良罗氏培养法送检痰液,分析三种检测方法对涂阴肺结核的诊断效能;以罗氏比例法检测分枝杆菌利福平药敏性为标准,比较Gene Xpert MTB/RIF技术、基因芯片技术对分枝杆菌利福平药敏性评估价值。结果 肺结核组肺结核接触史、吸烟、饮酒例数均高于非肺结核组(P<0.05),卡介苗接种史、卡痕例数均低于非肺结核组(P<0.05);改良罗氏培养法、Gene Xpert MTB/RIF技术、基因芯片技术和三种技术联合的灵敏度分别53.42%、72.60%、63.01%和86.30%,特异度分别为100%、86.05%、93.02%和88.37%,Kappa值分别为0.460、0.550、0.503和0.729。罗氏比例法检测分枝杆菌利福平敏感34株,Gene Xpert MTB/RIF技术检测分枝杆菌利福平敏感32株、Kappa值0.720,基因芯片技术检测分枝杆菌利福平敏感31株、Kappa值0.444。结论 Gene Xpert MTB/RIF技术、基因芯片技术和改良罗氏培养法联合检测可提高涂阴肺结核诊断效能,且三种检测技术评估结核分枝杆菌的利福平敏感性一致性较好。